schb对uva损伤hacat细胞和鼠皮肤的保护作用的-研究

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1、中图分类号：R758.14论文编号：HBLH2014-733UDC：密级：公开硕士学位论文SchB对UVA损伤HaCat细胞和鼠皮肤的保护作用的研究作者姓名：马东东学科名称：外科学研究方向：皮肤性病学学习单位：河北联合大学学习时间:3年提交日期:2014年5月12日申请学位类别：医学硕士导师姓名：卢涛教授单位：武警后勤学院附属医院论文评阅人：牛云彤副教授单位：武警后勤学院附属医院蒋靖教授单位：南开医院论文答辩日期：2014年6月5日答辩委员会主席：张英泽教授关键词：五味子乙素；光老化；HaCat细胞；小鼠；氧化损伤；紫外线唐山河北联合大学2014年6月万方数据万方数据Fruct

2、usSchBTheProtectiveEffectandMechanism ResearchofUVADissertationSubmittedtoHebeiUnitedUniversityinpartialfulfillmentoftherequirementforthedegreeofMasterofMedicinebyMaDongdong(Surgery)Supervisor:Ph.DLuTaoJune,2014万方数据万方数据独创性说明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含

3、其他人已经发表或撰写的研究成果，也不包含为获得河北联合大学以外其他教育机构的学位或证书所使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中做了明确的说明并表示了谢意。论文作者签名：日期：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解河北联合大学有关保留、使用学位论文的规定，即：已获学位的研究生必须按学校规定提交学位论文，学校有权保留、送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校可以将学位论文的全部或部分内容采用影印、缩印或编入有关数据库进行公开、检索和交流。作者及导师同意论文公开及网上交流的时间：□自授予学位之日起；□自年月日起。作者签名：导师签名：签字日期：年月日签

4、字日期：年月日万方数据万方数据摘要摘要目的1探讨五味子乙素对长波紫外线（UVA）诱导人皮肤角质形成细胞损伤的保护作用及其可能机制。2研究五味子乙素是否具有抗紫外线诱导急性光损伤的作用，并探讨其作用机理。方法1将HaCat细胞放入5%CO2孵箱中培养，10%FBS的低糖DMEM培养，每天换液。实验设对照组（不经UVA照射）、模型组（UVA照射剂量为1、5、10、15J/cm2）及ShcB1～4组（UVA照射后分别加入ShcB0.1、0.01、0.001、0.1μmol/L）。UVA波长为320～400nm，照射距离为1cm。倒去各组的细胞培养液，PBS洗2次，再加入适量的冷PBS

5、覆盖，照射后加入无血清的培养液继续培养，通过检测细胞存活率来确定合适的照射强度。采用合适强度UVA处理HaCat细胞，给予不同浓度的SchB处理UVA损伤后的HaCat细胞。2昆明小鼠被随机分成4组，每组10只。除正常对照组外，其余各组均接受10J/cm2UVA照射，用HE染色法观察每组的病理改变，免疫组化观察Ⅰ、Ⅲ型胶原、bax、bcl－2的的变化。3SD大鼠被随机分成4组，每组10只。除正常对照组外，其余各组均接受10J/cm2UVA照射，累计照射剂量达120J/cm2，用HE染色法观察每组的病理改变。结果1UVA实验照射剂量的确定对照组和1、5、10、15J/cm2模型组

6、HaCat细胞的存活率分别为（100.00±6.31）%、（98.10±5.78）%、（75.05±8.64）%、（66.10±5.61）%和（53.71±2.59）%，差异有统计学意义（P＜0.01）。随UVA照射剂量增大，HaCat细胞存活率逐渐降低，预实验发现细胞存活率低于70%时，再给于SchB保护时受损HaCat细胞几乎不再增殖，GSH-Px、SOD、LDH、NO几乎无差别，不符合实际情况，故选择5J/cm2作为实验照射剂量。2不同浓度SchB对UVA损伤后HaCat细胞有保护作用，SchB3组细胞存活率最高，但随SchB浓度降低，药物的保护作用减弱。3不同浓度Sch

7、B对HaCat细胞GSH-Px、SOD、LDH、NO含量的影响与对照组比较，模型组的GSH-Px、SOD活性降低，LDH、NO含量升高（P＜0.05）。与模型组比较，SchB1～4组均能提高SOD活性，降低LDH、NO含量，除SchB4组外，SchB1～3组均能提高GSH－Px活性。4五味子乙素可以抑制UVA照射导致的小鼠皮肤损伤。5实验说明UVA实验组小鼠Bcl-2蛋白的表达明显降低；Bax蛋白的表达明显增多；CollagenI、CollagenIII表达明显减少。五味子乙素可以上调Col