三种诱导骨再生膜的构建及其诱导成骨能力的比较

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1、三种诱导骨再生膜的构建及其诱导成骨能力的比较作者：姜文学，曹现林，徐东明，胡茂忠，尤佳，孙洪范'　摘要:目的制备PLGA-bBMP，PLGA-bBMP-IGF-Ⅱ，PLGA-bBMP-IGF-Ⅱ-bFGF三种诱导骨再生膜并比较其修复兔桡骨骨缺损的效果，探讨其作用机制。方法将IGF-Ⅱ，bFGF和bBMP，分别与PLGA复合成具有生物活性的三种诱导骨再生膜，用其修复兔桡骨骨缺损，以单纯PLGA膜作为对照组，分别在2、4、8周进行大体、组织形态学、四环素示踪和组织形态计量学观察骨缺损的修复情况，并作统计学分析;免疫组织化学检

2、测三种生长因子存在时间。结果提取的小牛骨bBMP能诱导成骨，三种诱导骨再生膜均能在体内诱导新骨的形成，明显优于PLGA（对照组），其诱导效果呈现PLGA/bBMP（B组）　　ConstructionofThreeKindsofMembraneGuidedBoneRegenerationandparisonofTheirOsteogenesisCapabilityinVivo　　Abstract:ObjectiveToconstructthreekindsofartificialperiosteumorpho-geicpr

3、otEin），PLGA/bBMP+IGF-Ⅱ（Isulin-likeGroechanism.MethodsTheArtificialPeriosteumsembraneandplantedintothedefectsofradiusin18rabbitsmodels，gross，histologicalandim-munohistochemicalexaminationetricalhistologicalanalysisuscleandthreekindsofartificialperiosteumprovidedex

4、cellentconditionhadroleasguidedboneregeneration;AdministrationofIGF-ⅡbinedledtoincreasethansinglefactoronthePLGAartificialperiosteum.ThereoneBMP、bFGFandIGF-Ⅱ.　　Key;polylacticl-glycolicacidcopolymer;groembraneguidedboneregeneration，MGBR）是利用生物相容性良好的膜材料植入骨缺损周围，隔绝和保护

5、骨缺损，并引导和调动组织自身的愈合能力，通过骨组织再生来修复缺损［1～3］。实验证明，聚乳酸-聚羟基乙酸（polylacticl-glycolicacidcopolymer，PLGA）膜具有良好的骨引导作用，但其本身无骨诱导作用。近年来，很多学者倡导将MGBR技术与骨生长因子联合应用，以促进骨再生，获得了比单纯使用MGBR技术更好的效果［4］。本实验将碱性成纤维细胞生长因子（basicfibroblastgroorphogeicpro-tein，bBMP）与PLGA膜复合，制备三种诱导骨再生膜，通过其修复兔桡骨缺损的实验

6、，观察MGBR作用、降解特性、生长因子的缓释作用及诱导成骨作用，旨在研制具有骨引导和骨诱导双重成骨作用的可降解性诱导骨再生膜。　　1材料与方法　　1.1实验动物昆明小鼠10只（北京动物所），鼠龄1.5个月，体重25～28g。日本大耳白兔27只（天津实验动物中心），兔龄5个月，体重2.0～3.0kg。　　1.2bBMP提取及肌袋诱导成骨试验参照Urist方法［5］提取新鲜小牛长骨的bBMP，将提取bBMP冻干粉埋植于12只小鼠左下肢肌肉内，5mg/只;右下肢为对照侧，模拟手术注射生理盐水。于植入术后1、2、3周切取局部组织

7、，HE染色观察。　　1.3三种诱导骨再生膜的制备将90mg/mL的PLGA三氯甲烷溶液，在载玻片上流沿成膜，室温挥发15min，得到PLGA膜;用一定方法分别依次将5mg的bBMP，40活性单位IGF-Ⅱ和5μgbFGF吸附在PLGA膜上，室温挥发24h至干燥，得到PLGA/bBMP，PLGA/bBMP+IGF-Ⅱ，PLGA/BMP+IGF-Ⅱ+bFGF三种膜，塑料袋封装，环氧乙烷消毒备用。扫描电镜观察膜表面微观结构。　　1.4建立动物模型和实验分组27只日本大耳白兔，随机分3组，每组9只，按　　2.3.2PLGA/bB

8、MP实验组观察（B组）Giemsa染色:术后2周PLGA/bBMP膜完整，膜管外结缔组织大量增生，可见来自骨端的间充质细胞长入，缺损区断端少许骨皮质坏死，缺损区有少量新骨形成（见图5a）;4周缺损区内形成较多新骨，成骨细胞和成软骨细胞增殖较活跃（见图5b）;8周膜管内骨缺损已被新生骨所连接，膜外形成少量骨痂（见图5c