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1、血液交叉配血试验标准操作规程血液交叉配血试验标准操作程序交叉配血主要是检查受血者血清中有无破坏供血者红细胞的抗体,故受血者血清加供血者红细胞相配的一管称为“主侧”;供血者血清加受血者红细胞相配的一管称为“次侧”,两者合称交叉配血。交叉配血试验又称不配合性试验,是确保患者安全输血必不可少的试验,完整的操作规程应包括:①查阅受血者以前的血型检查记录,如与这次检查结果有所不同,应及时分析原因;②对收到的受血者血样应作ABO正反定型,Rh血型和其他血型检查以及血型抗体检测和鉴定;③选择预先进行血型检查的合格供血者作交叉配血试验。一、配血要求1.受血者配血试验的血
2、样(血型复查)必须是输血前三天之内的;2.核对病人资料:核对输血申请单、受血者血样、病历三者,其内容包括:患者姓名、性别、年龄、科室床号、住院号、血型(原始血常规血型和血型复查中血型)、用血品种、用血量等,必须正确无误;3.核对血液:血液完整性、血液标签、血液质量;4.核对取血凭证:按临床(取血凭证)实际用血品种、量进行配发血;5.配血前,先复查受血者和供血者ABO血型(正、反定型)、Rh(D)血型和抗筛,并报告其结果;6.在电子病历或急诊医生工作站中,检查临床输血五项的执行情况;7.输注全血、浓缩红细胞、洗涤红细胞、浓缩白细胞等患者应进行交叉配血试验,
3、其方法:采用盐水配血试验、凝聚胺法。二、盐水配血试验标准操作程序【方法原理】本法是目前最常用的配血方法,可以发现临床上最重要的ABO不配合性。当受血者血清(浆)和供血者红细胞经混合并离心后,如有ABO不配合问题,就会很快显示出来。【标本采集和处理】1.标本采集:常规静脉采血3ml于EDTA.K2。2.标本采取时间:要求受检者血样一定要在输血前48h(抗筛是48h)内采集,血样必须是新近的,无溶血现象。【试剂】1.抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体长春博德)2.Anti-D(IgM)Biotest。3.0.9%生理盐水【操作步骤】1.从贮血冰箱中取出所需血液
4、,取试管一支,贴上小标签,在血袋配血管中剪下配血管于试管内。2.取试管二支,标明主次侧,主侧管加受血者血清(浆)2滴,供血者5%红细胞悬液1滴;次侧管加供血者血清(浆)2滴,受血者5%红细胞悬液1滴。混匀,以1000r/min离心1min。3.观察结果:轻轻侧动试管,冬季应注意冷集素干扰。ABO同型配血,“主侧”和“次侧”均无溶血及凝集表示无输血禁忌,可以输血。三、凝聚胺配血试验标准操作程序【方法原理】利用低离子介质(LIM),降低介质的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,以促进红细胞和血清(浆)中的抗体结合。加入凝聚胺(Polybrene)溶液后,可使
5、红细胞产生非特异性的凝聚。最后,加入悬浮液(Resuspending)具有中和凝聚胺的作用,使正常的红细胞非特异性凝集散开,试验结果为阴性;但如果红细胞被相应抗体致敏,则会被凝聚胺凝结,凝集就不会散开,试验结果为阳性。【标本采集和处理】1.标本采集:常规静脉采血3ml于EDTA.K2。2.标本采取时间:要求受检者血样一定要在输血前48h内采集,血样必须是新近的,无溶血现象。【试剂】1.抗A抗B血型定型试剂(单克隆抗体长春博德)2.Anti-D(IgM)Biotest。3.0.9%生理盐水4.凝聚胺试剂:低离子介质(LIM)、凝聚胺(Polybrene)、
6、悬浮液(Resuspending)。【操作步骤】1.从贮血冰箱中取出所需血液,取试管一支,贴上小标签,在血袋配血管中剪下配血管于试管内。2.取试管二支,标明主次侧,主侧管加受血者血清(浆)2滴,供血者5%红细胞悬液1滴;次侧管加供血者血清(浆)2滴,受血者5%红细胞悬液1滴。3.各加LIM0.7ml,混匀,再各加Polybrene溶液2滴,并混匀。4.用离心机1000g离心力(普通离心机以3400rpm),离心10秒,然后把上清液倒掉,轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,无凝集,则必须重做。5.最后加入Resuspending2滴,轻轻转动试管混合并同时观
7、察结果,如在30秒内凝集散开,代表是由Polybrene引起的非特异性凝集,配血结果相合;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相合。如反应可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察。6.血液交叉合格后,应在医院血库管理软件中进行配血、出库操作,打印血液交叉报告单和患者输血不良反应反馈单。然后,保存。【附注】血液样本的保留和贮存:受血者和供血者的血液样本必须密封或盖紧,在每次输血之后,应在2~6℃保存至少7天以上。
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