βactin在无菌性前列腺炎大鼠模型中免疫抑制治疗前后的表达及意义

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1、βactin在无菌性前列腺炎大鼠模型中免疫抑制治疗前后的表达及意义【摘要】目的：检测βactin在大鼠慢性无菌性前列腺炎（nonbacterialchronicprostatitis，CAP）动物模型免疫抑制治疗前后的表达，探讨其与慢性无菌性前列腺炎发病机制的相关性.方法：成年SpragueDaodelratsbeforeandafterimmunosuppressivetherapy,andtoevaluateitscorrelationlydividedinto4groups,alcontrolgroup(A),modelgroup(B),im

2、munosuppressivetherapygroup(C)andtheplacebocontrolgroup(D).Theratsg/kg·d,s.c.)for30daystoprepareCAPmodels.Immunohistochemistryinetheβactinexpressionineachgroup.RESULTS:paredportantroleinthepathogenesisofnonbacterialchronicprostatitis.　　【Keyo雄性SpragueDag/(kg·d)，连续4g/(kg·d)灌胃3g/(

3、kg·d)灌胃的方法.　　1.2.2免疫组化取各组大鼠前列腺背外侧叶组织，福尔马林固定，石蜡包埋，切片脱蜡至水.蒸馏水冲洗，PBS浸泡5min，微波抗原修复.30mL/LH2O2室温孵育10min，以消除内源性过氧化物酶的活性，PBS冲洗，2min×3次.100mL/L正常山羊血清封闭，室温孵育10min.倾去血清，滴加1∶400一抗，4℃过夜.PBS冲洗，2min×3次.滴加适当比例稀释的生物素标记山羊抗小鼠二抗（10mL/LBSAPBS稀释），37℃孵育30min.PBS冲洗，2min×3次.滴加适当比例稀释的辣根酶标记链霉卵白素（PBS稀释），3

4、7℃孵育10～30min.PBS冲洗，2min×3次.DAB显色.自来水充分冲洗，复染，脱水透明、封片.　　1.2.3图像分析将βactin的免疫组化片放在40倍物镜下，每张切片随机选取20个视野扫描，输入TECBIAS6803真彩色生物医学图象分析系统.　　统计学处理：数据用x±s表示，采用SPSS11.5统计软件行非参数u检验.　　2结果　　2.1动物模型HE染色单纯造模组血管充血扩张，间质疏松水肿，间质纤维组织增生，以大量淋巴细胞为主的炎细胞浸润，还可见中性粒细胞、浆细胞，偶见吞噬细胞，部分腺管内有炎细胞，部分腺上皮呈乳头状增生（图1A）.呈慢

5、性炎症表现，非细菌性前列腺炎大鼠模型制备成功.造模后免疫抑制治疗组血管扩张，间质略有疏松，间质内偶见少量炎细胞浸润，腺上皮增生不明显，无腺上皮脱落坏死.较之单纯造模组，炎症明显减轻（图1B）.　　2.2各组动物βactin的表达βactin主要表达于4组内膜的腺上皮细胞,在腺管的间质及血管内皮细胞中亦有表达（图2）.正常大鼠前列腺背外侧叶腺管上皮βactin强烈表达，染色面积为（2.0±0.5）％.单纯造模组βactin表达明显减弱，染色面积为（1.0±0.6）%，与正常大鼠相比有显著性差异（P<0.05）.经过环孢素A免疫抑制治疗后βa

6、ctin表达明显恢复，染色面积为（1.81±0.51）%，与单纯造模组相比有显著性差异（P<0.05），与正常大鼠组无显著性差异（P>0.05）.而安慰剂治疗组βactin表达几近消失，染色面积为（0.8±0.3）%，与环孢素A治疗组相比有显著性差异（P<0.01）.　　A:模型组CAP；B：免疫抑制治疗组.　　图1大鼠前列腺HE×200（略）　　A:正常对照组；B:单纯造模组；C:环孢霉素A治疗组；D:安慰剂治疗组.　　图2βactin在前列腺组织中的表达SP×200（略）　　3讨论　　在前列腺炎的研究过程中，“血前列腺屏障”（

7、bloodprostatebarrier）的概念逐渐得到重视.它不同于血脑屏障，不是血液和前列腺之间的屏障，而是专指前列腺腺管上皮屏障，