系统溶剂法考察羊蹄根对小鼠血小板减少症的实验研究

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1、系统溶剂法考察羊蹄根对小鼠血小板减少症的实验研究马健康，姜艳霞，马洪波，王新成，陈忠航，雷钧涛【摘要】　　目的研究不同极性羊蹄根提取物对小鼠血小板减少症的治疗效果。方法采用72只BACB/C小鼠，雌雄各半，随机分为6组，皮下注射环磷酰胺（0.3m1/20g），连续注射3d；再将6个模型组随机设为阴性对照组、不同极性的羊蹄根提取物作为给药组，分别以色拉油以及溶于色拉油中不同极性羊蹄根提取物灌胃，定时采血，检测血小板数。结果与给药前相比，第12天小鼠血小板减少极显著(P0.01)；实验结束阴性对照组与各羊蹄根提取物之间差异极显著(P0.01)，其中乙醚、醋酸乙酯组升高明显

2、；不同极性羊蹄根提取物组于第12天的血小板数相比差异极显著(P0.01)。结论用环磷酰胺对BACB/C小鼠注射方法制造模型简单易行；羊蹄根各极性提取物对小鼠血小板减少症有治疗效果。【关键词】羊蹄根血小板减少症　　血小板减少症是一种常见的血液病。由于肿瘤的化疗、放疗也可导致患者血小板数明显减少，影响患者的继续治疗，输注血小板价格昂贵，且有感染多种病毒的潜在危险，所以这种疾病的研究日益受到医学界的重视。羊蹄为蓼科多年生草本植物羊蹄的干燥根，始见于《神农本草经》，其主要成分为大黄酸、大黄酚、大黄素及酸模素等。民间验方用其单味汤剂治疗咯、吐、衄血，我们在临床上以羊蹄根汤剂治疗

3、血少板减少症，疗效确切。本文以化疗药物环磷酰胺制作血小板减少症模型和羊蹄根不同极性提取物对BACB/C小鼠灌胃，观察其对小鼠血小板减少症的治疗效果。现将实验结果报告如下。　　1器材及动物饲养环境　　1.1药品与试剂羊蹄根，采自于吉林市郊区，由吉林医药学院雷钧涛副教授鉴定为蓼科酸模属RumexL.植物巴天酸模RpatientiaL.的根，分别以乙醚、氯仿、醋酸乙酯、丙酮、水作为试剂提取羊蹄根的有效成分；环磷酰胺（CTX）(上海华联制药有限公司，批号010802，200mg/瓶，白色方晶)。　　1.2仪器FA1104型精密电子天平(上海天平厂)，CA——800全自动血球分

4、析仪(日本吉泰)；BX51光学显微镜(日本OLYMPUS)，透明小鼠笼(318mm×202mm×135mm)。　　1.3动物72只健康7周龄二级BACB/C小鼠，17～21g，雌雄各半，由长春生物制品研究所实验动物中心提供，合格证号SCXK-2006-0001。　　1.4饲养环境温度（24±2）℃，湿度（50±4）%，噪声dB≤60，氨浓度(mg/m3)≤14；光照12/12；饲喂实验动物的全价颗粒饲料，饮水以及垫料经高温高压蒸气消毒；实验室、笼具经过氧乙酸消毒。　　2方法　　2.1血小板减少症模型的制作将72只BACB/C小鼠随机分为6组，每组12只，雌雄各半按0.

5、3ml/20g体重皮下注射用生理盐水配制成10mg/ml的环磷酰胺，1次/d，连续3次，实验前1天和注射后经尾部取血(20μl)，检测血小板数。　　2.2羊蹄根提取物对小鼠血小板升高影响的实验设计将6组随机设为阴性对照组、各极性羊蹄根提取物作为实验组（提取试剂分别为乙醚、氯仿、醋酸乙酯、丙酮、水）。阴性对照组连续20d以色拉油灌胃，实验组连续20d以色拉油配制的各极性羊蹄根提取物灌胃（0.5g生药/kg）。同时在给药前以及第8，12，16，20天各讲行1次尾部采血(20μl)，检测血小板数，观察20d，第20天处死动物。　　2.3统计学分析计量资料以±s表示,采用t检

6、验。　　3结果　　3.1血小板减少症模型的评价由表1可见，各组实验动物在研究过程中，血小板数目有明显变化。第12天各实验动物血小板数目降到最低，与给药前相比降低极显著(P0.01)，造模成功。　　3.2羊蹄根提取物对实验动物血小板数目变化的影响情况由表1可见，到实验结束时实验组实验动物血小板数目与第12天的相比升高极显著(P＜0.01)，而以乙醚和醋酸乙酯升高明显；与阴性对照组相比，实验组（乙醚组、醋酸乙酯组）实验动物的血小板数目升高极显著(P0.01)。　　表1不同提取物的羊蹄根提取物对血小板数的影响（略）　　4讨论　　环磷酰胺为肿瘤化疗药物有抑制免疫功能的作用，给

7、予大剂量的环磷酰胺可使淋巴结肠腺及脾脏明显缩小，B，T淋巴细胞免疫功能下降。在一般临床使用剂量(≤20mg/kg)下，即可引起体液及细胞免疫功能的全面抑制，从而对血小板产生、生成起抑制作用〔1〕。有关文献报道，小鼠连续3d皮下注射100mg/kg的环磷酰胺，停药后3d左右血小板可下降20%～30%〔2〕。本研究即应用环磷酰胺对血小板的抑制作用，以环磷酰胺150mg/kg连续3d给小鼠皮下注射，进行血小板减少症的造模，在第12天血小板数降到最低，达到20%以上。与实验前相比，血小板降低显著。同何学令等〔3〕的研究结果基本一致。　　各极性羊蹄根提取物组治