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1、生物医学鸡胚运用分析ok3bryochorioallantoicmembranemodel;neuronalculture”;中文检索词为“鸡胚绒毛尿囊膜,模型;神经细胞培养”。1.2入选标准纳入标准:①鸡胚培养方法的应用。②神经细胞培养的研究。③疾病模型。排除标准:①与此文目的无关。②较陈旧的文献。③重复同类研究。1.3质量评估基础研究和疾病模型研究原着163篇,综述40篇,述评2篇。2结果2.1纳入文献基本情况初检得到205篇文献,中文123篇,英文82篇。阅读标题和摘要进行初筛,排除因研究目的与此文无关112篇,内容重复性的研究59篇,共保存34篇中英文文献做进一步分析。
2、文献[1-2]研究了鸡胚的组织结构特点,文献[3-30]篇分析了鸡胚在肿瘤研究、病毒培养、药物作用研究领域的应用,文献[31-34]篇利用鸡胚研究了氧化应激模型及子宫内膜移位症鸡胚模型。2.2结果描述2.2.1鸡胚的组织结构特点鸡胚一般是鸡的受精卵从开始孵化到雏鸡的阶段,该阶段20~21d。鸡胚有3个胚层发育而成,在发育的不同阶段具有不同的结构特点。实验中应用第5~11天的鸡胚较多,在该阶段鸡胚具有胚体、羊膜、绒毛膜、尿囊和卵黄囊等结构,外面被覆壳膜和壳。第10天绒毛膜与尿囊合并为绒毛尿囊膜,主要由3层构成:外胚层,紧贴壳膜,由一到两层绒毛膜上皮构成;中胚层,富含大量毛细血管和
3、间质细胞;内胚层,面向尿囊腔,是一层扁平的内皮。绒毛尿囊膜紧贴多孔的壳,其中的血管网通过尿囊动脉和静脉与胚体的循环相连,是鸡胚的呼吸器官。该结构保证了足够的气体和养分交换,也使其能够有效的支持移植物的生长,从而成为多种实验的良好模型。卵黄囊是鸡胚的营养器官,含有丰富的血管网为鸡胚提供营养物质。鸡胚的免疫系统由T细胞介导的细胞免疫和B细胞介导的体液免疫构成。B细胞在相当与哺乳动物骨髓的法氏囊中分化,T细胞在胸腺分化。至孵育的第10天,鸡胚的免疫系统尚未完全建立,孵育的第11天后才能检测到T细胞和B细胞[2],至第18天免疫系统方初步建立。这一特点使鸡胚在孵育的早期不对异物产生排异
4、反应,有利于移植物的生长。2.2.2鸡胚在肿瘤研究领域的应用鸡胚在肿瘤研究中的应用主要有肿瘤血管生成,肿瘤种植与转移,肿瘤侵袭等方面。目前认为肿瘤的血管生成在肿瘤的生长与转移中起主要作用。肿瘤的生长需要新生血管来提供养分,氧气和排泄代谢废物。如果没有新生血管形成,原发肿瘤的大小一般不超过2mm×2mm×2mm。对肿瘤血管生成的研究分为促进血管生成和抑制血管生成两个方面。血管生成的反应表现为围绕移植物的辐辏放射状血管生成和血管密度增加[3];抑制血管生成的反应为血管减少,密度降低直至消失。Vacca等[4]用绒毛尿囊膜模型来研究浆细胞条件培养基诱导血管生成的能力,发现活动性骨髓瘤
5、患者的条件培养基较非活动性骨髓瘤患者的条件培养基能显着促进血管的生成。他们还进一步发现多发性骨髓瘤的促血管生成反应和某些内源性血管生成抑制因子的缺失有关[5]。Ribatti等[6]通过把不同神经母细胞瘤患者的活检肿瘤组织移植入绒毛尿囊膜,证实有癌基因MY扩增者比无MY扩增者具有更显着的促血管生成作用。Kern等[7]应用绒毛尿囊膜模型研究发现硼替佐米(bortezomib,蛋白酶体抑制剂)有很强的抗血管生成作用,但这一作用可以被GRP-78因子所拮抗。通过构建各种肿瘤的绒毛尿囊膜模型,鸡胚在肿瘤的种植与转移的研究中也有广泛的应用。绒毛尿囊膜模型最早由Knighton等[8]提
6、出,近年来国内外学者已成功的建立卵巢癌绒毛尿囊膜模型[9]、胃癌绒毛尿囊膜模型[10]、前列腺癌绒毛尿囊膜模型[11],鼻咽癌绒毛尿囊膜模型[12],骨肉瘤绒毛尿囊膜模型等[13]。肿瘤组织来源不同构建模型所需最佳条件有所区别,有文献报道黑色素瘤细胞株、前列腺癌细胞株接种细胞数在105~106就可以有较好的成瘤效果[11,14];胆管癌细胞须在4×106时才能较好的形成移植瘤[15];卵巢癌要求更高,需要107~108才形成移植瘤[10];所以在建立不同肿瘤细胞的绒毛尿囊膜模型时要首先摸索出模型建立的最佳条件。这些模型的建立对研究肿瘤的种植与转移提供了很好的在体模型。Taizi
7、等[16]利用白血病绒毛尿囊膜模型,通过DNA的定量分析,研究了白血病对各个脏器的侵袭情况。也有学者运用绒毛尿囊膜模型研究了肿瘤侵袭转移的关键环节,如癌细胞通过循环系统转移到靶器官[17];转移的癌细胞通过血管壁转移到细胞间质和靶器官[18];肿瘤细胞在靶器官内的增殖等[19]。2.2.3鸡胚在病毒培养疫苗生产中的应用鸡胚适于部分敏感病毒的生长,长期以来被大量用于流感病毒等的培养和疫苗的生产。应用鸡胚材料进行病毒培养有两种方法:一种是直接接种在鸡胚的不同部位,如尿囊腔、羊膜腔等;一种是接种在
