超显检查上呼吸道真菌的形态特征及判定标准

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1、超显检查上呼吸道真菌的形态特征及判定标准【摘要】目的：建立实验室检查上呼吸道真菌感染诊断标准。方法：应用超高倍显微诊断系统技术记录口腔咽拭子涂片中真菌孢子及菌丝的形态。结果：口腔咽拭子涂片镜检见簇状排列的孢子、生芽孢子及菌丝，即为阳性，可判定口腔真菌感染。结论：应用超高倍显微诊断技术检查咽拭子中真菌孢子与菌丝形态，可以早期发现和适时诊断念珠菌、曲霉菌、青霉菌、毛霉菌、毛孢子菌等常见真菌呼吸系统吸入性感染。【关键词】超高倍真菌感染口腔咽拭子应用口腔咽拭子涂片找真菌孢子与菌丝，作为常规方法监测呼吸系统真菌感染已广泛应用，在医疗实践中实验室与临床

2、逐步达成共识，近年来超高倍显微系统的应用，使常规的检验更快速、准确、简便、可靠。应用ACT-2002超高倍显微诊断系统记录标本中真菌孢子及菌丝的形态。建立实验室呼吸道真菌感染的判定标准，可为临床真菌感染的治疗提供可靠的依据。　　1材料与方法　　1.1一般资料　　标本来源：2003年5月至2006年12月来自我院门诊及住院临床上呼吸道感染疑似真菌感染病例。临床伴有发热、咳嗽等症状。　　1.2仪器　　ACT-2002超高倍显微诊断系统，由显微镜、放大器、监视器、计算机系统、控制器及彩色打印机组成。最高放大倍率20000倍，具有相差视野、明视野、

3、暗视野。　　1.3检查方法　　用消毒的棉拭子沿咽腔两侧试取咽部分泌物，放入盛有0.3ml～0.5ml无菌生理盐水的无菌试管内洗脱，取适量于载波片上，加盖波片，在相差视野下放大倍数在6000～8000倍进行活体观察100个以上视野，1/10视野中见簇状排列的孢子、生芽孢子及菌丝，视为找到大量真菌孢子、生芽孢子及菌丝。　　2真菌的形态特征　　2.1白念珠菌感染(白念)　　可见真菌孢子、生芽孢子及假菌丝粘附在鳞状上皮细胞上,菌丝一般不分隔、分支处生长孢子。　　2.2阿萨希毛孢子菌感染　　可见方形孢子形成短链状假菌丝粘附在鳞状上皮细胞上。　　2.3

4、白念+青霉菌感染　　可见圆形真菌孢子密集地排列在鳞状上皮细胞上和分隔的菌丝粘附在鳞状上皮细胞上，1/10以上的视野有簇状排列的孢子、生芽孢子及菌丝视为找到大量真菌孢子、生芽孢子及菌丝。两种菌丝在不同的视野中可以分别找到。　　2.4光滑念珠菌感染　　可见圆形真菌孢子、生芽孢子密集地排列、未见菌丝　　2.5烟曲霉菌感染　　可见真菌孢子、鹿角状分枝的菌丝，一级分枝到三级以上分枝，菌丝分隔。　　2.6青霉菌感染　　可见真菌孢子，锐角分枝的菌丝、菌丝分隔、菌丝粗细均匀。　　2.7根毛霉菌感染　　可见粗大的菌丝、菌丝透明、粗细不等、不分隔，直角分枝。　

5、　2.8念珠菌属两种以上菌株复合感染　　孢子、生芽孢子成堆排列、大小不等，圆形、椭圆形、瓜子形同时存在。　　2.9白念+烟曲霉菌复合感染　　两种菌丝在不同的视野中可以分别找到。孢子相似不易区分。　　3实验室检查判定标准分为4级报告：未见真菌孢子及菌丝；可见真菌孢子、生芽孢子未见菌丝；可见大量的真菌孢子、生芽孢子未见菌丝；可见大量的真菌孢子、生芽孢子及菌丝。　　4讨论呼吸道真菌感染可发生于咽、会厌、气管、支气管及肺组织，咽拭子涂片应用超高倍显微系统检验的结果可为上呼吸道真菌感染，提供可靠的依据。阳性结果可储存；放大，回放，便于治疗前后对比；并

6、可网上传输，进行远程会诊避免误诊。近年来由于环境污染真菌可随时侵入口腔。当机体的免疫功能低下，广泛的抗生素特别是多种抗生素联用、激素或免疫抑制剂的长时间应用、呼吸机支持治疗、免疫抑制剂等药物的应用增加了真菌感染的机会。找到粘附在口腔上皮细胞上侵袭性生长的真菌菌丝、簇状排列的生芽孢子，意味着上皮细胞生长的真菌感染发生，机体自身免疫功能紊乱。建立实验室真菌感染诊断标准，可以早期发现和适时诊断常见真菌呼吸系统吸入性感染，并观察抗真菌治疗过程中治疗的效果。【参考