海南省文昌中学生物组林春娘

《海南省文昌中学生物组林春娘》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、专题2细胞工程动物细胞融合与单克隆抗体海南省文昌中学生物组林春娘教学目标了解动物细胞融合的原理、过程和意义。理解单克隆抗体制备的过程和应用重点难点1.教学重点：单克隆抗体的制备和应用2.教学难点：单克隆抗体的制备过程问题探讨“番茄—马铃薯”（理想图）通过长期的实验，科学家们采用体细胞杂交技术获得了“番茄—马铃薯”植株。(1)(1)(2)(3)(4)(5)植物体细胞杂交过程示意图如果将奶牛的细胞与植物细胞杂交，得到绿色的小奶牛，那岂不是只要晒晒太阳就可以挤出牛奶吗？动物细胞也能融合吗？A细胞B细胞人工诱导1.1动物细胞融合的概念杂交细胞动物细胞融合（也称细胞杂交）：是指两个或

2、多个细胞融合形成一个单核细胞的过程。一、动物细胞融合细胞膜的流动性灭活病毒、PEG、电激等融合后的细胞进行有丝分裂，形成完整的杂交细胞诱导的手段？融合后细胞的类型？AB杂种细胞遗传物质有什么点？三种AA、AB、BB（A、B）含两种生物的遗传物质1.2动物细胞融合过程原理？为什么灭活的病毒能作诱剂？灭活丧失感染性保留融合活性1.3动物细胞融合技术的意义和应用突破有性杂交方法的局限，使远缘杂交成为可能最主要用途：制造单克隆抗体比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、振动、聚乙二醇克服远

3、源杂交不亲和，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合除应用植物细胞杂交手段外，还有灭活病毒获得杂种细胞、制备单克隆抗体1.4比较动、植物细胞杂交技术强调：效应B淋巴细胞是能够产生抗体的B淋巴细胞，下文将其简称为B淋巴细胞抗体：能够与抗原发生特异性结合的免疫球蛋白。能产生抗体的细胞是浆细胞（即效应B细胞）。温故知新二、单克隆抗体B淋巴细胞效应B淋巴细胞记忆B淋巴细胞分化抗体的传统生产方法抗原反复注射动物从动物的血清中分离抗体该法制备抗体的缺点：产量低、纯度低，且抗体的特异性差、灵敏度低。如何解决这个问题呢？单克隆抗体！读下面一段资料，找出单克

4、隆抗体的概念人们发现，在动物发生免疫反应的过程中，体内的B细胞可以产生多达百万种以上的特异性抗体，但是每个B细胞只分泌一种化学性质单一、特异性强的抗体。要想获得大量的单一抗体，必须用单个B细胞进行无性繁殖，即克隆。2.1单克隆抗体的概念单克隆抗体：单个B细胞克隆产生的化学性质单一、特异性强的抗体一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体骨髓瘤细胞能无限增殖杂交瘤细胞动物细胞培养技术动物细胞融合技术单克隆抗体既能产生特异性抗体，又能大量增殖的细胞1975年英国科学家米尔斯坦和柯勒的实验2.2单克隆抗体的制备⑤如何大规模进行培养得到大量的单克隆抗体？①为什么给小鼠注射特定的抗原蛋白？获

5、得产生相应抗体的B细胞②会有几种融合方式？BB、B瘤、瘤瘤（B、瘤）√③杂交瘤细胞是如何筛选出来的？有何特点？选择性培养基：只有杂交瘤细胞才能存活杂交瘤细胞特点：既能产生特异性抗体，又能大量增殖。④是否所有的杂交瘤细胞都能产生专一性抗体？选能产生所需专一抗体的杂交瘤细胞体外培养小鼠腹腔内培养2.3单克隆抗体的应用诊断试剂——最广泛应用准确、高效、简易、快速单克隆抗体最主要的优点：特异性强，灵敏度高，并能大量制备。治疗疾病和运载药物主要用于治疗癌症治疗，单克隆抗体作为载体，运载抗癌药物，形成“生物导弹”，准确杀伤癌变细胞。“生物导弹”＝单克隆抗体＋药物单抗导向，药物为弹头两个

6、过程动物细胞培养过程单克隆抗体制备过程三个“一”一个诱导细胞融合的新方法－－灭活病毒一个新细胞－－杂交瘤细胞一个优势－－单克隆抗体特异性强、灵敏度高的优势本节小结重点谢谢(1)若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自小鼠体内的细胞，从小鼠体内提取分离该细胞之前，应给小鼠注射_____________类物质。（2）d过程是一个_____________过程，该过程的进行常用_____________或_____________的诱导。(3)假设仅考虑某两个细胞的融合，则可形成种类型的C细胞，因此需用__________培养基筛选出D细胞用于培养，D细胞的名称是，其特点是___

7、______________________________________。效应B抗原细胞融合聚乙二醇灭活的病毒选择性3既能无限增殖又能产生特异性抗体杂交瘤细胞(4)在培养时通过________分裂方式大量繁殖。D细胞体外培养需要注意的条件是（要求答5项）__________________________________。（5）单克隆抗体在疾病的诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，其特点是_________________。特异性强、灵敏度高有丝无菌、无毒的环境；充足的营养；适宜的温度和pH；适宜的气体环境1