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时间:2018-11-27
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1、非淋菌性尿道炎患者中Uu和CT感染情况分析摘要:目的调查分析在非淋菌性尿道炎(NGU)患者中解脲脲原体(UU)和沙眼衣原体(CT)感染比例,给临床诊治提供参考。方法收集临床病例标本,采用实时定量PCR,同时进行UU和CT检测,对检测结果进行分析。结果检测的887例NGU患者中,UU阳性者男131例,女575例;CT阳性者男12例,女11例;UU和CT混合阳性者男18例,女140例。经统计学检验和scheffe可信区间法分析得知,UU的感染比率要明显大于CT和UU与CT混合感染的比率。结论在检出UU和CT的非淋菌性尿道炎患者中,79.6%感染UU,2.6%感染CT;17.8%的为两者混合感染。U
2、U为主要感染因素。 关键词:解脲脲原体;沙眼衣原体;非淋菌性尿道炎 解脲脲原体(Ureaplasmaurealyticum,UU)和沙眼衣原体(Chlamydiatrachomatis,CT)是可寄居于人体并能引起疾病的病原体。它们都可致人体非淋菌性尿道炎〔1〕。采用实时定量PCR(Real-timequantityPCR)方法同时检测临床收集的887份NGU患者标本的UU和CT,分析NGU患者感染UU和CT的比例提供临床诊治。 1材料和方法 1.1标本来源2005年来海南省医院就诊的887例NGU患者。其中,男性161例,女性726例。送检的标本包括宫颈分泌物、白带、精液、前列腺液。
3、 1.2主要仪器和试剂7300real-timePCRsystem及其配套分析软件为美国Appliedbiosystems公司产品;模板提取液Ⅰ、Ⅱ,UU和CT的PCR反应液,UNG,Taq酶购自深圳匹基公司。 1.3方法 1.3.1模板的提取将沾有标本的棉拭子与1ml生理盐水混匀,取100μl混匀的生理盐水加到100μl模板提取液Ⅰ中,振荡混匀,13000rpm离心10min。弃上清,沉淀中加入50μl模板提取液Ⅱ,瞬时振荡,100℃干浴10min后13000rpm离心10min,上清备用。 1.3.2定量PCR①反应体系组成:根据UU和CT操作说明,分别加入不同比例的PCR反应液,
4、UNG和Taq酶,至38μl。加入2μl模板上清液,总反应体积40μl。②扩增反应:将反应管放入PCR扩增仪,37℃5min,94℃1min,95℃5s,60℃30s,进行40个循环。③溶解曲线分析:应用配套的分析软件,分别确定UU和CT反应的baseline和threshold,尽量降低本底反应的干扰。 1.3.3统计分析将得到的结果应用卡方χ2检验和scheffe可信区间法分析。 2结果 2.1887例标本的检测结果见表1。 2.2应用卡方χ2检验和scheffe可信区间法分析检测结果根据以上表1结果求得χ2值为18.98(ν=2,P0.005)。可确认NGU患者感染UU,CT和U
5、U与CT混合感染的比率是存在显著差异的。再用scheffe可信区间法进行两两比较,结果见表2。 由表中结果可知,NGU患者感染UU和感染CT及UU与CT混合感染的比率两两都有所不同。感染UU的比率要明显大于感染CT及UU与CT混合感染的比率。以上结果表明,UU为非淋菌性尿道炎的主要感染微生物。 表1887例NGU患者UU、CT阳性结果分布(略) 表23种感染类型占比率的两两比较(略) 3讨论 NGU是一种常见的性传播疾病,是以衣原体和支原体为主要致病微生物引起的泌尿生殖系统感染,其主要病原体是UU和CT,少数可由一些其他病原体感染引起。 临床上对UU的检测方法有免疫荧光抗体法、培养
6、法、直接染色检测法等,这些方法间或需要特殊设备,时间较长,操作复杂,敏感度低特异性不高等缺陷〔1〕。采用PCR法检测,其具有快速、特异、敏感等优点,可为临床提供较可靠的诊断依据〔3~5〕。 实验室检查CT的主要方法有:①细胞培养法检测CT包涵体,该法费时费事,成本高,且需要特殊的设备及技术,难于普及。②荧光抗体法或酶标抗体法,由于特异性差且阳性率低不能满足临床要求。③核酸探针法,特异性较高但敏感性太低。PCR法能在数小时内获得结果,具有灵敏度高,快速、特异性强等优点,检测标本种类多,为CT感染的临床诊断提供了准确可靠的方法〔1,2,6〕。 通过分析在NGU患者中UU和CT感染比例,比较这两
7、种病原体感染存在的差别。结果在887例患者的标本中,检出UU和CT两种病原体,UU感染者明显多于混合感染型和CT感染者。目前,国内关于这方面的报道结果不一,早期的报道指出,CT感染率大于UU感染率〔6,7〕;近年来,UU感染率逐步上升,逐渐成为NGU的主要病原体〔8~10〕。本次结果与之吻合,给临床诊治NGU提供有益的启示。
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