沙参体外抑菌活性的初步研究

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1、沙参体外抑菌活性的初步研究胡定慧，丁建刚，阮期平【关键词】沙参；,,抑菌活性；,,最低抑菌浓度　　摘要：目的对沙参提取物的体外抑菌活性进行初步研究。方法用水50%乙醇浸提有机溶剂萃取，以纸片法进行活性测定。结果提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌有抑制作用，最低抑菌浓度为5mg/ml，50%乙醇提取效果优于水，醋酸乙酯萃取液抑菌效果最明显。结论沙参提取物是一种有效的抑菌药物。　　关键词：沙参；抑菌活性；最低抑菌浓度　　StudiesonAntibacterialPropertiesIsolatedfromRadixAdenophorae　　Abstract：ObjectiveTostudythea

2、ntibacterialpropertiesofrootextractsfromRadixAdenophorae.MethodsThedifferentextractingsolventethod.ResultsTheantibacterialfunctionoftheextractby50%alcoholhadevidenteffectonStaphylococcusaureusandPseudomonasaeruginosainimuminhibitionconcentration(MIC)5mg/ml.ThemainantibacterialconstituentRadixAdenoph

3、oraeonasaeruginosa由绵阳师范学院分子生物与微生物制药重点实验室提供。　　1.1.3培养基采用牛肉膏蛋白胨培养基。　　1.1.4化学试剂乙醇、正丁醇、醋酸乙酯、石油醚、丙酮均为国产分析纯。　　1.2方法　　1.2.1沙参粗提液的制备准确称取沙参5g，分别以蒸馏水、50%乙醇浸泡过夜，离心弃沉淀，得粗提液，减压浓缩至25ml，该溶液分别用正丁醇、醋酸乙酯、石油醚、乙醚萃取，充分振荡，静置，直到两相液面完全分开。用分液漏斗将有机溶剂相与水相分开，收集有机溶剂分别进行抑菌活性研究。　　1.2.2抑菌活性测定纸片法参考张文治等〔3～5〕法，用移液枪移取20μl指示菌（金黄色葡萄球菌、绿

4、脓杆菌、大肠杆菌）悬液，接种在固体培养基上，涂布棒将菌液均匀涂布于平皿上。将直径为5mm的灭菌滤纸圆片浸泡于中药提取液中，取出隔一定距离平铺于含菌培养皿中，在适宜的温度下（大肠杆菌37℃，金黄色葡萄球菌28℃，绿脓杆菌28℃）培养一定时间，观察结果，用游标卡尺测得抑菌圈直径，取其平均值，计算出抑菌率和最低抑菌浓度（MIC）。最低抑菌浓度是滤纸片周围刚出现抑菌圈的浓度〔5〕。以无待测样的试液作为空白，每个样品做两个平行，实验重复3次。抑菌率用下述公式计算〔6，7〕，　　抑菌率（%）＝实验组平均抑菌圈直径-空白滤纸片直径空白滤纸片直径×100%　　2结果　　2.1提取液对抑菌效果的影响分别用水和5

5、0%乙醇浸提沙参，选用金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌为指示菌株，实验结果表明两种溶液提取物对金黄色葡萄球菌抑制作用最强，对绿脓杆菌抑制作用次之，对大肠杆菌作用不明显，其中50%乙醇作为溶剂提取效果明显优于水，以金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌对两种溶液的提取效果作图。结果见图1～2。　　图1水、50%乙醇提取物对金葡球菌抑制作用比较（略）　　图2水、50%乙醇提取物对绿脓杆菌抑制作用比较（略）　　2.2抑菌率沙参乙醇提取物对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌具有明显的抑菌效果，其抑制作用随着药物浓度的增大逐渐增强，抑制率和浓度具有剂量依赖关系。当生药量为200mg/ml时，对金葡球菌和绿脓杆菌的抑制率分别为

6、138%，125%；当生药量为50mg/ml时,对两种菌的抑制率分别为46.5%，21%。最低抑菌浓度均为5mg/ml。结果见图3。　　图3沙参提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌的抑制率（略）　　2.3萃取液抑菌实验结果沙参乙醇提取液经正丁醇、醋酸乙酯、石油醚、乙醚有机溶剂萃取后进行抑菌活性进行检测，结果表明醋酸乙酯萃取液抑菌效果最强，对金黄色葡萄球、绿脓杆菌均有较强的抑制作用，对大肠杆菌抑制作用较弱。石油醚、乙醚萃取液对3种指示菌不具有抑菌活性。结果见表1。　　表1四种萃取液对指示菌的抑制作用（略）　　＋＋＋代表抑菌圈直径＞10mm；＋代表抑菌圈直径＜8mm；－代表无抑菌作用　　3讨论　　本实

7、验初步研究了沙参提取物对几种常见致病微生物的生长抑制作用。在提取沙参抑菌物质的过程中，考虑到活性物质的稳定性，整个提取浓缩的过程始终控制在较低的温度下进行。提取实验结果提示沙参提取物的抑菌活性成分主要是中等极性类物质，如皂苷等化合物。抑菌结果表明沙参提取物对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌有显著的抑制作用，且抑菌浓度低，最低抑菌浓度为5mg/ml，抑菌效果与药物浓度呈正相关。绿脓杆菌属于假单胞菌属，为革兰