考研生物化学

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1、Part1.蛋白质的结构与性质【目的与要求】重点掌握★氨基酸的结构特点、光学性质、等电点、两性性质★一级结构、肽键、肽平面结构、N—末端、C—末端、★二级结构,包括α—螺旋体、β—折叠片★三级结构、次级键★四级结构;★结构与功能的关系;★蛋白质的等电点、两性性质、沉淀、变性熟悉★氨基酸的其它理化性质、蛋白质的平均含氮量、蛋白系数、蛋白质的分类。一般了解★超二级结构、结构域、活性肽;★肌红蛋白、血红蛋白具体结构及其功能的关系★蛋白质分离纯化与鉴定的一般方法★蛋白质一级结构测定的一般步骤。§1.1蛋白质通论一.蛋白质的生物学意义(一)蛋白

2、质是生命活动的物质基础(二)蛋白质的生物学功能二、蛋白质的分类1.根据分子形状分2.根据功能分3.根据组成分:简单蛋白质结合蛋白质三.蛋白质的水解1.酸水解2.碱水解3.蛋白酶水解§1.2蛋白质的分子组成—氨基酸一.蛋白质的元素组成元素组成CHONS其它蛋白质中N含量恒定,为16%左右,可用定氮法测量蛋白质含量-凯氏定氮法每克样品含氮量×6.25×100=100克样品蛋白质含量(克%)(6.25称为蛋白系数)。有些蛋白质含有其他微量元素:P、Fe、Cu、Mn、Zn、Co、Mo、I等。二、蛋白质分子的基本组成单位——氨基酸(一)氨基酸的

3、结构通式:特点:1、19种氨基酸均为L-α-氨基酸。(Pro无)2、除甘氨酸外的氨基酸均有手性α碳原子,具有旋光性。3、脯氨酸为α-亚氨基酸(二)氨基酸的构型:构成蛋白质的氨基酸除甘氨酸外,均含有α-手性碳原子,为L-构型(三)氨基酸的结构与分类1、按羧基与氨基的数目分(酸碱性):2、按侧基R基的结构特点分:3、按侧基R基极性分:(1)非极性氨基酸:(2)极性不带电氨基酸:(3)极性带电氨基酸:4、按氨基酸是否能在人体内合成分:(1)必需氨基酸:指人体内不能合成的氨基酸,必须从食物中摄取,有八种:假设携来一两本书。(2)非必需氨基酸:

4、指人体内可以合成的氨基酸。有十种。(3)半必需氨基酸:指人体内可以合成但合成量不能满足人体需要(特别是婴幼儿时期)的氨基酸,有两种:组氨酸、精氨酸。5、根据生物体内氨基酸分布可分为:★构成蛋白质常见氨基酸(20)★构成蛋白稀有氨基酸(羟脯氨酸、羟赖氨酸)★非蛋白氨基酸(D-Ala)二十种氨基酸的名称和结构如图所示:Ala,A,丙氨酸Val,V,缬氨酸Pro,P,脯氨酸Leu,L,亮氨酸Met,M,甲硫氨酸Ile,I,异亮氨酸Phe,F,苯丙氨酸Tyr,Y,酪氨酸Trp,W,色氨酸Ser,S,丝氨酸Thr,T,苏氨酸Cys,C,半胱氨酸

5、Gly,G,甘氨酸Asn,N,天冬酰氨Gln,Q,谷氨酰氨Lys,K,赖氨酸Arg,R,精氨酸His,H,组氨酸Asp,D,天冬氨酸Glu,E,谷氨酸注:二十种氨基酸的结构特点Ø含硫的氨基酸:Ø含苯环的氨基酸:Ø亚氨基酸(不是L型):Ø含无手性碳的氨基酸:Ø酸性氨基酸:Ø碱性氨基酸;(四)蛋白质中不常见的氨基酸羟-脯氨酸、羟-赖氨酸、r-羧基谷氨酸、6-氮-甲基赖氨酸(五)非蛋白氨基酸:鸟氨酸、胍氨酸等思考1、蛋白氨基酸有20种。2、生物体中有20种氨基酸。3、某一食品富含人体所必需的17种氨基酸,营养价值很高,试分析正误(如野酸枣-

6、金丝枣)。4、构成蛋白常见的20种氨基酸均为L型。三.氨基酸的理化性质(一)物理性质1.旋光性:除甘氨酸外的氨基酸均有旋光性。2.紫外光吸收:氨基酸在可见光范围内无光吸收,在近紫外区含苯环氨基酸有光的吸收。(二)化学性质1.氨基酸的两性电离及等电点:氨基酸具有酸碱两性性质。通常以兼性离子的形式存在,在酸性环境中,主要为阳离子在碱性环境中,主要为阴离子。在某一pH环境下,为两性离子(兼性离子)。氨基酸的pI:氨基酸所带正负电荷相等时的溶液pH。图解:Ø曲线中从左向右第一个拐点是氨基酸羧基解离50%的状态,Ø第二个拐点是氨基酸的等电点,Ø

7、第三个拐点是氨基酸氨基解离50%的状态。通过氨基酸的滴定曲线,可用下列Henderson-Hasselbalch方程求出各解离基团的解离常数(K’):[质子受体][H+]Ka1=——————————[质子供体]根据pK’可求出氨基酸的等电点,可由其等电点左右两个pK,值的算术平均值求出。氨基酸等电点的计算中性氨基酸:pI=(pK’1+pK’2)/2K’1为α-羧基的解离常数,K’2为α-氨基的解离常数。等电点的特点:v1.在电场中氨基酸不泳动v2.氨基酸为两性离子;v3.溶解度最小;v当pH大于pI时,Aa带负电v当pH小于pI时,A

8、a带正电解离质子的顺序为:α-COOH>R-COOH>R-NH3+>α-NH3+接受质子的顺序:α-NH2>R-NH2>R-COO->α-COO-2.由α-氨基参加的反应:(1)与2,4-二硝基氟苯(2,4-DNFB)的

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