survivin在大肠癌组织中的表达及其生物学意义

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1、Survivin在大肠癌组织中的表达及其生物学意义作者：任佳　曾俊　王西岩　潘克俭【摘要】　　目的　研究Survivin在结肠癌、直肠癌中的表达，以及与癌组织分化程度的相关性。方法　收集资料齐全的大肠癌、直肠癌标本，并按组织学标准分级。免疫组织化学检测各标本Survivin蛋白的表达。结果　绝大多数的大肠癌、直肠癌标本组织有Survivin表达，Ⅰ级组织的表达阳性细胞平均比率低于Ⅱ级。提示其表达与癌症组织分化程度相关。结论　检测Survivin基因的表达,将有助于检测肿瘤的恶性程度，同时,为判断结肠癌和直肠癌的生

2、物学特性提供了重要依据。【关键词】Survivin;大肠癌;组织学分级Abstract：ObjectiveToexplorethesurvivinexpressioninlargeintestinetumourtissues,andexplorethecorrelationbetourtissues.MathodsIdentifiedthehistologicalgradesoflargeintestinetumourtissues,anddetectedthesurvivinexpressionbyimmuno

3、histochemicalmethod.ResultsTheexpressionofsurvivinostsamples.TherateofexpressionofsurvivingingradeⅡalignantgradeoflargeintestinetumorissuesandrefersasignificantevidancetojudgeitsbiologicalcharaters.Keyour；Histilogicalgrade生存素(Survivin)为凋亡蛋白抑制因子(inhibitorofapo

4、ptosisprotEin,IAP)家族的成员［1］。研究表明，Survivin能抑制细胞的凋亡；同时能抑制细胞的增殖。现已发现Survivin在多种肿瘤中表达，而在正常组织不表达或低表达［2］。本研究以大肠癌为研究对象，研究Survivin在不同组织学级别的大肠癌和直肠癌组织中的表达，探讨Survivin表达水平和肿瘤恶化进程的关系。1　材料与方法1.1　样本选取成都军区总医院病理科资料齐全的大肠癌和直肠癌标本，按肿瘤组织学分级标准，所收集的标本被分为Ⅰ、Ⅱ级。其中大肠癌Ⅰ级12例，Ⅱ级14例；直肠癌Ⅰ级15例

5、，Ⅱ级14例。组织学分级由成都军区总医院病理科完成。1.2　试剂兔抗人Survivin多克隆抗体为Santacruz公司产品；二抗、三抗、DAB显色剂、封闭羊血清均为北京中山生物技术公司产品。1.3　实验方法1.3.1　免疫组织化学染色　切片脱蜡至PBS；3%H2O2室温10min，去除内源性过氧化物酶，PBS洗2次，每次3min；正常羊血清37℃,30min封闭；弃去血清，分别加一抗(兔抗人Survivin1∶600)，4℃过夜，PBS洗2次，每次3min；滴加二抗(Survivin羊抗兔1∶200)，37℃，

6、30min，PBS洗2次，每次3min；滴加三抗（1∶200），37℃，30min，PBS洗3次，每次3min；DAB显色；苏木精复染；梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。用PBS代替一抗作阴性对照。所有标本的免疫组织化学染色均按双盲法进行，同一批完成。1.3.2　结果分析　细胞质内有棕色着色者为Survivin表达阳性，每例切片观察8个高倍视野,以计数1000个细胞中的阳性细胞百分比为标准,具体评分如下:表达阳性细胞0～9%为阴性(-)；10%～24%为弱阳性表达(+)；25%～49%为中度表达(++)；≥

7、50%为强阳性表达(+++)。1.4　统计学处理各项参数经量化处理后输入计算机,应用SPSS10.0统计分析软件,对结果行相关分析,结果均以P＜0.05为有统计学意义。2　结果2.1　大肠癌组织细胞表达绝大多数的大肠癌标本组织有Survivin表达阳性细胞，Survivin蛋白阳性染色主要定位于肿瘤细胞胞质和胞膜中，为粗细不一的棕黄色颗粒，阳性细胞呈局灶性或弥漫性分布。结肠癌组织的表达阳性细胞平均比率Ⅰ级明显低于Ⅱ级，说明Survivin蛋白表达与大肠癌分化程度相关，即分化程度愈低，Survivin表达越强（表1

8、）（见封四图1）。2.2　直肠癌组织细胞表达直肠癌标本组织均有Survivin表达阳性细胞，直肠癌组织的表达阳性细胞平均比率Ⅰ级明显低于Ⅱ级，说明Survivin蛋白表达与直肠癌分化程度相关（表2）（见封四图2）。3　讨论Survivin为凋亡蛋白抑制因子(inhibitorofapoptosisprotEin,IAP)家族的成员,Survivin基因过度表达抑制了细胞凋