免疫标准操作程序sop

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1、word资料下载可编辑标准操作程序项目甲型肝炎病毒IgM检测的标准操作程序方法ELISA方法编写人冯岚日期2005/01/01审核人曹进平日期2005/01/01批准人陈健康日期2005/01/01文件分发部门和/或个人免疫室，医务科本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次文件编号CHDEYY-JYK-MY-001文件版本号第1版医务科保管者院长办公室保管者院档案室保管者检验科主任实验室名称项目编号制定日期专业技术资料word资料下载可编辑芜湖市第二人民医院检验科免疫室甲型肝炎病毒IgM检测的标准操作程序WHDRYY-JYK-MY-00

2、1共2页第1页2005-01-01[目的]保证检测结果准确可靠。[该SOP变动程序]本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经专业主管、科主任批准签字。[标本的采取和保存]采静脉血2ml，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。[测定原理]采用兔抗-人IgMu链包被反应被，加入待测标本，同时加入HAVAg，抗HAV-HRP，如待测标本中含有抗-HAV-IgM时，就能与包被兔抗-人IgMu链结合，并且与HAVAg,抗-HAV-HRP结合成复合物，加TMB底物产生显

3、色反应，反之则无显色反应。[操作步骤]1.将待测标本用生理盐水作（1：1000）稀释，每孔加入稀释标本100ul，设阴、阳性对照各2空，每孔加入阴性对照（或阳性对照）100ul（或2滴），并设空白对照一孔，封板，置37度孵育20分钟。2.洗板机洗板：选择洗涤5次程序洗板后拍干。手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注满各空，静置5秒，甩干，重复三次后拍干。3.每孔加入HAVAg30ul（或一滴），酶结合物50ul（或一滴），（空白对照孔不加），充分混匀，封板，置37度孵育20分钟。4.洗板机洗板：选择洗涤5次程序洗板后拍干。手工洗板：弃去孔内液体，洗涤液注

4、满各空，静置5秒，甩干，重复三次后拍干。5.每孔加显色剂A液、B液各50ul（或一滴），充分混匀，封板，置37度孵育10分钟。6.每孔加入终止液50ul（或一滴），混匀。7.用酶标仪读数，取波长450nm（建议使用双波长的酶标仪比色，参考波长630nm），先用空白孔校零，然后读取各孔OD值。[结果判断]样品OD值除以阴性对照平均OD值大于或等于2.1判断为阳性，否则为阴性阴性对照OD值低于0.05作0.05计算，高于0.05按实际OD值计算[临床意义]血清中HAV—IgM在亚临床期即已出现，其滴度在感染后3个月维持在1000以上，早被公认为早期诊断

5、甲型肝炎的依据。[注意事项]1．试剂使用前应摇匀，并弃去1~2滴后垂直滴加，注意均匀用力。2．从冷藏环境中取出的试剂盒应置室温平衡30分钟再进行测试，余者应及时封存，置冰箱内储藏备用。3．洗板时所用的洗水纸请勿反复。4．不同批号试剂请勿通用。5．结果判断须在10分钟内完成。实验室名称项目编号制定日期芜湖市第二人民医院检验科免疫室甲型肝炎病毒IgM检测的标准操作程序WHDEYY-JYK-MY-001共2页第2页2005-01-01专业技术资料word资料下载可编辑1．封片不能重复使用。2．用本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。专

6、业技术资料word资料下载可编辑标准操作程序项目乙肝表面抗原检测的标准操作程序方法ELISA方法编写人冯岚日期2005/01/01审核人曹进平日期2005/01/01批准人陈健康日期2005/01/01文件分发部门和/或个人免疫室，医务科本规程自2005年01月01日起实施，每2年复审一次文件编号WHDEYY-JYK-MY-002文件版本号第1版医务科保管者院长办公室保管者院档案室保管者检验科主任实验室名称项目编号制定日期芜湖市第二人民医院检验科免疫室乙肝表面抗原检测的标准操作程序WHDEYY-JYK-MY-002共2页第1页2005-01-01[

7、目的]保证检测结果准确可靠。[该SOP变动程序]本标准操作程序的变动，可由任一使用本SOP专业技术资料word资料下载可编辑的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：专业主管、科主任。[标本的采取和保存]随机静脉血2ml，分离血清备用。也可以使用血浆标本进行检测。标本宜新鲜，无污染，避免溶血，避免反复冻融，不可用NaN3防腐。[测定原理]双抗体夹心法测HBsAg：抗S包被反应板，加入待测血清后，再加入酶标抗S，加底物显色为阳性，证明样本中含被测物，含量与显色程度成正比。[操作步骤]1．实验准备：从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同时将浓缩

8、洗涤液作1：20稀释。2．加待测标本：加入待测标本每孔0.05毫升，并设阳性对照2孔，阴性对照2孔，空白对照1孔。3．加酶