见血封喉树叶急性毒性研究

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1、见血封喉树叶急性毒性研究康胜利任守忠欧阳林旗邱名寅刘明生【摘要】　　目的观察箭血封喉树叶的急性毒性。方法采用水和80％乙醇两种提取方式提取原材料，通过灌胃和腹腔注射两种给药方式，观察小鼠急性死亡率；并测定醇提取物经大孔吸附树脂处理后的乙醇洗脱物腹腔给药的LD50。结果灌胃给药时，水、醇提取物均未引起小鼠死亡（80g生药量/kg）。但腹腔给药后显示明显毒性，小鼠在1~3h内发生死亡；树脂醇洗脱物的LD50为（15.13±1.60）g·kg-1。结论见血封喉树叶经口服给药时小鼠不发生急性中毒反应。【关键词】见血封喉箭毒木急性毒性树叶加布树　　Abstract：Objective

2、ToobservetheacutetoxicityoftheleavesofAntiaristoxicariaLesch．MethodsThematerialsofH2Oand80%EtOHandtheacutetoxicityofdifferentpartitionsofthetined,asinistrationsofigoripinthemouse.TheLD50oftheethanoleluatefrommacroreticularresincolumnsined.ResultsTheresultsshoinistrationaterial);thetoxicity

3、eansofipadministrationandthemedianlethaldoseD-101resincolumnandthedeathoccurredinistration,theleavesofAntiaristoxicariashoice.　　Keyalayoside)等〔2〕。2005年，在海南省森林资源调查中发现琼北散布着大量的见血封喉古树，且多散布在村民生活的乡镇村落，常作纳凉之用，当地人称见血封喉树为“加布”。见血封喉树不但割破树皮时会流出白色乳汁，折断嫩枝，叶柄也会流出白色乳汁，故这些部分也可能存在一定毒性。然而当地村民对其可能的毒性了解不多，甚至对见

4、血封喉树的毒性也未有所闻，因此急需对其化学成分和其潜在毒性进行研究，以保障人畜安全。迄今，有关见血封喉树叶化学成分及毒性研究尚未见报道，本研究将针对树叶的毒性进行探讨。　　本研究中采用两种溶剂（水和80%乙醇）体系提取见血封喉树叶，分别经灌胃和腹腔注射两种给药方式进行毒性初步探讨。现将结果报道如下。　　1材料　　1.1药材及试剂见血封喉树叶由中国医学科学院药用植物研究所海南分所提供，阴干备用；95%医用乙醇（重蒸馏）、石油醚（AR，天津市化学试剂一厂）。　　1.2动物昆明种小鼠，体重18～22g，雌雄兼用，由海南省人民医院动物中心提供(海南省医动字第30-001号)。按照每

5、只小鼠灌胃0.4ml/10g、腹腔注射0.2ml/10g给药，用去离子水将见血封喉各实验样品配成所需浓度。腹腔注射样品在给药前经微孔滤膜（孔径0.45μm）过滤，贮于小瓶内备用。给药剂量按生药材量计。　　2方法与结果　　2.1见血封喉树叶的提取　　2.1.1见血封喉树叶水提取物取阴干见血封喉树叶400g，6000ml水煎煮提取1.5h，过滤，残渣继续水煎煮提取两次，加水约4000ml/次，每次提取1h，趁热过滤，合并3次滤液，减压浓缩，浓缩液放置于蒸发皿中，冻干成粉状，得冻干粉（77g，l，回流提取1.5h，趁热过滤，收集滤液。残渣再分别用80%乙醇溶液2000ml和150

6、0ml回流提取2次，1h/次，合并3次滤液。在70℃水浴下，用旋转蒸发仪蒸去部分乙醇，转移至分液漏斗中用石油醚萃取3次以除去叶绿素等，减压浓缩至小体积后转移至蒸发皿内，冻干成粉状，得冻干粉（45g，E0）。　　2.2提取物精制纯化　　2.2.1大孔吸附树脂的预处理取大孔吸附树脂2份（每份约140g），各用95%乙醇浸泡处理3次（每次处理时间约12h）。分别装入色谱柱内继续用95%乙醇洗涤至合格〔3〕，最后用大量去离子水洗脱（至流出液基本无醇味为止），备用。　　2.2.2见血封喉树叶水提取物的纯化取相当于200g生药材见血封喉树叶水提取之冻干物（38g冻干粉），去离子水定容至

7、200ml(相当于1g生药材/ml)，离心，取上清液缓慢通过大孔吸附树脂柱。去离子水洗脱至流出液颜色较浅，收集上样流出液和去离子水洗脱溶液，减压浓缩至小体积后转移至蒸发皿内，冻干（l(相当于1g生药材/ml)，按水提取物纯化过程操作，分别得到上样及水洗脱物（E1），醇洗脱物（约4.1g,E2）。　　其树脂柱的水洗脱物（W1，E1）冻干后易吸潮，常规条件下无法获得准确重量，将其配成一定浓度的浓溶液，备用。　　2.3粗提物毒性探讨　　2.3.1灌胃给药(ig)小鼠20只，随机分成2组，实验前禁食（不禁水）12h，按80