复方丹参缓释系统植入治疗股骨头缺血性坏死的实验研究

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1、复方丹参缓释系统植入治疗股骨头缺血性坏死的实验研究作者：黄相杰　姜红江　谭远超　刘德忠　周志高【摘要】　　［目的］探讨磷酸钙骨水泥（calciumphosphatecement，CPC）复方丹参缓释系统局部植入治疗股骨头缺血性坏死的机理。［方法］健康新西兰大白兔30只，制作股骨头坏死模型后，分为CPC组、CPC／丹参缓释系统组及对照组。于治疗后1、2、3和4周取标本，行HE染色和血管内皮细胞生长因子（vascularendothelialgroentalstudyonimplantationofcalciumphosphatecement/danshendrugdeliverysystemfo

2、ravascularnecrosisofthefemoralhead∥　　Abstract：［Objective］Toexploretheroleofimplantationcalciumphosphatecement（calciumphosphatecement）/Danshendrugdeliverysystemforavascularnecrosisofthefemoralhead.［Method］TheNelydividedintoCPC/Danshengroup,CPCgroupandthecontrolgroupsafterthemodelofavascularnecrosisof

3、thefemoralheadhavebeencopied.TheanimalsinationandVEGFimmunohistochemistrystaininethechangeindifferentgroups.［Result］paredtoCPCgroupandthecontrolgroup,theratioofemptyosteocyteslacunadramaticallydecreasedinCPC/Danshengroup,andratioofpositiveVEGFreactionofvessel,osteoblast,chondroblastsignificantlyincr

4、eased（P＜0.01,P＜0.05）.［Conclusion］P）：浙江仙琚制药股份有限公司，5ml／瓶（125mg）；复方丹参注射液：上海中西药业股份有限公司，每安瓿2ml，相当于丹参、降香各2g；免疫组化染色试剂盒：武汉博士德生物工程有限公司，产品编号：SA1020小鼠／兔IgG，内容：（1）5％BSA封闭液;（2）二抗：12ml;（3）SABC。血管细胞内皮生长因子（VEGF）：sc507SANTACRUZ；IX50／IX70倒置式系统显微镜：日本奥林巴斯（OLYMPUS）：PM20全自动显微照像设备；SPSS10.0统计软件：北京盈科科技发展有限公司。　　1.3动物模型及复方丹

5、参缓释系统的制备　　1.3.1动物模型　　兔耳缘静脉注射50μg／kg大肠杆菌内毒素（LPS），24h后重复，在第2次注射LPS后，臀肌注射甲基泼尼松龙（MP，2.5mg／kg）3次，每次间隔24h。　　1.3.2复方丹参缓释系统　　参照MakotoOtsuka、A.Ratier等〔1、2〕描述的药物CPC缓释系统制备方法，按预实验确定的复方丹参含量，每2gCPC粉末加入复方丹参0.1ml，先将复方丹参注射液与固相混合，再加入固化液充分搅拌混合，植入模具固化备用。　　1.4实验分组及方法　　造模4周后将兔随机分为3组。CPC组（8只）：在3%戊巴比妥静脉麻醉下行右髋关节外侧切口显露股骨颈前上部

6、，在临股骨头关节软骨缘处以2.5mm钻头钻孔，用小刮匙向内侧潜行刮除股骨头上部关节软骨下病灶，造成一直径约4.0mm骨腔，充填CPC。CPC／丹参缓释系统组（8只）：在CPC组手术方法基础上充填CPC／丹参缓释系统。对照组（4只）：在CPC组手术方法基础上不充填植入物。以上各组均治疗1次，并于治疗后1、2、3和4周各处死2只，分别取标本（对照组1只双侧，共2个标本）。取股骨头，沿中心孔冠状面剖成两半，置于体积分数为10%的甲醛溶液中固定48h，脱钙、脱水石蜡包埋切片，分别行HE染色和血管内皮细胞生长因子（VEGF）免疫组化染色，记录单位面积内空骨陷窝率、VEGF阳性血管率、VEGF阳性成骨细胞

7、率、VEGF阳性软骨细胞率，与对照组比较。　　1.5统计学处理　　单位面积内空骨陷窝率、VEGF阳性血管率、VEGF阳性成骨细胞率等资料均利用SPSS10.0统计软件包进行统计。多组资料间比较用F检验和t检验，相关分析用多元相关分析。以P＜0.05为差异有显著性意义，以P＜0.01为差异有非常显著性意义。　　2结果　　2.1一般情况　　第1次注射LPS后，所有兔均出现不同程度的精神萎靡，毛发蓬松，