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《荷斯坦牛耐热性rapd 和scar 标记的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、荷斯坦牛耐热性RAPD和SCAR标记的研究收稿日期：2008-02-18基金项目：国家十一五科技支撑计划(2006BAD04A01)；湖南省重大科技攻关专项(05NK2004)。作者简介：苏光华(1981-),男，苗族，湖南靖州人，硕士，主要从事动物分子数量遗传学研究,Tel;023-49842269,E-mail:ghsu81@yahoo.com.cn通讯作者：肖兵南(1949-)，男，汉族，湖南宁乡，硕士，研究员，硕士研究生导师，主要从事畜禽生物技术研究,Tel:0731-4615348,E-mail:bingnanxiao@yeah.net苏光华1，2，胡雄
2、贵2，燕海峰2，肖兵南2*，张元跃3(1.重庆市种畜场,重庆江北400020；2.湖南省畜牧兽医研究所,湖南长沙410131；3.湖南农业大学动物科技学院,湖南长沙410128）摘要：以52头高产耐热组和41头高产不耐热组中国荷斯坦牛的DNA为材料，选用200条RAPD引物，利用RAPD-PCR技术，对荷斯坦牛的耐热性进行研究。结果发现，使用S441引物和S463引物在高产耐热组中分别发现了581bp（RAPD-S441标记）和680bp（RAPD-S463标记）2条特异性的片段。通过测序和序列比较显示：581bp的片段与KCNN2基因的同源性达90%；680bp
3、片段与NW_001024067.1
4、BtUn_WGA9442_2同源性达99%。根据已知KCNN2基因的功能，初步判断KCNN2基因为耐热性能的候选基因。得到Genbank登录号EF123743和EF123744。利用NCBI的ORFfinder在581bp中没有发现ORF，与预测其是KCNN2基因的内含子3的结论相符合。在680bp中发现4个ORF，分别为ORF1、ORF2、ORF3、ORF4。这4个阅读框分别编码48AA、34AA、45AA、34AA。根据RAPD-S441、RAPD-S463标记的测序结果，利用Premier5.0软件设计对应的SCAR引物。
5、成功将RAPD-S441标记转化为耐热SCAR标记。关键词：荷斯坦；耐热性；RAPD-PCR；KCNN2基因中图分类号：Q75文献标识码：A文章编号：StudyonRAPDandSCARMarkersforHeat-ToleranceinHolsteinSUGuang-hua1，2，HUXiong-gui2，YANHai-feng2，XIAOBing-nan2*，ZHANGYuan-yue3(1.ChongqingBreedingStockFarm,Chongqing400020,China;2.HunanInstituteofAnimalandVeterinar
6、yScience,Changsha410131,China;3.CollegeofAnimalScienceandTechnology,HunanAgriculturalUniversity,Changsha410128,China)Abstract:TheheattoleranceoftheChineseHolstein(52herdshighyieldandheat-tolerance,togetherwith41herdshighyieldandheat-sensitivity)wasstudiedusingRAPD-PCR(200RAPDprimers).
7、Itindicatedthatthe581bp(primerS441)and680bp(primerS463)fragmentswerefoundinheat-tolerancegroups.Thehomologybetween581bpfragmentandKCNN2genegotto89%,aswellasthehomologybetween680bpfragmentandNW_001024067.1
8、BtUn_WGA9442_2gotto99%.AccordingtoitsfunctionitseemsasifthattheKCNN2genewasacand
9、idateofheat-tolerancegene.The581bpfragmentand680bpfragmentweresubmittedtoGenBankandtheaccessionnumbersofEF123743andEF123744weregotrespectively.TheORFwasnotfoundin581bpfragment,however,4ORFs（ORF1,coding48AA;ORF2,coding34AA;ORF3,coding45AA;ORF4,coding34AA）in680bpgenefragmentwerefound.Us
10、ingth
