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1、半枝莲联合反应停治疗肝癌的实验研究论文.freelL瘤内注射。观察肿瘤大小和瘤重,比较抑瘤效果。移植瘤采用抗CD31单抗做免疫组化染色,测定移植瘤组织微血管密度(MVD)。结果A、C组之间瘤重差异有统计学意义(P＜0.01),B、C组之间差异有统计学意义(P＜0.05)。A、B、C组抑瘤率分别为18.11%、53.15%和71.65%；协同系数0.74。3个治疗对照组之间微血管计数比较差异有统计学意义(P＜0.01),SNK-q检验显示A组和B组之间差异不明显(P＞0.05),.freelicea22(H22)cells,andt
2、hetreatmenteffectofthalidomideandintratumorinjectionofethanolextractofScutellariaBarbata(SB)ontumorgroouseH22livercellsicgroalemiceinoculatedsubcutaneouslylydividedinto4groups,7micepergroup.GroupA：intragastricadministrationide.GroupB：SBintratumorinjection.GroupC：binat
3、ionofthalidomideandSBeadministrationasGroupAandGroupB.GroupD(controlgroup)：1%Ethanol0.2～0.5mLintratumorinjection.Tumorvolumesoffourgroupsorsicrovesseldensities(MVD)ofalltransplantationtumorseasuredbyimmunohistochemicalstainingonoclonalantibody.ResultsThereeanentofMicr
4、ovesselCount：ThereongthetreatedgroupsandthecontrolgroupD(P＜0.01),nostatisticallysignificantdifferencesbetorSBinjectionandthalidomideelicitedsignificantantitumoractivitiesonthetransplantedtumormodelofH22.Anti-angiogenesiseffectsofSBandthalidomideore,thebinationagentsho
5、ide；hepatoma；antiangiogenesis；annimalmodel动物可移植性肿瘤是目前国内外肿瘤实验研究中最常用的一种模型。小鼠移植性肝癌模型H22作为对药物进行临床验证的“筛选系统”已证明是有效的1。本实验将半枝莲与反应停联合应用,通过建立BALB/C小鼠皮下接种肝癌H22细胞建立移植癌模型来探讨其抑瘤效果；采用抗CD31单抗做免疫组化染色,测定移植瘤组织微血管密度(MVD),探讨半枝莲和反应停联合用药的抗肿瘤血管生成作用。1材料与方法1.1细胞培养H22细胞株(南京凯基生物科技发展有限公司)培养于含10%胎
6、牛血清的RPMI1640(GIBCO公司)培养液中,置于CO2浓度为5%、相对湿度为95%、温度为37℃的细胞培养箱中培养。细胞传代后培养48、96h的贴壁细胞为对数生长期细胞,取传代后48h细胞。1.2半枝莲乙醇提取液的制备用半枝莲干品50g,采用4倍量的70%乙醇加热回流提取3次,每次1h。120目网筛过滤弃药渣,用干燥滤器过滤,取滤液25mL,用旋转蒸发仪蒸干后,105℃干燥3h,冷却30min,称取干燥品重量,所得重量/25mL即为半枝莲乙醇提取液。将剩余滤液调整pH值至7.0～7.2后于-20℃保存备用。1.3造模采用B
7、ALB/C小鼠,5周龄左右,雄性,体重(17±2.19)g。记录接种前每只小鼠体重。接种对数生长期H22细胞于小鼠右侧腹股沟皮下,接种量约6.0×106/只。28只BALB/C小鼠接种后完全随机分为4组,每组7只。反应停组(A组)自接种第1日起,反应停50mg/kg灌胃D1-12；半枝莲乙醇提取液瘤内注射组(B组)半枝莲乙醇提取液1g/mL0.2～0.5mL瘤内注射D6,8,10,12；联合用药组(C组)同时采用A组与B组的给药方法；对照组(D组)自接种第6日起,1%乙醇0.2～0.5mL瘤内注射D6,8,10,12。自接种第4日
8、起每日测量小鼠右侧腹股沟皮下移植瘤大小。瘤体体积＝π/4×a×b2(a为长径,b为短径)。接种第12日,小鼠称重后脱颈髓处死荷瘤小鼠,剥离瘤体后称取瘤重。抑瘤率＝(对照组瘤重－给药组瘤重)/对照组瘤重×100%；协同系数＝对照组瘤重×联合用药组瘤重
