太子参药材的hpce指纹谱分析论文

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1、太子参药材的HPCE指纹谱分析论文李仕海，刘训红，黄明辉【摘要】目的建立太子参的HPCE指纹图谱分析方法，为太子参质量评价提供依据。方法采用75μm×50cm毛细管柱，50mmol/L硼砂溶液作缓冲液，运行电压为20kV，检测波长为200nm。结果初步建立了以10个共有峰为特征指纹信息的HPCE指纹图谱。结论HPCE指纹图谱法可用于太子参的质量评价。【关键词】太子参；高效毛细管电泳法；指纹图谱Abstract:ObjectiveToestablishtheanalyticalmethodforthefingerprintofRadixPseudostellariaebyHP

2、CEandprovidethebasisforqualityassessmentofthecrudedrug.MethodsSeparationedona75μm×50cmuncoatedcapillarymol/LboratesolutionasCEbuffer.Therunvoltage.ResultsTheHPCEfingerprintof10mainpeaksinarily.ConclusionThemethodcanbeusedforqualitycontrolofRadixPseudostellariae.Key.的块根。见表1。表1太子参样品产地（略）2方法与

3、结果2.1供试品的制备精密称取样品粗粉粉末2.0g，加入甲醇10ml，超声提取1h，抽滤后放于带塞试管中。用微孔滤膜（孔径为0.45μm）滤过，滤液作为供试品。2.2电泳条件未涂层石英毛细管柱75μm×50cm,.freel（河北锐沣色谱器件有限公司）；检测波长200nm；压力进样20mbar,20s；分离电压20kV；毛细管温度30℃；运行缓冲液50mmol/L硼砂。毛细管使用前以1mol/L氢氧化钠溶液，重蒸馏水和运行缓冲液依次通过压力冲洗5，5，5min。上述试剂使用前均经0.45μm滤膜滤过。2.3方法学考察2.3.1稳定性实验取同一批次供试品溶液（样品4），分别在

4、0，4，8，16，24，36h测定指纹图谱，用“中药指纹图谱相似度计算软件”计算，结果相似度均大于0.96，说明供试品在测定的36h内保持稳定。2.3.2精密度实验取同一批次供试品溶液（样品4），连续进样5次，测定指纹图谱，考查进样精密度，用“中药指纹图谱相似度计算软件”计算，结果相似度均大于0.95，说明供试品进样精密度良好。2.3.3重现性实验取样品4，按供试品制备方法分别制备5份供试品，测定指纹图谱，用“中药指纹图谱相似度计算软件”计算，结果相似度均大于0.93，表明本法测定的重现性较好。以上结果表明指纹图谱中各色谱峰的相对迁移时间和峰面积基本一致，相似度较高，符合指

5、纹图谱研究的的技术要求。2.4指纹图谱的建立将供试品溶液分别放入自动进样的样品管中，按选定的测试条件，进行检测。同一上述实验条件下，测定所有供试品HPCE色谱图。根据10批次供试品测定结果所给出的峰数、峰值（积分值）和峰位（相对迁移时间）等相关参数，进行分析、比较，制定优化的指纹图谱。见图1～2。2.5指纹图谱分析与评价2.5.1共有指纹峰标定经比较所有测定和记录的毛细管电泳图谱，选取其中10个共有峰作为指纹图谱的特征峰。以7号峰为参照峰，分别计算10批样品中共有峰的相对迁移时间平均值。太子参毛细管电泳指纹图谱中1～10号共有峰相对迁移时间依次为：0.518，0.635，0

6、.722，0.937，0.952，0.965，1.00，1.309，1.574，1.684。2.5.2共有指纹峰面积比以7号峰为参照峰，计算10批样品共有峰的相对峰面积。结果见表2。表2太子参毛细管电泳指纹图谱中共有峰的相对峰面积（略）2.5.3相似度评价将测试数据导入国家药典委员会“中药指纹图谱相似度评价系统（2004A）”软件，经校正，将谱峰自动匹配，然后生成对照图谱，进行谱峰差异性评价和整体相似性评价。通过中药指纹图谱相似度计算软件得出太子参HPCE指纹谱共有模式R（图3）；与共有模式比较，10批不同产地太子参的相似度分别为0.959，0.990，0.979，0.97

7、5，0.916，0.939，0.996，0.947，0.937，0.973。3讨论3.1不同提取方法的考察取同样量的太子参样品，依次用索氏提取法、超声波提取法和煎煮法提取并制成供试品溶液，进行HPCE分析，结果表明，以出峰数目为考察指标，索氏提取法和超声提取法效果较佳，由于超声波法简便、省时，故本实验选用超声波法制备供试品溶液。3.2电泳条件的选择3.2.1缓冲液浓度的选择在选定硼砂作缓冲液基础上，考察了不同缓冲液浓度20，30，40，50，60mmol/L对分离度的影响，发现随着缓冲液浓度的增加，分析时间延长；适