p27kip1与肿瘤论文

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1、p27Kip1与肿瘤论文真核生物的细胞周期进程是由一系列调控因子有序的聚合和激活来调节控制的,其正常与否和细胞以及个体的生长、分化、衰老和癌变密切相关。参与细胞周期调控的主要分子有：细胞周期蛋白（cyclin），细胞周期蛋白依赖性激酶（cyclindependentkinases，CDKs）和CDK抑制蛋白（cyclindependentkinaseinhibitors，CDKI）。其中CDKI通过与细胞周期蛋白，CDK或细胞周期蛋白-CDK复合物的结合,抑制CDK的活性，导致细胞周期停止，阻断细胞的增殖过程。目前发现的CDKI按结构和功能的不同分成两大类：一类为Ink4（

2、Inhibitorofcdk4）,包括p16、p15、p18和p19，其蛋白质结构均具有4个回钩状重复序列.freelRNA的长度为2.5kp。1994年Polyak克隆出了p27蛋白的cDNA。用Mv1Lu细胞系确定的p27cDNA探针筛选人类肾脏和小鼠胸腺来源的cDNA文库，得到了高度相关序列的克隆。人类和小鼠的cDNA分别具有594bp和591bp的开放阅读框架，在进行初始翻译的适当位置有一ATG起始密码子，翻译结束有一终止信号。p27蛋白在人、貂、鼠中具有高度保守性。在N-末端与p21蛋白具有42%的同源性，与p57有47%的同源性。这一区域28-87位的60个氨基

3、酸具有两个Ser磷酸化位点，介导CDK激酶活性的抑制，153-169位的17个氨基酸序列为核定位序列，该序列在Kip的3个成员中均存在。p27的C-末端有一个Thr磷酸化位点，与其H1组蛋白磷酸化抑制作用有关［2］。在动物实验中发现，几乎各种组织均表达p27蛋白，定位于细胞核。通常在非增生性细胞中出现p27蛋白表达，例如肠道中，位于微绒毛中间和顶部的静止期细胞出现p27阳性表达，而在增生的基底细胞p27表达则罕见。细胞周期中，p27蛋白水平在静止期细胞最高，受到促有丝分裂源刺激后开始下降，当DNA合成达到最高点，p27蛋白降到最低水平，随着细胞周期的完成，p27开始重新聚积

4、，细胞重新进入静止状态［5］。二、p27Kip1的调节及作用机理p27蛋白具有限制性调节细胞周期进程的作用，这一作用主要通过抑制CDK复合物的功能来实现。虽然p27能广泛抑制各种周期素和CDK的活性，但主要抑制细胞周期蛋白E-CDK2和细胞周期蛋白D-CDK4等G1期激酶复合物，使细胞不能通过G1期。p27对CDK的抑制主要有两个方面，一方面通过其C-末端抑制Cdk2-Thr160的磷酸化，从而抑制细胞周期蛋白-CDK2前活性状态复合物的激活过程。另一方面通过直接与细胞周期蛋白-CDK结合抑制已激活的复合物的激酶活性［2］。大量体外实验证明，p27在介导胞外信号尤其是负性信

5、号的传导中起着极其重要的作用。在TGF-β、接触抑制及多种外源性细胞生长抑制因子处理的细胞系中，p27蛋白表达量增加，使细胞通过限制点最关键的细胞周期蛋白E-CDK2复合物的活性受到抑制，从而使细胞周期停滞在G1期，细胞生长停止［6，7］。研究发现，TGF-β处理前后的细胞内p27的mRNA量无明显变化，但细胞内可获得的游离的p27蛋白量增加，这种实际有效数量的释放可能是抑制细胞周期的关键因素。TGF-β一方面通过抑制CDK4的合成而减少G1中期细胞内形成的细胞周期蛋白D1-CDK4-p27三元复合物，从而使细胞内可利用的、游离的p27相对增加，使p27能有效地抑制G1后期

6、的细胞周期蛋白E-CDK2的复合物活性。同时，CDK4水平的下降也可通过抑制Rb的磷酸化，阻止转录因子E2F的释放，从而抑制DNA的合成。另一方面，TGF-β可能通过抑制细胞周期蛋白E的表达而减少G1末期细胞内细胞周期蛋白E-CDK2的浓度，使细胞内原有的p27量足以结合细胞周期蛋白E-CDK2，将其浓度降低到促进细胞增殖的阈值以下而抑制细胞周期［2］。Kato等［8］用cAMP处理巨噬细胞后，发现p27合成增加2-3倍，细胞停滞在G1期。另外，Peng等［7］报道了在用抗上皮生长因子受体处理的细胞系中，p27mRNA水平增高，以至p27蛋白合成增加，CDK2活性受抑制，提

7、示在抗增殖信号的作用下，p27翻译的快速增长对于G1期进程的负性调节也是一个不可忽视的方面。此外，p27还与正性生长调控因子有关。在血小板源性生长因子处理的BALB/C3T3细胞系中，发现p27的合成受到抑制。在有丝分裂促进因子白介素-2（IL-2）处理的T细胞中，游离的p27的量明显减少，细胞周期蛋白-CDK2复合物的活性增加，细胞由G1期进入S期［6］。Mal等［9］在TGF-β处理的MvlLu细胞中发现病毒E1A癌蛋白能直接与p27结合，阻止其抑制效应，恢复细胞周期蛋白E/A-CDK2复合物的活性，促进细胞周