枣花丹合剂对小鼠镇静催眠作用的实验研究论文

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1、枣花丹合剂对小鼠镇静催眠作用的实验研究论文周永忠，赵迅霞，于赓赓，包佳敏，陈芳花，贺弋【摘要】目的探讨枣花丹合剂对小鼠的镇静、催眠及抑制自主活动的作用。方法采用自主活动仪测定小鼠的活动次数，翻正反射法测定注射戊巴比妥钠后小鼠睡眠时间，对抗3-MP诱导惊厥实验来观察枣花丹合剂对正常小鼠的镇静催眠作用。结果枣花丹合剂高、中、低剂量组均能增加入睡小鼠的动物数.freela公司。地西泮注射液(Diazepam，DZ)：上海旭东海普药业有限公司。2方法2.1动物分组将265只小鼠随机分为5组：枣花丹合剂大剂量组(ZHD大剂量组)、枣花丹合剂中

2、剂量组(ZHD中剂量组)、枣花丹合剂小剂量组(ZHD小剂量组)。安定组、生理盐水组。每组45只，各组又随机分为A、B、C三个小组，每小组15只。依据预实验所测得ZHD最大耐受量为45g/kg，以45g/kg为高剂量组，再以稀释至最大耐受量的1/2作为中剂量组,1/4作为低剂量组,将ZHD分为大、中、小剂量组，分别给予45，22.5，11.25g/kg·d枣花丹合剂灌胃。安定组按4mg/kg·d灌胃。生理盐水组灌服与其它组等容积生理盐水，各组连续给药7d，2次/d，于末次给药前8h禁食，前1h禁水，于末次给药30min后开始记录小鼠睡

3、眠时间、自主活动等指标。小鼠每次灌胃剂量为：0.4ml/20g。2.2观察指标2.2.1小鼠自主活动次数小鼠连续灌胃7d,于末次给药30min后将各不同剂量组中A小组15只小鼠置于ZYC-1型自主活动仪内(每台同时观测5只小鼠),测小鼠的自主活动次数，实验要求在安静、光线较暗的环境中检测。小鼠适应环境5min，计数10min内小鼠的的活动次数，并进行各组对比。2.2.2小鼠戊巴比妥钠阈下剂量协同实验对ZHD高中低不同剂量组的B小组小鼠分别灌胃45，22.5和11.25g/kg的，30min后给小鼠腹腔注射戊巴比妥钠20mg/kg，观

4、察20min内小鼠翻正反射消失1min以上的动物数并计算睡眠小鼠百分率。2.2.3戊巴比妥钠的小鼠的潜伏期及睡眠时间给所有的B组小鼠灌胃给药，30min后给小鼠腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg，观察睡眠小鼠数以计算睡眠小鼠百分率，并记录入睡小鼠的睡眠时间(翻正反射消失到恢复的时间为睡眠时间。翻正反射消失达1min以上者确定为阳性，即已入睡)。2.2.4小鼠抗惊厥实验对各不同剂量组的C小组小鼠连续给药7d,于末次给药30min后腹腔注射20μl/kg剂量的3-MP，观察有无惊厥现象的发生，计算其惊厥的发生率，以证实枣花丹合剂无镇静作用

5、。2.2.5数据处理所得数据均用±s表示。用SPSS10.0软件单因素方差分析，方差不齐时用非参数法进行统计学处理。3结果3.1对小鼠自主活动次数的影响结果见表1。表1ZHD对小鼠自主活动的影响3.2对阈下剂量戊巴比妥钠催眠作用的影响结果见表2。表2对阈下剂量戊巴比妥钠催眠作用的影响由表2可以看出与阴性对照组比较，ZHD水提高剂量组可明显增加戊巴比妥钠最大阈下剂量所致的小鼠入睡的只数，表明ZHD合剂与戊巴比妥钠具有协同作用且有一定的剂量依赖关系。3.3对注射阈剂量戊巴比妥钠的小鼠睡眠时间的影响结果见表3。表3对戊巴比妥钠阈剂量睡眠时

6、间的影响由表2可以看出与阴性对照组比较，ZHD高剂量组可显著延长戊巴比妥钠睡眠时间(P0.01)，同时可缩短睡眠潜伏期时间(P0.05)。此外，与安定组相比高剂量组与安定组无显著性差别(P0.05)，表明ZHD高剂量组的镇静催眠作用与安定0.004g/kg时作用相当。3.4对注射3-MP后小鼠惊厥程度影响结果见表4。表4抗惊厥试验结果从表4可以看出，与阴性对照组(生理盐水组)相比(P0.01),.freelmell等10用GABAA2α受体激动剂CGS21680兴奋vLPO神经元时则睡眠时间增加，上述不同的实验证据均证明了vLPO是

7、机体睡眠发生的重要部位。进一步实验证明vLPO中80%的神经元含有抑制性神经递质γ-氨基丁酸(GABA)和galanin，它们发出纤维投射到下丘脑后部的结节乳头体核(TMN)、脑干缝核、蓝斑核等觉醒中枢产生抑制觉醒作用11。GABA受体激动剂GABA和GABAB受体激动剂BAC可延长睡眠时间而缩短觉醒时间11。本实验结果证实ZHD能够延长小睡眠时间而缩短小鼠觉醒时间，由此推测：ZHD可能会激活vLPO中的γ-氨基丁酸能神经元活性，使GABA的分泌增多，从而诱发睡眠。3-MP为GABA合成酶的抑制剂，微量注射3-MP会减少内源性GAB

8、A的合成和释放，对觉醒中枢抑制减弱，导致觉醒中枢相对增强12，13。本实验在对小鼠灌胃7d，于末次给药30min后腹腔注射一定浓度的3-MP，小鼠末见惊厥现象的发生，提示ZHD具有对抗3-MP的作用，说明ZHD能增强内源性GABA的合