枣花丹合剂对小鼠镇静催眠作用的实验研究

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1、枣花丹合剂对小鼠镇静催眠作用的实验研究【关键词】枣花丹合剂;镇静;催眠;小鼠　枣花丹合剂是在借鉴临床各类镇静催眠药物的基础上由酸枣仁、落花生枝叶、丹参经一定组方组合而成。此复方已经临床证实可以显著地增加人夜间慢波睡眠时间[1]，但其治疗疗效尚不确切，且缺乏基础实验研究的相关资料，故需做进一步深入研究。本实验通过药物对小鼠行为学活动的影响来观察枣花丹合剂对正常小鼠的镇静催眠作用。　　1材料与仪器　　1.1动物昆明种小鼠265只，体质量(20±2)g，雄性，由宁夏医科大学实验动物中心提供。　　1.2仪器YLS-1A多功能自主活动仪购自山东省医学科学院设备站。电子分析天平，上海天平仪器厂生产，

2、型号：JA5003。旋转蒸发仪上海安亭电子仪器厂生产，型号ZFQ-85A。离心机珠海黑马仪器有限公司生产，型号1M1015B。　　1.3药品与试剂炒酸枣仁、落花生枝叶、丹参(以上各药均购自宁夏中医研究院)。戊巴比妥钠、3-巯基丙酸(3-MP)均购自Sigma公司。地西泮注射液(Diazepam，DZ)：上海旭东海普药业有限公司。　　2方法　　2.1动物分组将265只小鼠随机分为5组：枣花丹合剂大剂量组(ZHD大剂量组)、枣花丹合剂中剂量组(ZHD中剂量组)、枣花丹合剂小剂量组(ZHD小剂量组)。安定组、生理盐水组。每组45只，各组又随机分为A、B、C三个小组，每小组15只。依据预实验所测

3、得ZHD最大耐受量为45g/kg，以45g/kg为高剂量组，再以稀释至最大耐受量的1/2作为中剂量组,1/4作为低剂量组,将ZHD分为大、中、小剂量组，分别给予45，22.5，11.25g/kg·d枣花丹合剂灌胃。安定组按4mg/kg·d灌胃。生理盐水组灌服与其它组等容积生理盐水，各组连续给药7d，2次/d，于末次给药前8h禁食，前1h禁水，于末次给药30min后开始记录小鼠睡眠时间、自主活动等指标。小鼠每次灌胃剂量为：0.4ml/20g。　　2.2观察指标　　2.2.1小鼠自主活动次数小鼠连续灌胃7d,于末次给药30min后将各不同剂量组中A小组15只小鼠置于ZYC-1型自主活动仪内(

4、每台同时观测5只小鼠),测小鼠的自主活动次数，实验要求在安静、光线较暗的环境中检测。小鼠适应环境5min，计数10min内小鼠的的活动次数，并进行各组对比。　　2.2.2小鼠戊巴比妥钠阈下剂量协同实验对ZHD高中低不同剂量组的B小组小鼠分别灌胃45，22.5和11.25g/kg的，30min后给小鼠腹腔注射戊巴比妥钠20mg/kg，观察20min内小鼠翻正反射消失1min以上的动物数并计算睡眠小鼠百分率。　　2.2.3戊巴比妥钠的小鼠的潜伏期及睡眠时间给所有的B组小鼠灌胃给药，30min后给小鼠腹腔注射戊巴比妥钠30mg/kg，观察睡眠小鼠数以计算睡眠小鼠百分率，并记录入睡小鼠的睡眠时间

5、(翻正反射消失到恢复的时间为睡眠时间。翻正反射消失达1min以上者确定为阳性，即已入睡)。　　2.2.4小鼠抗惊厥实验对各不同剂量组的C小组小鼠连续给药7d,于末次给药30min后腹腔注射20μl/kg剂量的3-MP，观察有无惊厥现象的发生，计算其惊厥的发生率，以证实枣花丹合剂无镇静作用。　　2.2.5数据处理所得数据均用±s表示。用SPSS10.0软件单因素方差分析，方差不齐时用非参数法进行统计学处理。　　3.3对注射阈剂量戊巴比妥钠的小鼠睡眠时间的影响结果见表3。表3对戊巴比妥钠阈剂量睡眠时间的影响由表2可以看出与阴性对照组比较，ZHD高剂量组可显著延长戊巴比妥钠睡眠时间(P<

6、0.01)，同时可缩短睡眠潜伏期时间(P<0.05)。此外，与安定组相比高剂量组与安定组无显著性差别(P>0.05)，表明ZHD高剂量组的镇静催眠作用与安定0.004g/kg时作用相当。　　3.4对注射3-MP后小鼠惊厥程度影响结果见表4。表4抗惊厥试验结果从表4可以看出，与阴性对照组(生理盐水组)相比(P<0.01),表明ZHD高剂量组和安定组小鼠的惊厥发生数显著减少，提示ZHD高剂量组有一定的镇静作用。　　4讨论　　枣花丹合剂(ZHD)是由酸枣仁、落花生枝叶、丹参经一定组方组合而成的复方合剂，酸枣仁为祖国医学传统镇静、催眠主药[2]，具有镇静、催眠作用的机理[3，4

7、]。王翘楚实验和临床证实落花生枝叶也有较好的镇静、催眠作用[5]。丹参为祖国医学活血化瘀、增加血脑屏障通透性药，古人曰“丹参一味，功同四物”[6]。近年许多学者研究证实丹参与某些麻醉药品合用，不仅具有增强麻醉镇静的作用，而且也有镇静催眠作用[7]。　　本实验选取小鼠自主活动次数与抗惊厥作用作为镇静作用的代表指标，选取小鼠睡眠时间、小鼠睡眠潜伏期、小鼠睡眠百分率作为催眠作用的代表指标。实验结果显示，随着给药剂量的增大小鼠自主活动次数呈