恶性胸腔积液患者t淋巴细胞亚群的变化意义论文

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1、恶性胸腔积液患者T淋巴细胞亚群的变化意义论文王英禹，张瑞，张志培，周勇安，孙晓雁【关键词】胸腔积液；T淋巴细胞；CD4；CD8ValueofmeasurementofTlymphocytesubsetsinpatientsalignantpleuraleffusions【Abstract】AIM:TomeasureTlymphocytesubsets(TLS)inperipheralblood(PB)andpleuraleffusion(PE)inpatientsalignantpleuraleffusions(MPE)andtostudyth

2、echangesofTLSinPBandPEinpatientsotherapy.METHODS:ThelevelsofTLSinPBandPEinpatientsalpersoninedandpared;ThelevelsofTLSinPBandPEotherapy.RESULTS:ThedistributionofTLSilarinPBandPEinpatientsalperson(30.6±2.4vs20.9±1.8,P0.05),buttheratioofCD4+/CD8+alperson(1.78±0.21vs2.71±0.35,P0

3、.05),andthelevelofCD4+Tcellilaral;paredotherapycoulddepressCD8+Tcell(30.6±2.4vs24.7±2.3,31.6±2.4vs21.9±4.1,P0.05)andelevatetheratioofCD4+/CD8+(1.78±0.21vs2.19±0.19,1.69±0.30vs2.62±0.40,P0.05)inPBandPEinpatientseasuringitinPB;itishelpfultomeasurethelevelofTLSinPBandPEfordisti

4、nguishingMPEfromBPE;cellmediatedimmunitydepressioninMPEcanbepartlyamelioratedbychemotherapy.【Keyphocyte；CD4；CD8【摘要】目的：探讨检测恶性胸腔积液(MPE)患者外周血(PB)和胸水(PE)中T淋巴细胞亚群(TLS)的意义及化疗前后TLS的变化.方法：对比良性胸腔积液(BPE)、MPE患者外周血和胸水及健康正常人外周血中TLS的水平；对比MPE患者外周血和胸水中TLS的水平；对比MPE患者化疗前、后外周血和胸水中TLS的水平.结果：TLS

5、在胸腔积液患者外周血和胸水中分布相似；MPE患者外周血中CD8+T细胞水平高于正常人（30.6±2.4vs20.9±1.8，P0.05），CD4+T细胞相仿，CD4+/CD8+低于正常（1.78±0.21vs2.71±0.35.freelalignantpleuraleffusion,.freelL.MP患者经NP方案化疗2个周期后（盖诺25mg/m2ivd1，d8；DDP40～50mgd1～3，21d为一周期），收集胸腔积液，同时抽取静脉血10mL.采集体检正常健康人静脉血10mL.1.2方法胸腔积液用200μm尼龙网过滤组织于离心管；加入5

6、mLRPMI；18℃，200g离心10min，去除上清液，混悬细胞沉淀于20mLRPMI，重复离心1次，重混悬细胞沉淀于5mLRPMI,加入PBS冲洗细胞，室温下，200g离心10min，去除上清液.重复此步骤.混悬细胞沉淀于适量RPMI备用.用台盼蓝计数活细胞百分率.将肝素化的新鲜去红细胞混悬液室温下加入等量PBS混匀，每10mL去红细胞混悬液/PBS混悬液中加入3mLFicollHypaque液.18℃，900g，离心30min.移除上层的血浆和血小板，缓慢的转移中层的单个核细胞层到锥形管，用3倍体积的HBSS洗涤细胞，18℃，490g，离

7、心10min.去除上清液.用HBSS重新混匀细胞、洗涤并离心1次，去除上清液.混悬细胞于RPMI备用.用台盼蓝计数活细胞百分率.计数外周血和胸腔积液淋巴细胞，用RPMI调整细胞度至2.5×109/L，将l06淋巴细胞悬于100μLHanks缓冲液(含1g/L牛血清蛋白、0.1g/L叠氮钠)中，分别与20μL抗CD3APC(UCHT1)、抗CD4FITC(RPAT4)及抗CD8Cychrome(RPAT8)mAb或相应IgG对照蛋白(均购自美国BDPharmingen公司)于4℃孵化30min，Hanks缓冲液洗涤2次，5g/L多聚甲醛固定.24

8、h内用FACStarPlus流式细胞仪检测CD3，CD4，CD8细胞，计算CD4/CD8比值.统计学处理：用SPSS10.0统计软件，数据以x±sx表