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时间:2018-11-22
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1、肝细胞癌组织中COX2及VEGF表达的临床研究论文【摘要】目的:研究肝细胞癌(HCC)中环氧化酶2(COX2)和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达及其相互关系.方法:应用免疫组织化学法检测HCC30例石蜡包埋组织中COX2与VEGF蛋白的表达情况,分析其相互关系及与肝细胞癌临床病理特征间的关系.结果:HCC中COX2的表达阳性率达70.0%,分化好的HCC中COX2蛋白的表达高于分化差的HCC(分化好vs分化差,P<0.05),转移组中COX2蛋白表达高于无转移组(转移vs未转移,P<0.01);而COX2蛋白的表达与肿瘤大小、有无包膜及AFP水平无关.肝细胞癌
2、中VEGF的表达阳性率达86.7%,VEGF的表达与肿瘤有无包膜及转移有关,而与肿瘤大小、分化程度及AFP水平无关.结论:COX2在肝细胞癌中高表达.freela.METHODS:Paraffinembeddedtissuesfrom30hepatocellularcarcinomapatientsethodofSPimmunohistochemicalstainingforproteinexpressionsofCOX2andVEGF.TherelationshipbetetastasisexpressedCOX2proteinstrongerthanthoseeta
3、stasis(P0.01).TheproteinexpressionofCOX2inHCCorsize,theenvelopeandthelevelofAFP.VEGFproteinexpressionetastasisorenvelope(P0.05),butnotrelatedtothetumorsize,thepathologicalgradeandthelevelofAFP.CONCLUSION:ThehighexpressionofCOX2inHCCcaninducethehighexpressionofVEGF.ThecoexpressionofCOX2an
4、dVEGFmightplayanimportantroleinangiogenesis,thuspromotingthegroetastasisofHCC.【Keya,hepatocellular;cyclooxygenase2;vascularendothelialgromunohistochemistry0引言环氧化酶(cyclooxygenase,COX)是催化花生四稀酸(arachidonicacid,AA)合成内源性前列腺素(prostaglandin,PG)的限速酶.在哺乳动物中COX有两种同工酶COX1和COX2.COX2是一种诱导酶,不仅在炎症反应中起作
5、用,还在许多肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用[2];而血管内皮生长因子(vascularendothelialgroa,HCC)组织中COX2和VEGF蛋白的表达,分析它们在HCC血管生成和侵袭转移中的作用.1材料和方法1.1材料中南大学湘雅三医院病理科2004/2005年HCC石蜡标本30(男24,女6)例,年龄29~71(中位51)岁.EdmondsonI级4例,II级13例,III级11例,IV级2例;肿瘤直径<5cm16例,≥5cm14例;肿瘤有包膜11例;伴门静脉癌栓12例;AFP<500μg/L9例,≥500μg/L21例.选取癌旁肝硬化组织25例和的正常肝组织1
6、0例作为对照.羊抗人COX2多克隆抗体,鼠抗人VEGFmAb均系SantaCruz公司产品.链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶免疫组化染色超敏试剂盒,购至北京中山生物技术有限公司.1.2方法采用链霉菌抗生物素蛋白过氧化物酶(streptavidinperoxidase,SP)免疫组化技术,石蜡包埋组织4μm连续切片,常规二甲苯脱蜡,梯度酒精水化,30mL/L过氧化氢阻断内源性过氧化物酶10min;柠檬酸组织抗原修复液微波修复15min;过氧化酶阻断液室温下孵育10min;非免疫性动物血清室温下孵育10min;滴加相应稀释的一抗,4℃孵育过夜;PBS液冲洗后加生物素标记的二抗室温
7、下孵育10min,加链亲和素过氧化物酶溶液孵育10min,PBS液冲洗,DAB染色,苏木精复染,脱水、透明封片,光镜下观察.以PBS代替一抗作阴性对照,用已知阳性片作阳性对照.COX2和VEGF阳性信号为棕黄色或深棕黄色颗粒,定位于细胞质,胞质无棕黄色或与背景着色一致为表达阴性细胞.COX2,VEGF判断标准:根据阳性细胞占肿瘤细胞的比例来判断,(在400倍光镜下随机观察5个癌巢)阳性细胞≤10%为阴性,阳性细胞>10%为阳性.统计学处理:采用SPSS13.0软件进行统计学处理.用χ2
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