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《栀子对兔膝骨关节炎模型关节软骨病理改变及白细胞介素》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、栀子对兔膝骨关节炎模型关节软骨病理改变及白细胞介素作者：吴剑 鲍同柱 舒迅 赵龙桃 鄢飞 严雪港【摘要】目的观察栀子浸膏对Hulth法复制兔膝骨关节炎模型中软骨的病理改变及关节液中白细胞介素-1β（IL-1β）的影响。方法24只大白兔随机分为给药组，模型组和对照组，每组8只。给药组，模型组行Hulth术法复制骨关节炎模型，术后第5周，给药组以栀子浸膏600mg/kg灌胃，模型组与对照组给予等量生理盐水灌胃，给药3周后行软骨PelletierJP与Mankin's评分，取股骨内侧髁约0.5cm×0.5cm×0.2cm组织块行电镜
2、观察软骨细胞形态及检测关节液中IL-1β的含量。结果栀子浸膏能减轻关节软骨病理损伤，给药组关节液中IL-1β的含量明显低于模型对照组(P<0.05)。结论栀子浸膏可减少骨关节炎模型关节液IL-1β的含量和保护关节软骨的作用。【关键词】骨性关节炎;栀子；关节软骨 骨关节炎（Osteoarthritis,OA）的发病机制尚未完全阐明，但有关软骨降解的机制已得到深入研究，目前认为白细胞介素-1β（IL-1β）参与了这一过程，它促使软骨细胞、基质的降解以及滑膜炎的形成［1］。栀子系茜草科植物的成熟果实，有泻火除烦、清热利尿、凉
3、血解毒功效。用于热病心烦,黄疸尿赤,血淋涩痛,血热吐衄,目赤肿痛,火毒疮疡;外治扭挫伤痛等［1,2］。通过研究栀子浸膏对实验性骨关节炎的影响，本实验观察了栀子浸膏对兔膝OA模型关节液IL-1β及软骨细胞形态的影响。 1材料与仪器 1.1动物 大耳白兔24只，3～4月龄，体重2.0～2.5kg,雌雄各半，由武汉市万千佳禾实验动物养殖有限公司提供。 1.2药物生栀子浸膏的制备：取成熟生栀子果仁3000g（宜昌众生药业公司中药饮片厂生产）,用75%乙醇提取后浓缩得粘稠浸膏436g(6.88g生药/g浸膏)；青霉素，华北制药股
4、份有限公司；氯胺酮，福建古田药业有限公司。 1.3试剂IL-1β试剂盒为TBD生物发展中心产品。 1.4仪器OLYMPUS光学显微镜，日本奥林巴斯公司生产；RM2315切片机，德国LEica公司生产；电子显微镜，日本日立公司生产。 2方法 2.1模型的制备、分组及给药 将24只白兔随机分为给药组、模型组和对照组，每组8只。氯胺酮（10mg/kg）麻醉后，给药组、模型组行单侧Hulth术，即取膝关节内侧长约4cm的纵切口,探查关节腔内无原发病变后切断内侧副韧带、前后交叉韧带;并完整切除内侧半月板,注意勿损伤关节软骨面,
5、彻底止血,冲洗关节腔,行抽屉实验阳性后,逐层缝合关节囊,皮肤,无菌敷料包扎伤处,不予固定；对照组仅打开关节腔,不损伤韧带和半月板,缝合皮肤,无菌敷料包扎伤处。术后每天肌肉注射青霉素40万U,伤口换药,连续7d预防感染。根据临床上超疲劳活动容易提前出现骨关节炎的发病特点［3］,手术1周后,每天强迫动物活动30min,分2次驱赶,4周后即可获得稳定的OA模型。术后第5周开始栀子浸膏组给予栀子浸膏600mg/kg灌胃，模型组和对照组分别给予等量生理盐水灌胃，给药3周。 2.2样本取材及实验指标的检测 ①在患侧关节处脱毛，消毒后用
6、装有1ml生理盐水注射器行关节腔穿刺，将1ml生理盐水注入关节腔，反复冲洗后抽出，盛于2ml离心管中，3000r/min,离心10min，取上清，按试剂盒方法检测IL-1β含量。②沿原切口切至关节腔行大体(肉眼)观察后,以锐利刀片切取股骨内髁软骨,置于10%甲醛中固定,系列脱水、脱钙,常规石蜡包埋,切片,HE染色,以备光镜观察(大体PelletierJP评分及光镜下Markin's评分［4］)。③取股骨内髁关节软骨修成1mm×1mm×1mm的全软骨层,分别以3%戊二醛固定8h后置于缓冲液中,再以锇酸固定、脱水,环氧树脂包埋,纵
7、向超薄切片经电子染色后备电镜观察。 2.3统计学分析 数据均以±s表示，大体评分用秩和检验,其余组间比较用t检验。 3结果 3.1大体观察 按以下原则评分:关节面光整,色泽如常，为0分;关节面粗糙,有小的裂隙且色泽灰暗，为1分;关节面糜烂,软骨缺损深达软骨表中层，为2分;关节面溃疡形成,缺损深达软骨深层，为3分;软骨剥脱,软骨下骨质暴露，为4分［4］。给药组软骨改变以糜烂粗糙为主,部位集中在股骨内髁内侧,其中2例出现了内髁内侧缘纤维软骨增生。模型组软骨改变仍集中在股骨内髁关节面,以溃疡形成为主,且内髁内侧缘纤维软骨增
8、生更加明显,其中2例出现软骨剥脱。对照组软骨表面没有明显改变。表1示给药3周后解剖显微镜下软骨OA评分,说明给药组软骨退变明显轻于模型组(P<0.01)。表1给药3周后解剖显微镜下软骨OA不同评分例数（略） 3.2光镜观察给药组软骨表中层细胞数弥漫性增多,并出现簇集样
