干扰素联合无环鸟苷、维生素c治疗单疱病毒性角膜炎的实验研究

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1、干扰素联合无环鸟苷、维生素C治疗单疱病毒性角膜炎的实验研究［摘要］目的通过动物实验研究干扰素（滴宁眼液）联合无环鸟苷眼液、维生素C治疗单疱病毒性角膜炎（HSK）的疗效。方法在Hep-2（喉癌）细胞上进行单纯疱疹病毒-I型（HSV-1）接种培养，制作兔HSK模型。结果联合治疗组分别与种毒对照组、无环鸟苷组、干扰素组相比，角膜上皮病变分值差异有显著性（P＜0.05）；平均治愈时间：联合治疗组为（10.3±0.9）天，干扰素组为（13.7±0.51）天，无环鸟苷组为（13.4±0.583）天；病理结果：联合治疗组角膜上皮及基质病变程度

2、同期比明显轻于其他3组。结论干扰素与无环鸟苷、维生素C联合应用治疗HSK能增强药物的抗病毒作用、抑制HSV复制、提高机体的免疫力，与单独使用干扰素（滴宁眼液）、无环鸟苷眼液相比，提高了疗效，缩短了病程，取得了较满意的效果。［关键词］干扰素；无环鸟苷；维生素C；单纯疱疹病毒；角膜炎StudyontreatingherpessimplexkeratitisinC［Abstract］ObjectiveTostudytherapeuticeffectofIFNandACV，VitConeyesofrabbitherpessimplexk

3、eratitis(HSK)models.MethodsHerpessimplexvirusI(HSV1)odelsofHSKcouldbemade.ResultsparedentscoreoftheIFN+ACV+VitCgrouphadremarkabledifference.Thecurativetime：theIFN+ACV+VitCgroupentofcorneadiseaseofIFNbinedinCentofIFNbinedeitC；herpessimplexvirus；keratitis单纯疱疹病毒性角膜炎（h

4、erpessimplexkeratitis，HSK）是常见的危害视力的病毒性眼病，在角膜盲中居首位，多发于青壮年，男女之比为1.5～2∶1。其特点是多类型、易复发，发病机制与免疫状态有关［1］。目前我国每年约进行角膜移植3000例（眼），其中HSK所致的角膜盲占首位［2］。本文利用HSV-1接种兔角膜建立HSK动物模型，研究干扰素（滴宁眼液）联合无环鸟苷、维生素C治疗HSK的疗效，以求找出治疗HSK有效的药物及方法。1材料与方法1.1材料1.1.1动物24只健康新西兰白兔，体重1.75~2.25kg，雌雄不限，双眼无结膜炎、角膜

5、炎等眼部疾病。1.1.2药品干扰素（IFN，滴宁眼液）：长春长生基因药业股份有限公司生产。无环鸟苷眼液（ACV）：湖北潜江制药股份有限公司生产。维生素C针剂（VitC）：山东新华制药股份有限公司生产。1.1.3细胞和病毒Hep-2细胞：为人喉癌细胞；HSV-1病毒：为HSV-1Sm44株，在Hep-2细胞上增殖，TCID50/ml（病毒毒力参数）=1.0×106，由山东省医学科学院基础研究所微生物室提供。1.2方法1.2.1制作HSK动物模型于接种病毒前2天给实验兔双眼滴加0.25％氯霉素眼液，每次1滴，每日3次。手术前24只兔

6、双眼分别用1%盐酸丁卡因滴眼液滴眼，3min后再滴1次，以麻醉兔眼。用4.5号针头作兔角膜上皮层井字划痕，长度5~6mm，深度约0.5mm，吸取HSV-1毒株原液30μl滴入结膜囊，被动闭合兔眼，轻揉20s。接种病毒24~48h后，将兔眼用荧光素染色，在裂隙灯下观察角膜感染情况，当兔角膜出现树枝状或地图状病灶时，说明病毒感染成功，动物模型制成。1.2.2动物分组及治疗方法24只兔感染成功后随机分为4组，每组各6只：（1）种毒对照组：不用任何药物治疗。（2）无环鸟苷组：给予无环鸟苷眼液治疗。方法：每2h滴眼1次，每次1滴，每天5次

7、。（3）干扰素组：给予干扰素（滴宁眼液）点眼，方法同ACV组。（4）联合治疗组：给予干扰素（滴宁眼液）和无环鸟苷眼液交替点眼，给药方法同ACV组，2种眼药水点眼每次间隔10min。每周每只兔球结膜下注射VitC30mg1次（每眼每次15mg），共2次。1.2.3裂隙灯显微镜观察每日用荧光素染色后，在裂隙灯下观察兔角膜上皮、基质及前房病变程度，并进行评分。角膜上皮病变评分标准采用Trousdale记分法［3］。Trousdale计分法是国际通用标准方法，以1/4为间隔，即上皮病变面积占整个角膜面积的25%，即累计1分［4］。其他评

8、价参数包括：眼睑、结膜、虹膜和房水，其中以角膜上皮病变分值（cornealepithelialinvolvementscore，CEiS）为主要指标。1.2.4病理切片制作于接种病毒后第10天分别从4组兔中随机各取一只兔角膜，经4%中性甲醛固定液固定、石蜡包埋后