彩超在小鼠原位肝癌移植模型中的应用研究

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1、彩超在小鼠原位肝癌移植模型中的应用研究[彩超在小鼠原位肝癌移植模型中的应用研究]摘要：目的：研究应用彩超评价小鼠原位肝癌移植造模成功的可行性，彩超在小鼠原位肝癌移植模型中的应用研究。方法：建立小鼠肝癌原位移植模型，应用彩超方法观察(3、5、9、16d)不同造模时间小鼠肝癌原位移植造模情况，同时与解剖观察肿瘤比较；并取其肿瘤作病理组织学检查。结果：彩超在模型建立中后期9d组肿瘤的检测结果与解剖观察情况相近，肿瘤检出率可达90％。结论：彩超检测方法是一种无创诊断，可用于小鼠原位肝癌模型的实时评价，为建立小鼠原位移植肝癌模型的判定提供科学依据...关键词：彩超；

2、小鼠原位肝癌；模型目前，肝癌治疗措施强调实行综合治疗，即通过西医、中医及其他有效的手段和方法相结合的综合治疗。中医药在防治肝癌发生，减少复发，减轻放、化疗的毒副作用，提高生存质量，延长生存期等方面有独特的优势，随着医药科技的发展，中医药治疗肝癌的临床疗效不断提高，并且也从多方面展开药物作用机理的研究。本文开展应用现代临床医疗的彩超技术评价小鼠肝癌原位移植模型，试图为中医药临床防治肝癌药物的药效实验研究提供研究手段及其新的评价方法。本研究也是国家自然基金项目中药复方靶向给药系统研究的一部分.材料与方法1．实验材料小鼠H22肝癌瘤株：中国协和药物所提供；清洁级

3、ICR／b鼠，雄性，6—8周龄，体质量18—229：由吉林大学实验动物中心提供，动物合格证号10—1023；B一1360超净1=作台Jouan公司；KX一41倒置生物旺微镜，日本OLYMPUS生产；IU22彩超机，Phllips公司.2．实验方法2．1小鼠原位肝癌模型的建立及分组取腹腔接种H22肝癌细胞株后7d的昆明种小鼠。无菌抽取H22肝癌细胞株腹水，生理盐水洗涤，离一31000r／rain，5min弃上清，台盼蓝染色计数，生理盐水调整癌细胞数至1×108／ml备用。健康昆明种小鼠，戊巴比妥钠腹腔注射麻醉，小鼠仰卧固定，备皮，常规消毒铺巾，于上腹正中剑突

4、下作一约Icm的切口。轻压双侧肋弓以挤出部分肝叶，湿纱布垫于肝叶下方以保护’然后用0．25ml医用注射器针头沿肝叶长轴方向插人缓慢注入H22肝癌细胞悬液0．03ml(细胞数为3×106)。在拔出针头的同时，迅速用棉签轻压lmin止血，然后在针眼周嗣用酒精棉球轻搽，社会文化论文《彩超在小鼠原位肝癌移植模型中的应用研究》(..)。小心地将肝脏网纳入腹腔，缝合切口，术毕【lI。术后正常饮水、进食。术后将造模动物随机4组，即模型3d组，模型5d组，模型9d组，模型16d组，另设正常对照组。正常组动物同样手术方法给予生理盐水造模.2．2彩超对小鼠肝癌造模的检测实验动

5、物分4次进行B超检测，每次取5只正常组进行对照，分别于造模第3、5、9、16H将正常对照组和模型组小鼠腹部剪毛处理，用彩超仪对小鼠肝脏进行扫描，选择最适宜条件。彩超检测条件：深度：2．0，增益指数74％，探头频率7．5—12MHz。随后，脱椎处死小鼠，开腹用游标卡尺测量肿瘤大小，并与彩超结果进行对照.2．3病理形态学观察剥离肝脏及其肿瘤，10％甲醛固定，常规石蜡包埋，切片，HE染色，在光学显微镜下进行组织学检查.结果1．彩超检测与解剖肉眼观察结果正常组小鼠肝脏彩超检测结果表明：超声显示弱回声，无结节；正常小鼠解剖肝脏表明：肝脏无结节。模型组小鼠肝脏超声与解

6、剖检测结果表明：小鼠原位移植肝癌存在高回声、等回声、低回声3种类型，其中以高回声多见并较易发现和测量。当肿瘤生长3d时，有50％／b鼠生长出平均0．2cm×0．14cm大小的结节，此ft,寸B超显示10只小鼠均无结节；当造模第5天时，有lOO％／Jx鼠长出平均o．57cmx0．43em大小不等的结节或肿块，并有1只呈弥漫性生长，彩超仅检查出一只实际大小在0．29emx0．29em的肿瘤，检出率占总数的10％；当造模第9天时，有100％／1"鼠长出平均0．89cmx0．43era，彩超的检出率可达90％；至第16天时，有100％d、鼠长出0．89emx0．

7、66em的肿瘤并且小鼠多伴有腹水，此时彩超的检出率仍为90％。结果见表l、图l.表1彩超与解剖观察不问时间小鼠原位移植肝癌情况∞=10)彩超检查解剖观察造模天数丽面天万可忑夏二了蕊丽看夭不ii忑i再再薄2．病理学检测结果正常组小鼠肝d,nf清晰，肝细胞索、肝窦排列整齐，汇管区结构清楚；肝癌模型组肿瘤细胞生长旺盛，较为弥散，细胞核体积较大，深染，多呈圆形或椭圆形，胞浆丰富略嗜碱性，有的胞浆呈空泡状，可见病理性核分裂与瘤巨细胞，见图1.讨论目前，建立小鼠肝癌动物模型方法主要有皮下移植和肝癌的原位移植，而肝癌的原位移植能够更好地模仿人肝癌体内的血供和生长环境，提

8、供与肝癌病人相似的肝癌生物学特性，更好地反映抗癌药物的药效学指标。