蜈蚣醇提取物和水提取物部分药理作用比较论文

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1、蜈蚣醇提取物和水提取物部分药理作用比较论文【摘要】目的比较鲜品少棘蜈蚣的醇提物及水提物在体外抑菌和抗惊厥两方面的作用。方法采用平板空穴扩散法，以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌黑色变种芽孢、白色念珠球菌、黑曲霉菌5种常见菌为供试菌，对蜈蚣醇提物及水提物的抑菌活性进行研究；采用硝酸士的宁致痫模型，观察蜈蚣醇提物及水提物对小鼠抗惊率、死亡率及惊厥潜伏期的影响。结果蜈蚣醇提物水提物对各供试菌均有抑制作用，醇提物抑菌效果明显强于水提物。蜈蚣水提物能够明显提高抗惊率，降低死亡率，延长小鼠惊厥潜伏期，潜伏期达到(372±146.9)s.freel

2、a公司生产；安定片，每片1mg，北京益民药业有限公司生产，批号：国药准字H11020891。细菌：大肠杆菌（Escherichiacoli）、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、枯草杆菌黑色变种芽孢（Bacillussubtilisvar.nigerspore）；真菌：白色念珠球菌(Candidaalbicans)、黑曲霉菌（Aspergillusniger）。各菌株均由北京化工大学生命科学与技术学院相关实验室鉴定提供。培养基：细菌采用牛肉膏蛋白胨培养基（牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂15～20g，水

3、1000ml，pH7.0～7.2）；真菌采用含糖琼脂培养基（葡萄糖20g，牛肉膏3g，蛋白胨10g，氯化钠5g，琼脂15～20g，水1000ml）。1.2方法1.2.1药液制备醇提物：取冷冻鲜品少棘蜈蚣加入一定量去离子水（料液比1∶10）进行匀浆，离心，取上清液，冷冻干燥得冻干粉。取该冻干粉若干克加入40倍60%乙醇回流提取两次，第1次1.5h，第2次1h，合并两次提取液抽滤，滤液旋转蒸发浓缩后冷冻干燥得蜈蚣醇提物，置冰箱保存备用。水提物：取新鲜冷冻少棘蜈蚣加入一定量去离子水（料液比1∶10）进行匀浆，离心，取上清液水煎煮两次，第1次2

4、h，第2次1h，合并两次煎液抽滤，真空减压蒸馏至少量，冷冻干燥得水提物，置冰箱保存备用。1.2.2菌悬液制备挑取活化好的菌种接入液体培养基中，180r/min，细菌在37℃恒温摇床培养6～8h，真菌在28℃恒温摇床培养18～20h，培养后作为原菌液，用灭菌的生理盐水稀释至106～108个/ml，备用。1.2.3体外抑菌实验采用平板空穴扩散法测抑菌活性。于直径9cm灭菌培养皿中加入菌液0.1ml,每种菌加入一个平皿,然后注入已溶化冷却至45～50℃的培养基20ml,立即轻晃混匀,待琼脂凝固后,用自制打孔器在培养基上等距离打6个直径5mm的

5、孔。用微量加样器吸取不同浓度（采用2倍稀释法用无菌水分别稀释成浓度为500，250，125mg/ml）的蜈蚣醇提物或水提物50μl加入各孔内。平板中央打一孔，加入无菌水做空白对照。以上操作均在无菌条件下进行。细菌置37℃培养箱倒置培养24h，真菌置28℃培养箱倒置培养48h。量取抑菌圈直径(抑菌圈直径以mm计),实验重复2次,以2次平均值为抑菌圈直径。1.2.4抗惊厥实验取健康ICR小鼠40只，18～22g，雄性，随机分为4组：空白对照组、安定组、醇提物组、水提物组。对照组给予去离子水，醇提物组和水提物组剂量均为8g/kg，安定组为1.

6、5mg/kg，均灌胃给药，灌胃容量0.1ml/10g，1次/d，连续7d。于末次灌胃给药60min后，腹腔注射硝酸士的宁1.5mg/kg，以小鼠发生强直性惊厥为指标记录各组小鼠惊厥数和死亡数以及惊厥潜伏期（600s内不惊厥按600s计）。所得数据用SPSS统计软件处理，采用t检验，结果以±s表示。2结果与分析2.1体外抑菌实验结果蜈蚣醇提物的抑菌作用如表1所示，结果表明蜈蚣醇提物对各供试菌均有不同的抑制作用。蜈蚣醇提物对细菌的抑制作用较强如对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌黑色变种芽孢均表现出较好的抑菌作用。当浓度为125mg/ml时

7、，枯草杆菌黑色变种芽孢抑菌圈直径已达到11mm。随着浓度增高抑菌圈直径增大，浓度为500mg/ml时大肠杆菌最大抑菌圈直径达到16mm。醇提物对真菌作用较弱，如白色念珠球菌在125mg/ml时没有抑菌圈；黑曲霉效果更弱，当浓度250mg/ml时仍没有抑菌圈且随着培养时间延长还有促菌生长的现象。表1蜈蚣醇提物抑菌作用mm蜈蚣水提物的抑菌作用如表2所示，结果显示蜈蚣水提物对各供试菌的抑制作用普遍低于醇提物。与醇提物类似蜈蚣水提物对细菌的作用强于真菌。对金黄色葡萄球菌当药液浓度为125mg/ml时，抑菌圈直径仍能达到12mm。表2蜈蚣水提物抑

8、菌作用mm由于蜈蚣体内含有大量的蛋白质、氨基酸以及脂类、微量元素等［11］，提取方法不同，提取物中所含活性成分也不一样，所以产生不同的抑菌效果。2.2抗惊厥作用提取物对小鼠抗惊率、死亡率及惊厥潜伏期的影响如