大孔吸附树脂分离紫萍中总黄酮的工艺研究论文

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1、大孔吸附树脂分离紫萍中总黄酮的工艺研究论文【摘要】目的探讨大孔吸附树脂法纯化紫萍总黄酮的工艺。方法将AB-8，HPD-450和HPD-6003种大孔吸附树脂对紫萍总黄酮的吸附效果进行了比较，并对AB-8的吸附特性进行了研究。结果AB-8，HPD-450和HPD-600对紫萍总黄酮的吸附量分别为：80.04，82.26和75.96mg/g，解吸率分别为90.47%，80.88%和75.84%。AB-8纯化紫萍总黄酮的工艺条件为：上柱样品pH值为5～6，以1BV/h的速度流过树脂.freelSpirodelapol

2、yrrhiza(L.)Schleid.MethodsTheabsorptionquantityanddesorptionrateofthreekindsofmacroporousabsorptionresins(AB-8,HPD-450,HPD-600)acroporousabsorptionresinsg/g,andthedesorptionrateizedconditionsofAB-8isolatingtotalflavonoidse.ConclusionAB-8mostfittedfortheisola

3、tionoftotalflavonoidsinthreetestedresins.Keyacroporousadsorptionresin）是一类人工合成的、具有多孔网状结构和表面活性的高分子材料。同其它的吸附剂相比，大孔吸附树脂具有物理化学稳定性高、吸附选择性独特、再生简单、使用寿命长、溶剂消耗少、操作简便、安全等优点。目前，大孔吸附树脂已经广泛地应用在食品、化工、环保、医药工业和临床鉴定等领域。利用大孔吸附树脂进行分离和纯化中草药中的有效成分，已经越来越受到人们的重视。自20世纪90年代以来，大孔吸附树脂被

4、用于黄酮类化合物、皂苷类、生物碱类等成分的分离［1］。本试验拟选用3种国产大孔吸附树脂，较为系统的对紫萍总黄酮的吸附量、解吸率及影响因素进行研究，以期为紫萍总黄酮的精制选择适宜的大孔吸附树脂，并为其工业化生产提供基本的工艺参数。1器材1.1材料上柱样品：紫萍全草购自沙坪大药房。用1∶10料液比的60%乙醇溶液于60℃下提取2h，重复2次，合并提取液，减压浓缩。浓缩液再用粘度为30Pas的壳聚糖溶液于60℃，pH5.5的条件下絮凝除去浓缩液中的大部分蛋白质，过滤后得到上柱样品。大孔吸附树脂，AB-8型大孔吸附树脂

5、购自南开化工厂；HPD-450型和HPD-600型大孔吸附树脂购自河北沧州宝恩化工有限公司。基本物理性质见表1。表1实验用吸附树脂的基本性质（略）1.2仪器旋转蒸发器RE-52型（上海青蒲沪西仪器厂）；紫外可见分光光度计756MC型（上精密仪器有限公司）。1.3试剂无水乙醇、氢氧化钠、亚硝酸钠、硝酸铝等试剂均为分析纯。2方法2.1大孔树脂对紫萍总黄酮吸附量的测定准确称取经预处理的干树脂各1.0g，置于具塞磨口三角瓶中，精确加入上柱样品20ml，密封后置于振荡培养箱(28℃，100次/min)中振荡24h。充分吸

6、附后，过滤，测定滤液中总黄酮的浓度，按下面的公式计算对总黄酮的吸附量（mg/g）。Q=（Co-Cr）Vg/g）；Co：上柱液初始黄酮浓度（mg/ml）；Cr：滤液中黄酮浓度（mg/ml）；V：加入上柱液体积（ml）；l95%的乙醇溶液，密封后置于振荡培养箱(28℃，100次/min)中振荡24h，使总黄酮解吸附，过滤得滤液，测定滤液中总黄酮的含量，按照下面的公式计算总黄酮的解吸率。D=CVQg/ml）；V：所加乙醇的体积（ml）；Q：树脂吸附黄酮的量（mg/g）；g/ml，上柱液以1BV/h(树脂床体积，Bed

7、volume，BV)速度通过树脂柱床，共处理6BV上柱样品，每处理1BV料液的流出液单独收集，测定其中总黄酮的浓度。2.4解吸实验将上柱液以1BV/h的流速流过AB-8吸附树脂，使树脂充分吸附平衡。先用4BV的蒸馏水以2BV/h流速淋洗，然后分别采用30%，50%，70%和90%浓度的乙醇以1BV/h流速进行解吸。实验时连续不断地注入乙醇解析液，每0.5BV流出液收集，测定流出液中总黄酮的含量。2.5黄酮含量的检测准确称取木犀草素0.1g，用30%乙醇溶解，并完全转入500ml容量瓶中，用30%乙醇定容。分别取

8、上述木犀草素标准溶液1，2，3，4，5，6ml，置于6只25ml容量瓶中，用30%乙醇补充至6ml，加入0.75mlNaNO2溶液后摇匀，静置5min。再向其中加入0.75ml的Al(NO3)3溶液后摇匀，静置6min。最后加入1mol/L的NaOH溶液5ml，并30%的乙醇定容至刻度，摇匀后静置10min。于510nm下，以未加显色剂的待测液为空白，用分光光度计测定其吸光度。以测得的