中药猫爪草多糖的免疫活性研究论文

《中药猫爪草多糖的免疫活性研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、中药猫爪草多糖的免疫活性研究论文.freelmunefunction.MethodsTheIS.modelinKunmingmiceude,andthephagoctosisofperitonealmacrophage,theformuationofhemoloysinandthenumberofT-lymphocytesinpenpheralbloodRadixRanunculiTernaticouldelevatethepercentandtheindexofphagocytosis,enhancetheformationoftheh

2、emolysinobviously,andincreasethenumberofT-lymphocytesinperipheralblood.ConclusionThepolysaccharideofRadixRanunculiTernaticanstimulatetheimmunologicfunctionofnormalandIS.Kunmingmice.Keyination;Immunityfunction;Cyclophosphamide猫爪草为毛莨科植物小毛莨RanunculusternatusThunb.的干燥块根。猫爪草性平

3、，味甘、辛，性温.freelg×5瓶）；生理盐水（郑州化学药业有限公司，批号010409，规格500ml/瓶）；瑞氏色素（上海试剂三厂，批号99030）；其余试剂药品均为分析纯。1.3仪器BS210S电子天平（北京赛多利斯天平有限公司，max210g,d0.1mg）；KQ-500DV型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；TDL-40B型低速台式大容量离心机（上海安亭科学仪器厂）；SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵（巩义市英峪予华仪器厂）；数码生物显微摄影系统（上海彼爱姆光学仪器制造有限公司）；DHG-9076A电热恒温鼓风干燥箱（上海

4、精宏实验设备有限公司）；载玻片（盐城市丽帆玻璃有限公司）。1.4动物ICR小鼠，雌雄各半，18~20g；鸡红细胞和豚鼠血清（郑州大学医学院动物实验中心）。1.5猫爪草多糖的提取及试液配制1.5.1猫爪草多糖的提取［6］本实验室综合相关文献并结合预实验自行提取。1.5.2Hank’s应用液的配制取Hank’s原液1份加双蒸水9份混合分装，69.75kPa(10P/cm2)20min高压灭菌，4℃冰箱备用。1.5.3孵育液（酯酶染色液）的配制取1/15mol/LpH7.6的磷酸缓冲液89ml缓缓加入六偶氮副品红6ml，充分混匀后，再慢慢滴加2

5、%α醋酸萘酯溶液2.5ml，充分混匀，最后呈琥珀色混浊样液，调节pH到6.4。2方法［7~9］2.1猫爪草多糖对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响取小鼠按体重随机分为：①空白组，②CTX模型组，③治疗组，④多糖100mgkg-1。按0.2mlkg-1灌胃给药，1次/d，连续7d，空白组给等量生理盐水。除空白组、多糖组外，均ipCTX40mgkg-1制备免疫低下模型。第7天每鼠腹腔注射5%的鸡红细胞生理盐水混悬液（0.2ml/10g），于注射鸡红细胞6h和最后1次灌胃2h后，脱颈椎处死小鼠，用酒精棉球消毒腹部皮肤，腹腔注射Hank’s液2.5m

6、l，轻揉小鼠腹部，在腹膜上剪一小孔，吸出腹腔液后滴少许在载玻片上并推片，稍干后瑞氏染液染色，自来水冲洗，晾干，显微镜下观察。见图3。计算小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞吞噬百分率和吞噬指数［10，11］，其中吞噬百分率=（吞噬鸡红细胞的吞噬细胞数/100个巨噬细胞）×100%；吞噬指数=100个巨噬细胞所吞噬的鸡红细胞数/100。结果见图1及表1。图1小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬的显微图（略）表1猫爪草多糖对正常及免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响（略）与对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05；n=10上述结果说明，猫

7、爪草多糖可明显提高正常小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数，并能拮抗环磷酰胺所致的免疫抑制作用。2.2猫爪草多糖对正常及免疫抑制小鼠溶血素形成的影响取小鼠按上述方法分组，各组均于第1天每鼠腹腔注射5%的鸡红细胞、生理盐水混悬液0.2ml进行免疫，于第7天给药后2h，小鼠眼眶取血，离心取血清，用生理盐水1∶100稀释后，取1ml与5%的鸡红细胞混悬液0.5ml，10%补体0.5ml混匀，另设不加血清的对照管，将混悬液充分混匀，在37℃恒温箱中温育30min，在冰水中中止反应，离心，取上清液于540nm处比色，以空白管调“0”点，测各管的吸收

8、度［10，11］。结果见表2。表2猫爪草多糖对正常及免疫抑制小鼠溶血素形成的影响（略）与对照组比较，*P＜0.05；与模型组比较，△P＜0.05；n=10猫爪草多糖能提高正常小鼠血清溶血素的含