电针对慢性应激模型大鼠肠道神经系统的影响论文

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1、电针对慢性应激模型大鼠肠道神经系统的影响论文.freelin，束缚3h，10℃冷水游泳5min，电击足底（电压为30V，电击5s，间歇5s，共进行300s），每种刺激3次，共21d。1.2方法1.2.1电针方法参照大鼠选穴图谱，选取天枢、百会和印堂穴。使用HANSLH202型电针仪，电针频率为2Hz，电流强度1-3mA，每次30min，每日9.00Am1次。电针组造模同时给予治疗，共21d。1.2.2iNOS和NO的测定实验完成后，快速断头处死大鼠，打开腹腔，取适量结肠组织，在冰冷的生理盐水中漂

2、洗，除去血液，快速滤纸吸干，称重，用生理盐水作为匀浆介质制备成10%的组织匀浆，低温离心机3000r.min离心15min，取上清，iNOS和NO的检测按照相应的试剂盒说明书进行。COX-2表达的检测:在距肛门约7cm处取结肠组织1cm，用体积分数10%的福尔马林溶液固定，固定好的标本，常规石蜡包埋切片，采用免疫组化SP法检测COX-2的表达。操作按照试剂盒说明进行，一抗工作浓度为1:80，DAB染色，苏木素套染，以PBS代替一抗作阴性对照，以细胞核蓝色为阴性，胞浆内或核膜上呈棕黄色为阳性。每张

3、切片选取5个400倍视野，采用IPP全自动图像分析软件，Olymps摄像系统测定阳性反应物灰度值并照片。1.3统计学处理方法实验数据以ˉx±s表示。用单因素方差分析，继以Dun双侧检验进行统计处理，分析组间差异，以P0.05作为差异显著性标准。【摘要】目的:探讨电针改善抑郁症引起的消化功能障碍的机制。方法:将30只SpragueDain，束缚3h，10℃冷水游泳5min，电击足底（电压为30V，电击5s，间歇5s，共进行300s），每种刺激3次，共21d。1.2方法1.2.1电针方法参照大鼠选穴

4、图谱，选取天枢、百会和印堂穴。使用HANSLH202型电针仪，电针频率为2Hz，电流强度1-3mA，每次30min，每日9.00Am1次。电针组造模同时给予治疗，共21d。1.2.2iNOS和NO的测定实验完成后，快速断头处死大鼠，打开腹腔，取适量结肠组织，在冰冷的生理盐水中漂洗，除去血液，快速滤纸吸干，称重，用生理盐水作为匀浆介质制备成10%的组织匀浆，低温离心机3000r.min离心15min，取上清，iNOS和NO的检测按照相应的试剂盒说明书进行。COX-2表达的检测:在距肛门约7cm处取

5、结肠组织1cm，用体积分数10%的福尔马林溶液固定，固定好的标本，常规石蜡包埋切片，采用免疫组化SP法检测COX-2的表达。操作按照试剂盒说明进行，一抗工作浓度为1:80，DAB染色，苏木素套染，以PBS代替一抗作阴性对照，以细胞核蓝色为阴性，胞浆内或核膜上呈棕黄色为阳性。每张切片选取5个400倍视野，采用IPP全自动图像分析软件，Olymps摄像系统测定阳性反应物灰度值并照片。1.3统计学处理方法实验数据以ˉx±s表示。用单因素方差分析，继以Dun双侧检验进行统计处理，分析组间差异，以P0.0

6、5作为差异显著性标准。2结果电针对大鼠结肠iNOS和NO的含量及COX-2的表达水平的影响:接受慢性应激刺激后，模型组大鼠结肠组织iNOS和NO含量及COX-2的表达均显著升高和上调，模型组与正常组比较有显著差异（P0.01）;电针干预后，结肠组织iNOS和NO含量及COX-2的表达明显下降（P0.01）。结果见表1。表1大鼠结肠组织iNOS和NO的含量及COX-2的表达注:*与模型组比较P0.01;U为每毫克组织蛋白每分钟生成1nmolNO为一个酶活力单位3讨论消化功能障碍作为诊断抑郁症的症状

7、标准之一，临床上已引起重视。本研究以电针对肠道神经系统神经递质的影响为切入点来探讨电针对抑郁状态下消化功能的调节途径和机理，希望能为临床治疗抑郁症引入一种有效、无毒副作用的治疗手段。胃肠道有一个独立的神经结构———肠道神经系统（ENS），ENS具有分泌、感觉神经元、中间神经元及支配胃肠效应器的运动神经元，在没有外来神经支配时，仍能进行完整的神经反射，故称之为“肠脑”。ENS还参与消化系统中免疫反应和炎症过程的调节［3］。NO在机体内既有保护作用，又有杀伤毒性与促炎作用，这二者并不矛盾，而是体现出

8、NO作用的时间和剂量的依赖性。iNOS为Ca2+非依赖型NO合成酶，在其基因被诱导因子诱导后大量表达，继而能合成大量的NO。NO是ENS中独立于交感、副交感神经的一种神经递质，NO在基础状态下对胃粘膜具有保护作用，一旦NO生成与释放受到抑制，则可以造成血管收缩，血流减少，粘膜损伤。但如果因iNOS诱导激活而产生大量的NO，则又发挥细胞毒性作用，在杀伤微生物和肿瘤细胞的同时，造成自身正常组织的损伤，引起炎症复发或持续存在。其机理是高浓度NO抑制多种与线粒体电荷传递系统、柠檬酸循环有关的酶及DNA复