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时间:2018-11-20
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1、第十四章基因重组与基因工程内容提要:细菌的基因转移包括接合作用、转化作用、转导作用等。当细胞与细胞或细菌通过菌毛相互接触时,质粒DNA从一个细胞转移至另一个细胞,这种类型的DNA转移称为接合作用。通过自动获取或人为的供给外源DNA,使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型,这就是转化作用。由病毒携带将宿主DNA片段从一个细胞转移至另一细胞的现象或机制,称为转导作用。在接合、转化、转导或转座过程中,不同DNA分子间发生的共价连接即为重组。重组DNA技术是在人们对自然界基因转移和重组的认识基础上创立的新技术。为研究基因的结构与功能,从构建的基因组DNA文库或cDNA文库分离、扩增某一感兴趣
2、的基因就是基因克隆或分子克隆,又称重组DNA技术。一个完整的基因克隆过程应包括:1.分,即目的基因的获取及基因载体的选择。目的基因指科学家感兴趣的外源基因,其来源有几种途径:化学合成、PCR技术、基因组文库或cDNA文库中获得。载体是目的基因的携带者,常用的载体有质粒、噬菌体等。2.切,即限制性核酸内切酶的应用。限制性内切酶是识别DNA的特异序列,并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶,是实现重组DNA技术的重要的工具酶。3.接,即将目的基因与载体连接形成重组体(或重组DNA)。4.转,即将重组体导入宿主菌(或细胞),根据采用的载体性质不同,将重组体导入宿主菌的方法有转化、转
3、染及感染。5.筛,即重组体的筛选与鉴定,将重组体导入宿主菌后,通过适当形式的培养板生长即可获得一定的抗药菌落。利用原位杂交,和Southern印迹或免疫学方法对抗药菌落进行筛选,获得含目的基因的转化子菌落,再经扩增、分离重组DNA获得基因克隆。重组DNA技术在疾病基因的发现,表达有药用价值的蛋白质,DNA诊断及疾病的预防等方面具有广泛应用价值,并促进了当代分子医学的诞生和发展。一、选择题【A型题】1.下列DNA序列属于回文结构的是()A.ATGCCGTACGGCB.GAATTCCTTAAGC.GGCCGGCCGGCCD.TCTGACAGACTGE.CTAGGGGATCCC2.DNA经
4、限制性内切核酸酶切割后,断端易于首尾相接,自行成环。这是因为存在着()A.钝性末端B.平端C.粘性末端D.5’端E.3’端3.限制性内切核酸酶的通常识别序列是()A.粘性末端B.聚腺苷酸C.回文对称序列D.RNA聚合酶附着点E.甲基化“帽”结构4.pBR322是()A.经人工改造的大肠杆菌质粒B.天然的大肠杆菌质粒C.天然的酵母质粒D.经人工改造的大肠杆菌噬菌体E.经人工改造的酵母质粒5.免疫球蛋白的生成是通过以下哪个过程()A.转化B.转导C.转染D.转位E.溶原6.常用载体-质粒的特点()A.是线形双链DNAB.插入片断的容纳量比λ噬菌体DNA大C.含有抗药性基因D.含有同一限制
5、性内切核酸酶的多个切口E.不随细菌繁殖而进行自我复制7.基因工程的操作程序可概括为()A.切、转、接、筛、分B.转、接、筛、分、切C.接、筛、分、切、转D.筛、分、切、转、接E.分、切、接、转、筛8.cDNA文库指()A.一个生物组织和细胞的全部基因信息B.一个生物组织和细胞的全部mRNA信息C.一个生物组织和细胞所表达的mRNA信息D.一个物种的全部mRNA信息E.一个物种的全部基因信息9.限制性内切核酸酶()A.可将单链DNA任意切断B.由噬菌体提取而得C.可将双链DNA序列特异地切开D.可将两个DNA分子连接起来E.不受DNA甲基化影响10.在重组DNA技术中,不常用的酶是()
6、A.限制性内切核酸酶B.DNA聚合酶C.DNA连接酶D.反转录酶E.DNA解链酶11.可作为重组DNA的目的基因的是()A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.基因组DNAE.mRNA和基因组DNA12.以质粒为载体,将外源基因导入受体菌的过程称()A.转化B.转染C.感染D.转导E.转移13.最常用的筛选转化细菌是否含质粒的方法是()A.营养互补筛选B.抗药性筛选C.免疫学方法D.PCR筛选E.分子杂交筛选14.α-互补筛选法属于()A.抗药性标志筛选B.酶免检测分析C.标志补救筛选D.原位杂交筛选E.免疫学方法15.F因子从一个细胞转移至另一个细胞的基因转移过程称为()A.转化B
7、.转导C.转染D.转座E.接合16.由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为()A.转化B.转导C.转染D.转座E.接合17.发生在同源序列间的重组称为()A.位点特异的重组B.非位点特异的重组C.基本重组D.随机重组E.人工重组18.在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的是DNA()A.聚合酶B.解链酶C.连接酶D.拓扑酶E.内切酶19.在重组DNA技术领域所说的分子克隆是指()A.建立单克隆抗体B.建立多克隆抗体C.构建重组DNA分子D.无性繁殖
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