芍药甘草汤对哮喘大鼠模型血清ige及ifn-γ、il-4水平影响的实验研究

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1、芍药甘草汤系张仲景《伤寒论》中的著名方剂。主要由芍药和甘草二味中药等量组成。现代药理研究证实芍药甘草汤具有明显的解痉、镇痛、抗炎等多种作用而被广泛用于临床。尤其是近十几年来，单用此方或随症加减治疗哮喘、顽咳和小儿百日咳疗效十分显著。日本汉方界将其用于治疗各种喘息症状也有明显效果。但和临床研究相反，对芍药甘草镇咳平喘作用的实验研究，国内外报道甚少，只有对单味芍药或甘草的类似研究。由于芍药甘草汤并不是芍药和甘草二味药的作用的简单相加，有实验证明，本方与单味药的药理作用不同，因此有必要对芍药甘草汤的镇咳平喘和抗炎作用及其机理作进一步的研究，以阐明本方对呼吸系统疾病的治疗效果和应用前景。我们前

2、期动物实验研究表明：芍药甘草汤能明显延长小鼠氨水引咳潜伏期；能明显延长由组胺喷雾和OVA致敏所致豚鼠哮喘的引喘潜伏期，具备良好的平喘作用；能显著抑制大鼠颅骨骨膜肥大细胞脱颗粒，具有较好的抗过敏作用；有较好的抗炎作用；能够有效地改善哮喘患者咳嗽、咯痰、气急等症状，显著地增加肺的通气功能，有效地提高FVC和FEV1等指标。以上结论说明芍药甘草汤芍药甘草汤具有较好的止咳祛痰、平喘、抗过敏、抗炎作用，对支气管哮喘有一定的疗效。我们在此基础上进行实验研究，建立大鼠哮喘动物模型，观察芍药甘草汤对大鼠支气管肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞和白细胞数量的情况，以及对大鼠体内IgE及炎性因子IL-4、IFN-γ

3、水平的影响，研究在芍药甘草汤拮抗哮喘气道炎症方面的作用,探讨其治疗哮喘的可能机制，为临床用药尤其是哮喘慢性持续期中西药合用及降低同级别哮喘糖皮质激素用量提供实验依据，进而为将来控制哮喘的治疗提供一条可能的途径。一、实验材料和方法（一）实验材料与设备1实验材料1.1实验动物雄性清洁级SD大鼠60只，体重200+20g，由浙江中医药大学动物实验中心提供。1.2饲养环境实验动物饲养于浙江中医药大学动物实验中心三级实验动物房内，整个实验过程，大鼠自由摄食（普通专业饲料）、饮水（自来水），在7天的预备饲养后进行实验。1.3主要试剂及实验药物万方数据1.1主要试剂卵白蛋白Sigma公司氢氧化铝干粉

4、广州化学试剂厂地塞米松片浙江仙居只要股份有限公司甲醛中国浙江巨化集团公司试剂厂乙醇广州化学试剂厂IgEELISA试剂盒ADL公司IL-4ELISA试剂盒ADL公司IFN-γELISA试剂盒ADL公司1.2实验药物受试药物：芍药甘草汤（芍药12g、甘草12g），药材由浙江省中医院中药房提供，经水浓煎至1g/ml装保温瓶保存。1.4主要仪器设备Tissne-TekVIP4893全自动脱水机日本樱花公司Tissne-TekTEC4715包埋机日本樱花公司LEICARM2135型切片机德国LEICA公司LEICAHI1210捞片机德国LEICA公司OLYMPUSBX50显微摄像系统日本OLYM

5、PUS公司-20摄氏度低温冰箱西门子公司OHAUSE12140电子天平美国OHAUS公司DL-5-B飞鸽牌离心机上海安亭科学仪器厂（二）实验方法1实验分组将60只SD大鼠随机分为6组：NULL组为正常对照组10只，OVA组为卵蛋白哮喘模型组10只，DXM5组为地塞米松5mg/kg治疗组，DXM2.5组为地塞米松2.5mg/kg治疗组，SG组为芍药甘草汤5g/kg治疗组，SG+DXM2.5组为芍药甘草汤5g/kg+地塞米松2.5mg/kg治疗组。2卵蛋白（OVA）抗原液的配制准确称取鸡卵白蛋白（GradeⅡ，Sigma）1g和氢氧化铝粉2g,用无菌生理盐水稀释至80ml,反复震荡混匀，再

6、加入灭活的百日咳杆菌（6ｘ1010/ml）10ml，再定容至100ml,万方数据既每1ml造模液内含卵白蛋白10mg,氢氧化铝粉20mg,灭火百日咳杆菌5ｘ109个。3大鼠哮喘模型的建立空白组：第1、7、14天分别用生理盐水1ml进行腹腔注射，第21天开始生理盐水超声雾化吸入，每天1次，每次30min,连续3天。至敏组：第1、7、14天分别给予鸡卵白蛋白（OVA）抗原液1ml（含OVA10mg,氢氧化铝凝胶20mg，灭火百日咳杆菌5ｘ109个）腹腔注射，第21天开始用1%OVA溶液雾化吸入，每天1次，每次30min,连续3天。4给药方法NULL组：每次激发前30min给予生理盐水10m

7、l/kg灌胃。OVA组：每次激发前30min给予生理盐水10ml/kg灌胃。DXM5组：每次激发前30min给予DXM5mg/kg灌胃。DXM2.5组：每次激发前30min给予DXM2.5mg/kg灌胃。SG组：每次激发前30min给予芍药甘草汤5g/kg灌胃。SG+DXM2.5组：每次激发前30min给予芍药甘草汤5g/kg+DXM2.5mg/kg灌胃。5标本采集和处理各组均于首次激发后5d处理和收集标本。每组大鼠均予3%戊巴比妥钠腹腔注射麻