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时间:2018-11-20
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1、黄芪药材指纹图谱的研究进展【摘要】黄芪是常用中药,制定科学可靠的质量标准意义重大。文章简要概述了黄芪药材指纹图谱的研究方法为黄芪药材的质量控制提供了依据。【关键词】黄芪指纹图谱黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astraglusmembranaceus(Fisch)Bge.var.mongholicus(Bge.)Hsiao或膜荚黄芪Astragalusmembranaceus(Fisch.)Bge的干燥根。春、秋二季采挖,除去须根及根头,晒干.甘、温,归肺、脾经。具补气固表、利尿托毒、排浓、敛疮生肌的作用。临床用于气虚乏力,食少便溏,中气下陷,久泻脱肛,便血崩漏,表虚自汗,气虚水
2、肿,痈疽难溃,久溃不敛,血虚痿黄,内热消渴;慢性肾炎蛋白尿、糖尿病[1]等症。黄芪为常用中药,每年需求量约600万kg[2]。黄芪的化学成分主要有黄酮类、皂苷类和多糖等[3]。长期以来对黄芪的质量控制,人们仅以黄芪甲苷的含量作为黄芪及其复方制剂的质量标准,传统的方法通常是薄层法,近年来,随着科学技术的飞速发展,高效液相色谱法已越来越广泛的应用于质量控制中。但仅仅测定一个、两个单一成分无法完整表现中药材的全面情况。指纹图谱方法的出现为全面可靠的保证黄芪药材及其制剂的质量提供了可靠保证。所谓中药指纹图谱是指某种(或某产地)中药材或中成药进行适当处理后,采用一定的分析手段得到
3、的、能够标示该中药材或中成药特性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱,它具有特征性和稳定性[4]。利用色谱技术进行指纹图谱分析的中药材,因生长年限、生长环境的变化而可能产生个体间较为明显的差异,但个体间必然有群体共有的相似性[5]。因此,整体性和模糊性是其基本特点。整体性是指比较完整的反应药材的面貌,模糊性强调样品之间的相似程度。近年来对黄芪药材指纹图谱的研究包括色谱法、光谱法以及其他方法。这里以介绍色谱法为主。现介绍如下。 1色谱法 1.1HPLC指纹图谱研究黄际薇等[6] 采用剪碎黄芪药材30.00g,甲醇浸泡过夜,超声提取10min,过滤,回收甲醇至干,残渣加
4、水10ml溶解后,以水饱和的正丁醇提取3次,20ml/次,合并正丁醇提取液、回收至干,甲醇溶解定容至5ml。使用黄芪甲苷做对照品。使用DAD检测器。色谱条件为乙腈∶水(30∶70)二元梯度洗脱;检测波长203nm;分析时间:60min。结果表明不同来源的黄芪药材所含黄芪甲苷等成分均得到很好的分离,找到共有峰13个,其HPLC指纹图谱基本一致,共有峰面积之和均大于各总峰面积的90%,但其共有峰面积的比值有一定差异。胡芳弟等[7]采用称取药材粉末2.5g,用甲醇超声提取3次(30,30,30ml),30min/次,蒸干甲醇,残渣用40ml水溶解,再用正丁醇提取4次(40,4
5、0,20,20ml),分取正丁醇层、回收至干,残渣用甲醇超声溶解,定容至5ml。使用毛蕊异黄酮和芒炳花素做对照品。使用DAD检测器。色谱条件为A相水,B相乙腈;梯度洗脱B相含量在80min内从4%变化至100%;检测波长254nm。结果找到26个共有峰,12批样品相似度符合要求。贾晓斌等[8]取药材粗粉2g,加甲醇50ml,回流提取2次,2h/次,合并甲醇液,回收甲醇,残渣加热水10ml溶解,用等量水饱和正丁醇提取5次,合并正丁醇液,用等量氨试液洗涤1次,弃去氨试液,正丁醇液水浴蒸干,残渣加60%乙腈溶解至5ml,离心,过滤,取滤液1ml,加参照物溶液1ml,既得。使用
6、人参皂苷做对照品。使用VSD指纹图谱研究徐青等[10]分别建立了HPLC/DAD和HPLC/MSD图谱。使用PAD检测器,质谱仪。色谱条件为流动相:甲醇-水-异丙醇;检测波长203nm。液相色谱-质谱联用条件为大气压化学电离(APCI)接口和离子源;气化温度400℃;加热毛细管温度250℃;夹套气压414kPa;辅助气压10AU;质量扫描范围100~1199u;扫描速率l.5S。以梯度洗脱及低波长检测得到的液相色谱图,可应用于不同产地黄芪药材的指纹图谱比较。紫外和质谱两种检测器可对不同特性化台物的检测进行互补,获得相对充分的指纹图谱信息。李翔等(第二军医大学硕士学位论文
7、《黄芪药材色谱指纹图谱的研究》2005)测定了黄芪药材HPLC/MSD指纹图谱。使用ELSD检测器。色谱条件为流动相:A相为乙腈,B相为水,梯度洗脱,A相在75min内由5%变化至85%;柱后分流比8∶2。质谱条件为离子源:大气压电离-电喷雾电离(API-ESI);检测模式:负离子;扫描范围:m/z200~1000;干燥气(N2)流速:9.0L·min-1;雾化气压力:30psi;干燥气温度:350℃;裂解电压:110V;毛细管电压:3500V。黄芪药材HPLC-MS总离子流色谱指纹图谱具有较好的稳定性、精密度和重复性,相对保留时间和相对
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