外源核苷酸对受损小鼠胸腺细胞dna修复的影响

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1、外源核苷酸对受损小鼠胸腺细胞DNA修复的影响【关键词】核苷酸；DNA损伤;,DNA修复；,彗星试验　　EffectofexogenousnucleotidesonrepairofdamagedDNAinmousethymocytes　　【Abstract】AIM:ToinvestigatetheeffectofexogenousnucleotidesontherepairofdamagedDNAinmousethymocytesinvitro.METHODS:ThymocytesfromKunmingmalemic

2、eethylN′nitroNnitrosoguanidine(MNNG,10μmol/L)toinduceDNAdamage.DNAdamagedcellsediumsupplementedmol/L).DNAdamageandrepairedium(P>0.05),butthepercentageofetcellsdecreasedsignificantlyinpletemediumentation(P<0.01).Thenucleotidessupplementationsignificantlyd

3、ecreasedthepercentageofetcellsat5h(P<0.01).ettaillengthhadnosignificantdifferenceamonggroupsat2hinbasicorpletemedium(P>0.05).Nucleotidesof1,10mmol/Ldecreasedettaillengthat5hinbasicmedium(P<0.01).Thesupplementationof1,10mmol/Lnucleotidesdecreasedettail

4、lengthat5hinpletemedium(P<0.01).ThepercentageofDNArepairedcellsentationbetedium(P<0.01).CONCLUSION:ThesupplementationofnucleotidescanacceleratetherepairofdamagedDNAinmousethymocytesinvitro.Theeffectofnucleotidesisrelatedentallevelsofnucleotides.　　【Keyage

5、;DNArepair;etassay　　【摘要】目的：探讨外源核苷酸对受损小鼠胸腺细胞DNA修复的影响.方法：采用10μmol/L的N甲基N硝基N亚硝基胍（MNNG）诱导小鼠胸腺细胞DNA损伤后，在终浓度分别为0，0.1，1和10mmol/L核苷酸的RPMI1640基础培养基或完全培养基中培养，在培养的第2，5h采用单细胞凝胶电泳技术分析细胞DNA损伤和修复情况.结果：培养2h时，基础培养基中各组间的拖尾细胞百分率差异无统计学意义（P>0.05）；完全培养基中核苷酸能降低拖尾率（P<0.01）.5h时，

6、随着核苷酸添加浓度的升高，拖尾率均降低（P<0.01）.在相同的培养基中，各组的彗星尾长在2h差异无统计学意义（P＞0.05），5h后，在基础培养基中添加1，10mmol/L的核苷酸使得彗星尾长降低（P<0.05）；在完全培养基中添加1，10mmol/L的核苷酸也使得彗星尾长降低（P<0.01）.在培养的2～5h内，补充核苷酸均能提高基础培养基（P<0.05）和完全培养基（P<0.01）中DNA修复细胞的百分率.结论：外源核苷酸能明显促进受损小鼠胸腺细胞DNA的修复，且核苷酸的作用与其

7、添加水平有关.　　【关键词】核苷酸；DNA损伤;DNA修复；彗星试验　　0　引言　　核苷酸作为条件必需营养素，在维持和提高机体免疫功能方面发挥重要作用［1］.有研究表明核苷酸（nucleotides,NTS）对免疫细胞DNA具有保护作用，能够减轻毒物、高脂等引起的细胞DNA损伤［2-3］.我们在先前的实验中也观察到核苷酸能够减轻烷化剂对小鼠胸腺细胞DNA的损伤程度［4］，但有关核苷酸对DNA损伤后的修复有无作用的研究报道较少.本试验拟在体外采用烷化剂N甲基N硝基N亚硝基胍（NmethylN′nitroNnitros

8、oguanidine,MNNG）诱导小鼠胸腺细胞DNA损伤，旨在进一步探讨不同浓度的NTS对损伤后细胞DNA修复的影响.　　1　材料和方法　　1.1材料　　健康清洁级昆明种雄性小鼠6只，5周龄，体质量20g（第二军医大学实验动物中心）；MNNG（瑞士Fluka公司）；RPMI1640培养基（美国GIBCO公司）；胎牛血清（中科院上海生化所）；HEPES，谷氨