海水在组织制片过程中的应用研究

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1、海水在组织制片过程中的应用研究【摘要】目的：探讨海水在病理组织制片中应用的可行性、可靠性。方法：应用人体手术切除的正常组织、炎性组织和肿瘤组织标本进行常规石蜡切片，然后用海水漂片、洗片，HE常规染色，光镜学显微镜观察。结果：经海水漂片和洗片的组织切片，着色鲜艳，组织结构清晰，细胞形态完整，与常规方法无明显差异。结论：海水可用于病理组织制片，且操作简单，结果可靠，有重要的军事意义。【关键词】海水组织制片应用研究　　ApplicationResearchofUsingSeaaking　　Abstract:ObjectiveToexplorethefeasibilityandrel

2、iabilityof.MethodsHumennormalinflammatoryandtumortissuesliceicroscope.ResultsThecolorofslicesethodandconventionalmethods.ConclusionApplicationofseaakingpleandthearereliable.Thereisvitalmilitarysingficanee.Keyaking;Appliedresearch现代高科技条件下，多种兵器和多种作战形式综合运用是未来战争的主要特征，一旦发生战争，众多的军民将受到伤害，其致伤因素多变，伤

3、员的伤情伤类复杂，“白金”时间诊断出伤情伤类，是军事病理工作者研究的任务之一。因此，依靠自然、利用自然，探索特殊条件下军事病理技术的制片方法，对提高高科技条件下快速救治伤员、减少伤亡、降低伤残率和后遗畸形、提高部队战斗力具有重要作用。近年来，我们将海水应用到组织制片技术中，并与常规制片方法作对比性研究，取得了令人满意的效果，现将方法介绍如下。　　1材料与方法　　1.1材料　　取于南海离海岸2.5km处的海水，存于4℃～8℃冷室，用时恢复室温，用pH计测定pH值。实验组织：用人体手术切除的正常组织、炎性组织和肿瘤组织标本，经常规处理的石蜡连续切片、冰冻切片和细胞学抹片。试剂：苏木

4、素、伊红染液等。　　1.2实验与方法　　每一蜡块和冰冻组织各切片两张，细胞学抹片两张，一张按常规方法进行染色，作为实验参照；另一张按下列步骤进行操作：石蜡切片在45℃（依石蜡溶点作调整）恒温海水中漂片后烤片8min～10min，经二甲苯脱蜡至95％乙醇；冰冻切片烤片后固定1min～2min；细胞抹片自然干片后固定10min；海水中洗涤；入苏木素染3min；盐酸酒精分化；海水中洗涤；返蓝，入返蓝液数秒或者直接入海水中洗涤15min；95％乙醇洗后入伊红液30s～1min；95％乙醇、无水乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，光学显微镜下观察。　　1.3观察指标　　从细胞形态、细胞质

5、、细胞核、核膜、核仁、染色质、细胞界限、血管及纤维等的着色、清晰情况进行评诂。　　2结果　　2.1冰冻切片组　　正常组织、炎性组织和肿瘤组织的细胞质呈桃红色，细胞核呈蓝紫色，结缔组织呈粉红色，肌肉呈深红色，黏液呈蓝色，血管呈粉红色。着色较鲜艳，组织结构基本清晰，细胞形态较完整，组织中央与边缘其细胞均显示良好的组织形态结构，大部分组织的冰冻切片染色与常规冰冻切片染色比较差异无显著性，某些组织（如：乳腺、淋巴结等）的冰冻切片质量优于常规方法（见图1～图2）。　　2.2细胞学抹片组　　细胞核呈鲜明蓝色，黏液呈灰蓝色，细胞浆呈不同程度粉红色至桃红色，红细胞呈橘红色，与常规方法无差异（见

6、图3～图4）。　　2.3石蜡切片组　　正常组织、炎性组织和肿瘤组织细胞质呈桃红色，细胞核呈蓝紫色，结缔组织呈粉红色，肌肉呈深红色，黏液呈蓝色，血管呈粉红色，细胞界线明显，着色均匀，蓝红相映，胞核鲜明，核膜及核染色质清晰可见，血管、纤维清晰，与常规方法无差异（见图5～图8）。　　3讨论HE(HematoxylinandEosin)染色方法是生物学尤其是医学领域中的组织学、病理学及细胞学工作必不可少的最基本染色方法，广泛应用于基础、临床、科研和军事病理学工作中，具有重要的价值［1］。尽管其原理尚未清楚，化学学说和等电点原理易被人们接受。在HE染色中，其原理简单地说就是具有酸性的细胞

7、核被碱性的苏木素所染色，碱性的胞浆被酸性染料伊红所染色［2］，从这一原理不难看出，染液的pH值对染色作用有着极为密切的重要关系。当染液的pH值过低时，细胞核的着色差；当伊红染液的pH值过高时，胞浆的着色差，因此控制好染液的酸碱度是获得优质染色切片的前提。在染色前和染色后，组织片水洗的目的是为了使切片清洁，提高切片质量，使切片着色均匀，防止不清洁的切片污染染液，保持染液的清洁和纯度，提高染液的使用率［3，4］。我们用海水来洗涤切片，在染色前洗涤是洗去切片中的乙醇，便于组织细胞与染液中的色素结合