川芎提取物的抑菌杀虫作用研究论文

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1、川芎提取物的抑菌杀虫作用研究论文唐杰冯甦候若彤杨志荣【摘要】目的对川芎提取物的体外抑菌活性和杀虫活性进行初步研究。方法用75%乙醇为溶剂对川芎进行回流提取。采用滤纸片扩散法和生长速率法分别测定提取物对细菌、真菌的抑制作用；采用药液浸虫法测定提取物对蚜虫的毒杀作用。结果川芎提取物对供试菌都有一定的抑制作用，对蚜虫也有很好的毒杀作用。结论川芎提取物是一种有效的抑菌杀虫药物。【关键词】川芎；抑菌作用；杀虫作用Abstract:ObjectiveTostudytheinvitroantimicrobialandinsecticidalactivitiesofth

2、eextractfromLigusticumchuanxiongHort.MethodsLigusticumchuanxiongHort.ycelialgroethodsineantimicrobialactivity,.freelethodofimmersingtheinsectsinextractineinsecticidalactivity.ResultsTheethanolextractofLigusticumchuanxiongHort.shoicrobeandaphid.ConclusionTheextractfromLigusticumch

3、uanxiongHort.isaneffectiveantimicrobialandinsecticidaldrug.KeychuanxiongHort.;Antimicrobialactivity;Insecticidalactivity川芎LigusticumchuanxiongHort.是伞形科多年生草本植物，在我国有悠久的药用历史，在中医临床上常用来治疗各种血证，其能活血化淤，行气止痛，为“血中气药”，在活血方药中配用.freelonella、青枯菌Ralstoniasolanacearum、白色葡萄球菌Staphylococcusalbus、金

4、黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus、肺炎链球菌Streptococcuspneumoniae；真菌：柑橘青霉Penicilliumitalicum。均由本实验室提供。1.3供试虫体油菜蚜虫采集自四川省德阳市郊外的农田。1.4培养基细菌培养基(牛肉膏蛋白胨培养基)；真菌培养基(马铃薯蔗糖培养基)。2方法2.1川芎醇提物的制备取干燥的川芎药材，用粉碎机打成粗粉。称取粗粉100g，加入75%乙醇1000ml浸泡过夜，回流提取1h，过滤，滤渣再次回流提取2次，合并3次滤液，减压蒸馏除去乙醇至100ml(含生药量1g/ml)，得到川芎醇提物，4℃

5、冰箱保存备用。2.2样品溶液的制备川芎醇提物加无菌水按二倍稀释法稀释成500，250，125，62.5，31.3，15.6mg/ml6个浓度梯度的样品溶液。2.3供试细菌悬液的制备取受试细菌接种到牛肉膏蛋白胨培养基斜面，37℃培养18～24h，用无菌水将细菌悬液稀释成含菌量(菌落形成单位，CFU)为1.0×108。2.4抑菌活性测定2.4.1滤纸片扩散法测定提取液对细菌抑制作用［11］在牛肉膏蛋白胨培养基平板表面接种100μl菌悬液并涂布均匀，取已灭菌直径6mm并干燥的滤纸片，置于提取液2min，以溶剂作对照，再用无菌镊子夹取滤纸片贴于平板表面，并轻轻按

6、压使充分接触，37℃恒温培养24h后，测量滤纸片周围抑菌圈直径大小，确定抑菌效果。重复3次，取其平均值。2.4.2最低抑菌菌浓度(MIC)的测定［11］采用滤纸片扩散法测定各种细菌的最低抑菌浓度，以滤纸片周围刚出现抑菌圈的样品溶液浓度为最低抑菌菌浓度(MIC)，各浓度设3个重复，取最大值。2.4.3生长速率法研究提取液对真菌的抑制作用［12］将灭菌后的PDA培养基冷却至50℃左右，用移液枪吸取1ml样品溶液至灭菌培养皿中，倒入9ml培养基摇匀，制成薄厚均匀的平板，以等量蒸馏水代替药液作对照(CK)。用4mm打孔器取菌落边缘生长旺盛的菌种，用接种针将菌饼放

7、置在含药液培养基上，菌丝面朝下，每皿3块，重复3次，置于28℃培养箱中培养72h,十字交叉法测量菌落直径，减去4mm菌饼直径作为菌落真实直径。按下列公式计算抑菌率：抑菌率（%）=［(对照菌落直径-处理菌落直径)/对照菌落直径］×100%。2.5杀虫活性测定蚜虫毒力试验采用药液浸虫法［13］。将带有蚜虫的油菜柄采下，以毛笔仔细剔除不合要求的个体，浸入各浓度梯度样品溶液5s后用滤纸吸除多余药液，然后置加盖保湿的培养皿中，在室内20～25℃下每隔24h记录活虫头数，连续观察72h，每个浓度的处理重复3次，每个试样着虫70头左右，蒸馏水处理作对照(CK)。按照下

8、列公式计算：死亡率（%）=［(总数-存活数)/总数］×100%，校正死亡率（%）