败酱复方对混合菌液所致大鼠慢性盆腔炎的治疗作用论文

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时间:2018-11-19

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1、败酱复方对混合菌液所致大鼠慢性盆腔炎的治疗作用论文【关键词】败酱摘要:目的:研究败酱复方对混合菌液所致大鼠慢性盆腔炎的治疗作用,并初步探讨其作用机制。方法:采用混合菌液注入划伤的子宫内造成大鼠慢性盆腔炎,将60只雌性I1640培养液和小牛血清购自GIBCO公司。菌种:大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、乙型溶血性链球菌由武汉大学中南医院检验科临床分离并保种,以2∶1∶1的比例溶于无菌生理盐水配成浓度为3×109ml-1的混合细菌悬液。2结果21模型的建立[2]用03%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠(50mgkg-1),无菌条件下于大鼠下腹部正中切口0.8~1cm,暴露并固定子宫,用注

2、射器机械损伤子宫内膜组织,注入0.2ml混合细菌悬液至子宫双侧内,缝合切口,恢复饮水,正常清洁饲养。假手术组操作基本同模型组,但子宫内未注射混合菌液。22分组及给药将60只大鼠随机分为6组,每组10只,于造模后2d开始ig给药,连续21天。败酱复方低、中、高剂量组分别ig败酱复方15、30、60gkg-1d-1;阳性药组ig妇科千金片2.8gkg-1d-1;假手术组及模型组ig等体积生理盐水,各组给药容积均为15mlkg-1。23观察指标及测定方法231血液流变学指标末次给药12小时后,各组大鼠麻醉后颈总动脉抽血测定全血粘度、血浆粘度和红细胞压积。232免疫学指标①IL

3、2和IL6测定取大鼠肝素抗凝血,离心分离血浆,按试剂盒说明书采用双抗体夹心法测定IL2和IL6浓度。②脾淋巴细胞转化指数测定于给药30d后,无菌条件下取脾,按文献[3]方法,用RPMI1640培养液制作单细胞悬液,并用TrisNH4Cl破坏红细胞,镜检活细胞数90%后,调整细胞悬液浓度为2×106L-1,将细胞加入16孔培养板中,每样品2孔,每孔1ml,其中一孔加入细胞周期分裂素(PHA,5mgL-1),另一孔作对照。置37℃,5%CO2培养箱中培养68h后,将细胞移入40孔培养板中,每孔加入细胞悬液100μl,并加入5%MTT溶液10μl,继续培养4h,每孔加100μ

4、l酸性异丙醇充分混匀,终止反应,用酶联免疫检测仪作比色测定,计算脾淋巴细胞转化指数(脾淋巴细胞转化指数=加PHA淋巴细胞OD值/未加PHA淋巴细胞OD值)。233子宫病理形态学观察取大鼠双侧子宫称重后,先肉眼观察其炎症反应及周围粘连情况,然后将子宫置10%福尔马林溶液中固定,切片,HE染色,于光学显微镜下镜检,摄片。病理观察指标及积分标准为:①宫腔粘连闭塞或扩张:“-”无病变;“+”1/3病变;“++”1/3~2/3病变;“+++”2/3以上病变。②腔壁结构病变:“-”各层结构正常;“+”粘膜固有层腺体结构消失;“++”肌层与粘膜层分界不清;“+++”分层结构不清。③上

5、皮细胞变性坏死:“-”单柱状上皮;“+”上皮细胞扁平或脱落1/3;“++”上皮细胞扁平或脱落1/3~2/3病变;“+++”全层上皮细胞变性坏死。④慢性炎细胞浸润:“-”无慢性炎细胞浸润;“+”小数散在或灶性且仅在粘膜固有层内;“++”散在或灶性但深入肌层;“+++”多数散在或层状浸润并累及全层。⑤内膜充血水肿:“-”无内膜充血水肿;“+”固有膜轻微充血水肿;“++”明显充血水肿;“+++”全层充血水肿。24数据处理资料以均值±标准差(3实验结果31对血液流变学指标的影响由表1可见,模型组与假手术组比较全血粘度、血浆粘度和红细胞压积均显著升高;败酱复方给药组全血粘度、血浆

6、粘度和红细胞压积有显著改善。表1败酱复方对血液流变学各指标的影响(略)注:与假手术组相比,*P0.01;与模型组比较,#P0.05,ΔP0.01。32对免疫学指标的影响由表2可见,败酱复方高、中、低剂量组脾淋巴细胞转化指数和血清IL2明显升高,IL6显著降低。表2败酱复方对免疫学指标的影响(略)注:与假手术组相比,*P0.01;与模型组比较#P0.05,ΔP0.01。33对大鼠慢性盆腔炎组织形态学的影响假手术组:肉眼观察子宫颜色、硬度正常,浆膜面未见肿胀、充血。镜下宫壁各层结构清晰,内膜表面上皮偶见轻度增生,腺体未见明显病变,间质无炎症反应。模型组:肉眼观察大部分子宫颜

7、色暗红,浆膜面明显肿胀、充血,子宫重量增加,部分动物盆腔粘连。镜下大鼠子宫粘连闭塞或扩张,子宫壁完全被破坏、坏死,已失去原有正常形态,结构紊乱,模糊不清,代之以多量成纤维细胞增生,以及炎性细胞浸润,以中性粒细胞、淋巴细胞、浆细胞浸润为主;粘膜上皮细胞部分变性坏死脱落,各层组织坏死,形成无结构形态;子宫腺体上皮坏死。败酱复方组:子宫肿胀、充血等有不同程度减轻,少数子宫腺体腔闭塞,固有膜、肌层有轻度的炎性细胞浸润,中、高剂量组成纤维细胞增生不明显,其形态结构较接近正常。阳性药组:子宫肿胀、充血也有减轻,宫壁各层结构尚清晰。镜下可见炎症细胞浸润

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