肝阳上亢型高血压模型及评价初探论文

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1、肝阳上亢型高血压模型及评价初探论文胡淑平吕圭源于平野陈素红张园张跃文【摘要】为更好的应用于疾病实验研究,预期达到病症结合的目的,对肝阳上亢型高血压模型的建立方法进行总结并对其评价指标予以归纳和探索。【关键词】肝阳上亢高血压模型评价Abstract:Inordertobetterservediseaseexperimentalresearchandreachforecastedbinationofdiseaseandsymptoms,.freelsuptheestablishmentofhypertensionmodelofhy

2、peractionofliverYang,andmakesexplorationandinductiontoitsevaluationindex.Keyodel;evaluation从历年来文献中报道过的具有“病证结合”特征的高血压肝阳上亢证动物模型,并总结其评价指标——症状和体征、组织学检查、相关生化指标和神经递质检测和方药测证。1模型的建立1.1黄文权等[1]采用多巴胺静脉注射法模拟肝阳上亢证实验动物模型,并以生理盐水作为对照,方法简便易行,是国内外公开报道的首例,但该模型维持时间短.freels,电压从零开始,由低到高直

3、至大鼠出现嘶叫,以此时的电压值为痛阈。2.2.4周围血管充盈(与其对应的人的症状为第③项面部烘热)分为Ⅲ级[1]:Ⅰ级:双耳及头颈部毛细血管充盈,Ⅱ级:在Ⅰ级基础上加躯干部毛细血管充盈,Ⅲ级:在Ⅱ级基础上加四肢毛细血管充盈,腹壁静脉轻度怒张。2.2.5心脏血流动力学测定[18]其中的心率即脉搏数(与其对应的人的症状为第⑥项脉弦)氨基甲酸乙酯ip麻醉,分离右侧颈总动脉,插入充满肝素生理盐水导管至左心室,另股动脉插管测血压。联压力换能器,同步输入多功能信号处理系统。记录心率(HR)、收缩压(SAP)、舒张压(DAP)、左室压(LV

4、SP)、左室最大变化速率(±dp/dtmax)、左室舒张期末压(LVEDP)等指标。此外,经颅多普勒检测大脑中动脉平均血流速度、收缩峰血流速度增高。高血压肝阳上亢证白天血压高于夜间[16]。2.2.6旋转时间(与其对应的人的症状为第①项眩晕)根据文献[24,19]方法自制旋转平台,将大鼠置于旋转平台上,分3次每隔10s调速1次,转速分别为15、30、45r/min,记录跌下时间,若2min仍不跌下则停止测试。2.2.7其他可以观察大便性状、舌象[4];尿量[8];心、肾脏器检测,计算脏器系数,并作肾脏病理组织学观察[3]:先

5、10%福尔马林固定,再石蜡包埋,切片(5Lm),常规HE染色,在光镜下观察有无肾入球小动脉硬化及肾小球萎缩等。2.2.8模型的神经递质及生化指标为更加全面客观的评价模型,可以参考的神经递质及生化指标有。2.2.8.1血浆NE、E及脑干NE、5HT测定肝阳上亢证最主要的病理生理基础为外周交感——肾上腺髓质功能偏亢[20],表现为血、尿儿茶酚胺增高,肖纯等[2]实验发现肝阳上亢组模型大鼠出现与此相同的病理生理变化,血浆NE、E显著升高。脑内NE、5HT的动态平衡与中枢痛阈的升降变化及情绪波动有密切关系[21]:当脑内NE明显升

6、高和(或)5HT明显下降时,将使痛阈明显下降造成头痛,并出现烦躁易怒、躁狂、攻击行为等,本模型大鼠脑内NE明显升高、5HT明显下降,可能是肝阳上亢证发生头痛、烦躁易怒等证侯的重要机制。所有动物均于实验第8周末断头处死,将血液在4℃3000r/min离心15min,分离出血浆,放-80℃冰箱中保存待测,采血同时迅速剥离脑组织,分离出脑干放入液氮中冷冻1l血液于普通玻璃试管中,温度为4℃,3000r/min下离心15min,分离出上清液,待测。具体操作按说明书进行。2.2.8.4尿内3甲氧肾上腺素(TMN)、NE;血浆内环核

7、甘酸(cAMP)、血栓素B2(TXB2)、及6酮前列腺素F1α(6kPGF1α)一般认为交感神经、肾素血管紧张素系统对血压调节起着主要作用。儿茶酚胺、AⅡ、TXB2具缩血管作用,而PGI2有扩血管作用。王钦茂等[8]的实验表明肝阳上亢型高血压动物主要出现尿内儿茶酚胺类物质TMN、NE升高,具有交感-肾上腺髓质功能增强表现,以及cAMP升高,6kPGF1α/TXB2比例下降等三项主要指标的改变,与临床上相一致。按各自的试剂盒说明书进行。cAMP用液体闪烁计数器测定,TXB2、6kPGF1α和AⅡ采用γ放免计数器测放

8、射性计数(cpm)值。TMN含量用紫外分光光度法,NE测定根据shellenberger等方法。2.2.9方药测证选用临床用于治疗肝阳上亢型高血压的天麻钩藤饮进行验证。【

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