地榆提取物抗氧化与抗过敏作用研究

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1、地榆提取物抗氧化与抗过敏作用研究作者：魏智芸滕建文黄丽韦保耀夏宁冯志臣【摘要】　　目的研究地榆提取物的抗氧化与抗过敏作用及其相关性。方法地榆经乙醇提取，有机溶剂萃取，大孔树脂HP-20分离纯化，获得不同提取部分。采用透明质酸酶抑制率及对DPPH、羟基自由基、过氧化氢的清除作用来检测提取物活性。结果地榆大孔树脂40%乙醇洗脱物透明质酸酶的抑制率与各自由基清除率是所有提取物中最高的，其自由基清除率接近于原花青素和芦丁，大于维生素C和儿茶素；地榆的提取物浓度与透明质酸酶抑制率、氧自由基清除作用成正相关性。结论地榆是一种值得开发的抗过敏、抗

2、氧化植物；地榆提取物的抗过敏机制与其具有较强的氧自由基清除作用有关。【关键词】地榆抗氧化抗过敏　　Abstract：ObjectiveTostudythecorrelationshipbetacroporousresinHP-20,anddifferentseparatedponentsplesS-H40%echanismofantiallergicisrelatedata［4］报道抗氧化剂可以有效治疗过敏性疾病，因为活性氧如超氧阴离子自由基、羟自由基促使肥大细胞释放组胺，产生过敏反应，因此，从地榆的成分以及抗炎症、抗氧化的效果看，

3、地榆可能是良好的抗过敏植物来源。　　但是从目前的　　3结果　　3.1各提取物的透明质酸酶抑制率原花青素、儿茶素都具有强有力的抗氧化作用，抗过敏作用。从表1可以看出，样A经溶剂萃取后得到样E，样E经大孔树脂纯化后得样H，其透明质酸酶的抑制率分别为47.70%，62.00%，76.00%，逐步升高。样H的活性超过儿茶素，且提取率相对于其他样品是较高的，因此选择A，E，H作为下面抗过敏与抗氧化作用量效分析的样品。从羟基自由基清除率与过氧化氢清除率来看，样H的清除率是所有提取物最高的，其自由基清除率接近于原花青素和芦丁，大于维生素C和儿茶素

4、；过氧化氢清除率接近于原花青素，大于芦丁、维生素C、儿茶素。因此，样H在本实验中显示了与原花青素相近的活性。　　本实验对样品H进行了试管预测：①样品H可以使明胶溶液产生沉淀,推断为单宁类物质；②样品H喷洒三氯化铁-铁氰化钾显示为蓝色,喷洒茴香醛-硫酸,样品颜色显示为橙黄色,证明样品H为缩合类单宁；③加入溴水,样品H溶液变浑浊,推测为缩合类单宁；④样品H加入香草醛-盐酸溶液,颜色呈现红色,推测样品为缩合类单宁。　　此结果证实样品H为与原花青素相似的缩合单宁类。表1不同样品自由基清除率和透明质酶抑制率（略）　　　3.2不同浓度的提取物的

5、透明质酸酶抑制率的比较Kakegag/ml抑制率已达76%，较低浓度0.5mg/ml的抑制率达50%，可见地榆大孔树脂40%洗脱物对透明质酸酶有很强的抑制作用。地榆萃取后水相（E）及地榆醇提物（A）也都表现了明显的抑制透明质酸酶作用。在提取分离的过程中,通过不同极性溶剂的萃取分离,以及大孔树脂的吸附分离,透明质酸酶抑制率在每一步分离纯化过程都得到提高,说明地榆中抗过敏成分得到了很好的富集。　　3.3不同提取物对氧自由基的抑制作用的比较　　3.3.1对羟自由基的清除作用　　由图2可知，地榆提取物A,E,H对羟自由基的清除作用，在所给范

6、围内，随着浓度的升高，清除作用也逐渐增强，呈量效关系，在一定浓度范围内，清除能力与样品浓度呈正相关。经计算地榆各样品的IC50(清除率达到50%时的样品浓度)分别为：0.4，0.42，0.26mg/ml。　　　3.3.2对过氧化氢（H2O2）的清除作用由图3可以看出，地榆3种提取物对H2O2有不同的清除效果，说明地榆多酚对H2O2有明显的清除作用，且呈较好的量效关系。地榆萃取后水相物在低浓度范围内清除率上升的比较快，在高浓度范围内上升的较为缓慢。地榆大孔40%洗脱物清除能力相对最强，特别是低浓度范围内表现明显，在0.1mg/ml，清

7、除率就达到63%。经计算地榆提取物清除H2O2的IC50分别为：0.160，0.098，0.0606mg/ml。　　　3.3.3对DPPH的清除作用DPPH法是一种评价天然抗氧化剂抗氧化活性的快速、简便、灵敏、可行的方法，对自由基清除剂具有广谱性筛选效果，在国内外应用广泛。由图4可知，地榆提取物对DPPH的清除都呈正相关，是一种良好的天然抗氧化剂。经计算地榆各样品的IC50(清除率达到50%时的样品浓度)分别为：0.49，0.121，0.089mg/ml。　　　4结论　　大孔树脂用于分离黄酮类、皂苷类、生物碱、多酚等。样品通过大孔树

8、脂吸附，水洗脱物一般为糖类、蛋白质等，因此推断40%洗脱物H主要成分应该是多酚类物质，而不是已被证明的地榆中具有抗过敏性的多糖类物质。实验证明其抗过敏性与原花青素相近，原花青素已证明有良好的抗过敏和抗氧化活性［15］，并已开发成产品如