不同产地白花蛇舌草中多糖含量比较论文

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1、不同产地白花蛇舌草中多糖含量比较论文.freel。结果江西产白花蛇舌草中多糖含量略高于广东、广西产药材。结论不同产地白花蛇舌草药材多糖含量基本一致。【关键词】白花蛇舌草;多糖;产地现代研究资料表明,白花蛇舌草提取物具有明显的抗肿瘤活性,且具有增强非特异性免疫作用。本试验建立了快速、稳定、科学的测定白花蛇舌草中多糖含量的方法,并进行了不同产地药材中多糖含量差异初步研究,现报道如下。惠普UV-8453型可见-紫外分光光度计;赛多利斯CP3245型电子天平。白花蛇舌草(采自广东、广西、江西)经广东食品药品职

2、业学院中药与生物系颜仁梁老师鉴定为茜草科草本植物白花蛇舌草Oldenlandiadiffusa(L的葡萄糖对照品溶液,冷藏备用。2.2供试品溶液的配制称取药材样品约50mg,精密称定,置100mL量瓶中,加水80mL,摇匀,沸水浴浸提1h,冷却至室温,加水稀释至刻度,摇匀,滤过,收集续滤液备用。2.3最大吸收波长的选择精密移取对照品溶液和供试品溶液各1.0mL,以苯酚硫酸法显色,在380~700nm波长范围内扫描,对照品与供试品溶液吸收曲线λmax均为486nm。2.4显色条件的选择12.4.1硫酸用

3、量的选择精密移取上述对照品溶液1.0mL5份,各加苯酚溶液1.0mL,快速加入浓硫酸2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL,于486nm处测定吸光度值。当浓硫酸用量低于4mL时,显色反应几乎不发生或很弱。本试验中浓硫酸用量达6.0mL时吸光度值最大,因此选择浓硫酸用量为6.0mL。2.4.2反应温度的选择文献中关于反应温度有室温至沸水浴不等,故本试验以室温(30℃)、40、60、80℃、沸水浴为考察水平。精密移取上述对照品溶液1.0mL5份,固定其他因素,规定水浴温度显色后,于486nm处测定吸光

4、度值。结果显示,反应温度对显色结果影响较小,室温放置即可达到显色目的,故选择室温作为反应温度。2.4.3反应时间的选择精密移取上述对照品溶液1.0mL4份,固定其他因素,分别于室温反应10、20、30、40min,于486nm处测定吸光度值。结果在所选定的反应时间范围内,各吸光度值几乎无差异,20min时最大,故选择反应时间为20min。2.5线性关系精密称取上述葡萄糖对照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL,照上述显色条件显色,于486nm处测定吸光度值。以吸光度值(Abs)为纵坐标

5、,多糖量(C,mg)为横坐标,绘制标准曲线,回归方程为:Y=0.10493X,r=0.9998,表明葡萄糖在0.02140~0.1070mg范围内具有良好线性关系。2.6药材处理2.6.1沸水浸提法称取药材样品约50mg,精密称定,置100mL量瓶中,加水80mL,摇匀,沸水浴浸提1h,取出,放至室温,加水稀释至刻度,摇匀,滤过,收集续滤液,为供试品溶液,备用。结果见表1。表1不同提取方法比较(略)2.6.2超声提取法称取药材样品约50mg,精密称定,置100mL量瓶中,加水80mL,摇匀,超声30m

6、in,取出,放至室温,加水稀释至刻度,摇匀,滤过,收集续滤液,为供试品溶液,备用(见表1)。结果沸水浸提法效果优于超声提取法,因此,选择沸水浸提法为供试品提取方法。2.7提取时间的选择称取药材样品约50mg,4份,精密称定,置100mL量瓶中,加水80mL,摇匀,分别置沸水浴浸提0.5、1.0、1.5、2.0h,取出,放至室温,依法显色,测定486nm处吸光度值,结果沸水浸提1.0h后测得多糖含量趋于稳定,选择沸水浸提1.0h。2.8精密度试验精密移取提取时间项下1.0h供试品溶液1.0mL,依法显色

7、,重复测定486nm波长处吸光度值5次,RSD=0.59%,表明方法精密度良好。2.9重复性试验称取药材样品约50mg,5份,依法显色,测定486nm处吸光度值,平均含量为11.76%,RSD=0.15%,表明方法重复性好。2.10加样回收率试验称取药材样品约50mg,6份,精密称定,置100mL量瓶中,精密移入葡萄糖储备液2.0mL(含葡萄糖2.0327mg),依法显色,测定486nm波长处吸光度值,计算平均回收率=99.91%,RSD=1.39%。2.11稳定性试验取加样回收率项下5号样品,自首次

8、测定后10、30、60min测定吸光度值,4次测定结果RSD=0.57%,说明样品显色后1h内稳定性良好,可以满足测定需要。2.12样品测定称取药材样品各约50mg,依法显色,测定486nm处吸光度值。按对照品回归方程计算供试品中多糖含量。结果见表2。表2样品测定结果(略)3讨论硫酸在本反应中的作用是促进多糖水解产生单糖,高温环境中脱水并与苯酚反应产生棕红色物质进行比色2。若硫酸用量过小,则多糖水解不完全,故吸光度值受硫酸用量影响显著。反应温度对显色结果

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