喘复康合剂对支气管哮喘大鼠气道重塑和cd44表达的影响论文

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1、喘复康合剂对支气管哮喘大鼠气道重塑和CD44表达的影响论文【摘要】目的观察喘复康合剂对支气管哮喘大鼠气道重塑的影响及其可能的作用机制。方法采用卵白蛋白致敏法复制大鼠哮喘模型,以喘复康合剂灌胃给药后,用免疫组织化学法检测各实验组大鼠肺组织中CD44表达的变化;通过图像分析系统测定各实验组大鼠支气管壁各层的厚度;通过Masson三色染色法及图像分析系统测定各实验组大鼠胶原沉积厚度。结果哮喘组肺组织中CD44的含量明显高于对照组(P0.05),4周组较3周组更为明显;激素组CD44表达不明显,与对照组相比无显著性差异(P0.05)。

2、喘复康低、高剂量组CD44的含量明显低于哮喘组(P0.05)。图像分析结果显示,哮喘组支气管平滑肌明显增厚,胶原沉积增加,4周组较3周组更为明显.freelechanismofChuanFuKangmixtureonairodellofratmodelsofasthma.MethodsAnanimalmodelofasthmain)sensitizing-challengingSDrat.assontrichromestaining.ResultsThecontentofCD44oflungtissueofasthmagrou

3、poreobviousthanthethree-agroup(P<0.05).Theresultsoftheimageanalysisshooothmuscleandtheareaofcollagendepositionobviouslyincreased,thefour-oreevidentthanthethree-onegroupandChuanFuKanggroupixturecaninhibitetheairodelingbyreducingtheproduceandtheexpressionofCD44inasthm

4、aticratlungtissue.Keya;Airodeling;ChuanFuKangRats支气管哮喘(简称哮喘)是严重影响人体健康的慢性呼吸道炎症性疾病。近年来,人们针对哮喘病的慢性进行性和难以根治性,对于哮喘气道壁重塑的研究日益受到重视。气道重塑主要表现为气道平滑肌肥大、增生、基底膜增厚和玻璃样变,由此可致气道的不可逆阻塞和持续的气道高反应性,是顽固性哮喘的重要病理基础[1]。许多因素如炎症介质、细胞因子及原癌基因都参与了这一过程。本研究观察不同时段哮喘大鼠模型肺组织中CD44的表达及药物对其表达的影响,旨在进一步阐

5、明CD44在哮喘气道重构中的作用和药物的干预机制,为进一步的实验研究提供依据。1材料与方法1.1药品与试剂鸡卵清白蛋白(OVA),美国Sigma公司;地塞米松磷酸钠注射液,湖北天药药业;兔抗鼠CD44多克隆抗体、即用型SABC免疫组化染色试剂盒,武汉博士德生物工程有限公司;SP免疫组织化学、DAB显色试剂盒,北京中衫金桥生物技术有限公司。1.2仪器402T型超声雾化器,上海四菱医疗器械厂;自制大鼠雾化吸入箱;DC200图象采集系统、IM50型图像采集软件、Image-Proplus真彩色医学图象分析软件,德国Leica公司产品

6、等。1.3动物及分组健康雄性SD大鼠80只,体重180~200g,由华中科技大学同济医学院实验动物中心提供。实验前动物于正常温控、光照和自由摄取食物、水的条件下饲养1周后,被随机分成5组:正常对照组、哮喘组、地塞米松处理组及喘复康低剂量和高剂量处理组。各组又分成诱喘3周、4周两个时间段。1.4大鼠哮喘模型的建立采用卵白蛋白(OVA)致敏法制备[2]。第1天,哮喘组及各给药组大鼠用1ml混悬液腹腔注射〔OVA10mg;Al(OH)3干粉100mg〕致敏,第15天开始诱喘,哮喘组大鼠超声雾化1%OVA激发,约30min/次,观察并

7、记录大鼠呼吸及全身情况,以出现呼吸加快、口周发绀及腹肌痉挛、点头呼吸为激发成功,共21~28d。分别于第35天,第42天处死大鼠。地塞米松组于每次诱喘前1h给予腹腔注射地塞米松1.0mg/kg。对照组在相同的时间腹腔注射、雾化吸入0.9%生理盐水,其余同哮喘组。喘复康处方药物由医学院中医内科提供,其主要成分为麻黄、杏仁、丹参、僵蚕、地龙、苏子、白芥子、鱼腥草、黄藤、甘草等。所有药物经浸泡、煎熬、过滤及浓缩成浓度为4g生药/ml的药汁,将浓缩后的药汁装入已消毒的容器中,密封后再高温灭菌,置于4℃冰箱保存用。于雾化攻击前给予灌胃给

8、药,低高剂量组分别以50,100g生药/(kg·d)灌胃。1.5肺组织病理学观察末次激发结束后24h内处死,取右肺中叶组织,修块,10%甲醛溶液固定,常规石蜡包埋切片。行HE染色及Masson三色法染色。1.6计算机图象分析气道壁厚度及胶原厚度采用计算机图像分析系统,每张切片

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