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时间:2018-11-19
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1、栀制人参的药性变化研究论文.freelinoidsEllisde的干燥成熟果实。③氢化可的松注射液:20ml,100mg,天津金耀氨基酸有限公司,国药准字H12020887。④活性炭制备:将医用活性炭蒸馏水洗2~3次,用1%(V/V)盐酸回流2小时后,用蒸馏水洗至pH6左右,抽滤,100℃烘干备用。⑤可的松标准液:取氢化可的松注射液0.5ml,甲醇稀释至5ml,4℃存放备用。⑥显色剂:将65mg盐酸苯肼溶于100ml浓度为56%(V/V)的硫酸中即成。需现用现配。⑦脱醛正丁醇:取500ml正丁醇,加入新鲜配制的上述显
2、色剂100ml,充分混匀,室温静置1周后,用蒸馏水洗3次;重蒸,取沸点116~117℃馏分备用。⑧无水硫酸钠。⑨生理盐水。2实验方法与结果2.1样品制备2.1.1生晒参取鲜参净制后40~50℃干燥。粉碎过100目筛,加蒸馏水配制成浓度为0.15g/ml的混悬液。2.1.2红参取鲜参置锅内常压下文火蒸制2小时后取出,于40~50℃条件下烘干。粉碎过100目筛,加蒸馏水配制成浓度为0.15g/ml的混悬液。2.1.3栀制人参栀子粉末加水浸泡,加入一定量蜂蜜,制成栀蜜混合液。将人参切片,厚度为2~3mm,置锅内常压下文火蒸
3、制2小时后取出,于40~50℃条件下烘干。粉碎过100目筛,加蒸馏水配制成浓度为0.15g/ml和0.45g/ml的混悬液。2.1.4栀蜜对照液栀子充分干燥后,粉碎,按比例加入蒸馏水和蜂蜜,制成栀蜜对照液。2.2分组、造模及给药选取体重160~200g大鼠48只,雌雄各半,按空白组、生晒参组、红参组、样品高剂量组、样品低剂量组、栀蜜混合液组随机分为6组,每组8只。先用寒凉药知母:石膏:黄柏:龙胆草以1.5:2:1:1比例制成1g/ml的水煎液灌服,用药量4ml/d,连续给药3周5。造成寒凉模型后,按分组以10ml/k
4、g体重灌胃给药,每天2次,连续2周。2.3指标含量测定2.3.1肛温的测定末次给药后1小时用肛温计测量肛温。2.3.2饮水量和尿量的测定固定给水量,测量剩余量,即为饮水量。记录给药过程中饮水量的变化,并比较各组间的差异。每次用自制代谢笼收集尿液时,用量筒测量收集的尿量,作以比较。2.3.3尿17-羟皮质类固醇含量的测定6实验前两天分别用代谢笼收集大鼠24小时尿液两次。最后将每只大鼠2次尿液混合,测定含量。用pH试纸检测尿液,pH应在2以下。将带塞试管按给药先后编号,用0.5ml移液管吸取尿液0.5ml依次放入试管内,
5、并加入0.5ml蒸馏水使容积为1ml。依次加入0.3g无水硫酸钠,加塞,超声2min后,加入脱醛正丁醇4ml。再超声10min,2000rpm离心10min,吸出上清液(正丁醇),放入另一小试管中,加入30mg活性炭,摇匀,静置3min,脱去色素。4000rpm离心10min,吸取上清液准备比色。选大试管数支,按表分别注明A、B、C、D、E、F。其中A、B管是显色剂和试管空白,C管为可的松标准空白,D管为含有10μg可的松的标准管。以上4管各加入0.8ml脱醛正丁醇,E管为样品空白管,各加入0.8ml尿液的正丁醇提取
6、液。表117-羟皮质类固醇含量测定试剂配伍表按上表分别将各种药液加入各个试管中,混匀后置于60℃恒温水浴内50min(中间需摇动)。取出后立即放入冷水内5min。最后用紫外-可见分光光度计检测(410nm处,以正丁醇较正零点)。【注意】每组大鼠试验前均收集两次24小时尿液,第一次尿液收集后调pH至3,并加入数滴6mol/L的HCL防腐,置4℃冰箱保存。待第二次留尿液测pH后,方将两次尿液混匀进行检测。2.4结果表2人参不同炮制品对交感神经-肾上腺系统及代谢机能的影响注:*表示与空白组比较**P<0.01,*P<0.0
7、5。△表示与生晒参组比较△△P<0.01,△P<0.05。由表2结果可见,给药2周后人参不同炮制品均能使虚寒证大鼠的肛温升高,使饮水量、尿量以及尿液中17-羟皮质类固醇含量增加,既提高了交感神经-肾上腺系统机能的活动,加强了代谢机能。其中,生晒参组变化最为明显,经SPSS11.5统计软件进行统计分析,与各组均有显著性差异,具有统计学意义。红参组水平略低于生晒参组,饮水量与空白组有显著性差异。样品高剂量组指标与红参组接近,尿液中17-羟皮质类固醇排出量低于生晒参组和红参组。样品低剂量组使虚寒证大鼠各项指标接近正常值,饮
8、水量和尿量与生晒参组有显著性差异。栀蜜对照组肛温降低,饮水量、尿量及尿液中17-羟皮质类固醇含量降低,与生晒参组相比有显著性差异,具有统计学意义。3讨论与结论人参大补元气,主补五脏、安精神、定魂魄、止惊悸、明目开心益智、调中止消渴,久服有延年益寿之功效。现代人参的药理研究证实,人参的生理活性是多方面的,其中“滋补强壮”作用是重要的一个方面。但是
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