苯安莎类抗生素的一种早期鉴别方法论文

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1、苯安莎类抗生素的一种早期鉴别方法论文刘爱明武临专王以光张会图赫卫清李永海张侃【摘要】目的建立一种对苯安莎类抗生素特异的颜色反应早期鉴别方法。方法根据碱性处理苯安莎类抗生素，使其安莎链与苯环连接的酰胺键开裂后化合物呈紫色的原理，建立了将发酵液粗提品进行薄层色谱层析后采用2.0mol/LNaOH溶液喷涂显色的早期鉴别方法；以格尔德霉素为例，在硅胶板上的检测灵敏度为4μg。结论采用该颜色鉴别反应方法：①对两株确证为新的格尔德霉素产生菌Streptomycessp.44以及Streptomycessp.357进行了佐证；②对吸水链霉菌Streptomyceshyg

2、roscopicus17997的一株格尔德霉素生物合成后修饰基因阻断变株CT1中产生的格尔德霉素前体物及其类似物，在硅胶板上进行了快速定位和初步鉴别。【关键词】苯安莎类抗生素；酰胺键；颜色反应；鉴别ABSTRACTObjectiveEstablishingasimpleandsensitivemethodforearlypreliminarydiscriminationofbenzenicansamycinsandtheirderivatives.MethodMostnaturalbenzenicansamycinsareyelloeareentofalka

3、lisuchasNaOHorsodiummethoxide,idebondformedbetinogroupandtheansabridge′sterminalcarboxygroup,benzenicansamycinssuchasgeldanamycinchangeditscolorfromyelloinimaldetectionlimitofthismethodonthesilicagelplateforgeldanamycinol/L)sprayed.ResultsThiscolorchangereactionmethodinarydiscrim

4、inationofgeldanamycinproducedbytycessp.44andStreptomycessp.357,ycinproducingpotential(s),andfastlocationandpreliminarydiscriminationonsilicagelplateofgeldanamycinderivativesproducedbyCT1,amutantstrainofStreptomyceshygroscopicus17997ycinbiosynthetictailoringgenesbeingdisrupted.安莎类

5、抗生素具有重要的生物学活性，例如，利福霉素是目前临床上最重要的抗结核病药物之一；格尔德霉素(geldanamycin)具有抗肿瘤和抗病毒活性等。安莎类抗生素还具有抗细菌(革兰阳性菌)、抗霉、抗酵母和抗原虫等活性。因此，安莎类抗生素日益受到人们的重视。安莎类抗生素为一个脂肪链(称为安莎桥)连接于芳香环的两个不相邻原子间的一类化合物.freelycins)，Kakeya等［4］在筛选白血病细胞系IL60的细胞凋亡诱导剂中得到了胞三烯菌素A(cytotrieninA)。除莠霉素和格尔德霉素都是较早发现的苯安莎类抗生素，具有除草、抗菌、抗肿瘤和抗病毒等活性；格尔德霉

6、素由于其优越的抗肿瘤活性，目前受到重视；在国内，胡海峰［5］、朱宝泉［6］等在免疫抑制剂的筛选过程中获得了除莠霉素A及其产生菌和格尔德霉素及其产生菌。但是至今还没有见到有关安莎类抗生素早期鉴别方法的报道。本文作者所在实验室根据安莎类抗生素的生物合成原理，建立了一种专门针对安莎类抗生素产生菌的分子筛选模型。从土壤分离的约1900株未知放线菌中筛选得到了一批具有产生安莎类抗生素潜能的放线菌［7］，这些菌株的发酵产物绝大多数具有抗菌、抗病毒或抗肿瘤活性。如何从这些阳性菌株的发酵产物中快速、准确地鉴别安莎类抗生素，显得特别重要和迫切。多数安莎类抗生素具有颜色(多为黄色

7、)，安莎桥中含有三烯键的安莎类抗生素具有特征性的紫外吸收峰(268、278和290nm)；这些性质对于鉴别安莎类抗生素有一定帮助，但不能够作为比较可靠的、早期鉴别安莎类抗生素的方法。安莎类抗生素的分子结构中，安莎桥的一端通过酰胺键与芳香环相连。Schnur等［8］利用甲醇钠(一种强碱)使格尔德霉素的酰胺键开裂，产生了紫色化合物(图1)。我们推测NaOH同样具有开裂格尔德霉素的芳香环与安莎桥之间形成的酰胺键作用。杨红玲等［9］在除莠霉素A(herbimycinA)结构类似物的分离鉴定中提及用碱处理除莠霉素A及其衍生物可以产生紫色化合物。格尔德霉素和除莠霉素A均属

8、于苯安莎类抗生素。通过碱性处理使苯安莎