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1、基于发光金纳米粒子荧光增强法测定溶菌酶摘要参照䥺SymbolmAs增加到8.96 䥺SymbolmAs,这进一步说明溶菌酶和GNPs之间的静电作用可能使得GNPs表面钝化,从而导致GNPs的荧光增强。 图4离子强度对体系荧光增敏的影响 Fig.4EffectofNaClonthefluorescenceenhancementofGNPsat0.01mol/LpH7.0PBSbuffer ConcentrationsoflysozymeandGNPses;10-6and4.010-6mol/L,respectively.
2、图5荧光衰减曲线 Fig.5Fluorescencedecaycurves λex=320nm,λem=410nm. 3.3实验条件优化 3.3.1发光金纳米粒子浓度选择实验表明,GNPs的荧光强度随着其浓度的增加而增大。但GNPs浓度过大(>5.010-5mol/L,依据BSA浓度计算)时,会出现自猝灭现象,荧光强度反而降低。控制较低的GNPs的浓度,能降低荧光本底,对提高测定灵敏度有利。但过低的GNPs浓度,会导致发光不稳定,也减小了测定溶菌酶的线性范围。本实验
3、GNPs浓度选择4.010-6mol/L。 3.3.2酸度与介质的影响图6给出在4.010-6mol/L溶菌酶存在和不存在的条件下,pH值对发光金纳米粒子荧光强度的影响。图6在溶菌酶存在(F)和不存在(F0)条件下,pH值对发光金粒子荧光强度的影响 Fig.6EffectofpHonfluorescenceintensityofGNPsinthepresence(F)andabsence(F0)oflysozyme GNPs和溶菌酶浓度均为4.010-6mol/L(Boththeconcentrationoflysoz
4、ymeandGNPses;10-6mol/L)。发光金粒子本身在不同pH值荧光强度呈现一定的波动,在pH>11时强度较大,这与 13MEiF,HeXA,SchaaffTG,,ZhouDB,HaoJY,LuYH,ChenSM.SpectrochimicaActaPartA,2009,71(5):1795~1798 17HeH,XieC,RenJC.Anal.Chem.,2008,80(15):5951~5957 18LIUMei-Gui,CAOChun,CAOMing,ZHUChang-Qing(刘玫瑰,曹春,曹明,朱昌青).Chines
5、eJ.Anal.Chem.(分析化学),2009,37(10):1503~1506 19LiuL,ZhengHZ,ZhangZJ,HuangYM,ChenSM,HuYF.SpectrochimicaActaPartA,2008,69(3):701~705 20ZhengJ,PettyJT,DicksonRM.J.Am.Chem.Soc.,2003,125(26):7780~7781 21MohamedMB,VolkovV,LinkS,El-SayedMA.Chem.Phys.Lett.,2000,317(6):517~523
6、22BigioniTP,ethodforDeterminationofLysozymeUsing FluorescentGoldNanoparticlesasProbe QIANZhang-Sheng,LIUMei-Gui,TIANDa-Hui,HAODan,ZHUChang-Qing (AnhuiKeyLaboratoryofChemo-Biosensing,CollegeofChemicalandMaterialsScience, AnhuiNormalUniversity,ehasthepropertyofdissolving
7、somebacteria,itcanbeappliedinmedicaltreatment,biologicalengineering,andespeciallyinfoodantisepsistoreplacechemicallysynthesizedones.Therefore,thedevelopmentofasimpleanalyticalmethodforlysozymeassayisveryimportant.Here,odifiedfluorescentgoldnanoparticles(GNPs)eethodforthedeterminatio
8、noflysozymehasbeend