裸鼠前列腺原位肿瘤模型的建立论文

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1、裸鼠前列腺原位肿瘤模型的建立论文罗勇，张林琳，贺大林，李翔，宁亮，侯惠莲【关键词】,前列腺癌EstablishmentofprostatecancermodelbyorthotopicinjectionofhumanprostatecancercelllineDu145【Abstract】AIM:Toestablishaprostatecancerorthotopicinjectionmodelinnudemiceandtodiscussitsvalueofapplication.METHODS:Loinalinc

2、isionadein10malenudemice.Afterthebladderandprostateouse.Theabdominaliceiceousephaticnode,lungandliveraldehyde,embeddedinparaffin,stainedbyHEandthenobservedmicroscopically.Thebonemetastasisarytumorafterintraprostaticinjectionallpalpablenodesinprostateandabout19

3、dlater,cachexiaoccurredinnudemice.Afterdissection,.freeleterofprimarytumorsvariedfrom0.8cmto1.5cmandtheenvelopeoftheliverbecamecrimpy.Acutehepatitiscouldbeobservedundermicroscopy,ia,hepaticlobuleinfiltratedbylymphocyteandmacrophageandinconspicuoushyperplasia.C

4、ONCLUSION:Theorthotopicinjectionmodelisanoptimalanimalmodeltostudytheoccurrenceanddevelopmentofprostatecancer.Itmimicsthenaturalsituationofhumanprostatecancerandechanismsofandrogenindependenceandosseousmetastasisandtumorhostdeterminantsofprostatespecificantige

5、n(PSA)expression.【Keys;orthotopicinjection;metastasis;nudemice【摘要】目的：建立一种裸鼠前列腺癌原位模型.方法：在10只裸鼠下腹部切口，显露膀胱和前列腺，用1mLTB针筒、29G针头在其前列腺左右腹侧叶包膜下接种人前列腺癌DU145细胞50μL.freelL/L胎牛血清（杭州四季青公司）的RPMI1640培养液（美国Gibco公司）在37℃，50mL/LCO2的孵箱内培养，以1.25g/L胰酶和0.2g/LEDTA的混合液消化传代.1.2方法裸鼠用10g

6、/L戊巴比妥钠（75mg/kg）麻醉，仰卧位，胶带固定四肢，下腹部正中横切口1cm，暴露膀胱和精囊腺，用棉签轻压膀胱顶壁、腹侧壁，并向下游离至膀胱颈，推开肌肉及生殖腺进一步暴露前列腺，可见其大小约1.0ｍｍ×1.5ｍｍ×2.0ｍｍ，分左右2叶，呈粉红色，有明显的腺体组织特征.用1mLTB针筒、29G针头轻轻挑起一侧前列腺包膜，缓慢进针，直至顶起对侧包膜，明确针尖进入包膜后，再缓慢推注Du145细胞悬液50μL（6×106个），以包膜向上鼓起，脱离腺体表面为满意标准.恢复脏器的解剖位置，用70可吸收线分别间断缝合腹壁

7、肌肉层和皮肤层，待鼠苏醒后回笼.以裸鼠出现恶液质、处于濒死状态作为观察终点，颈椎脱臼法处死.尸解并观察荷瘤部位肿瘤的生长情况.裸鼠处死后，立即在100mA，40kV，5.23ms条件下行Ｘ线检查.裸鼠与球管距离为1.0ｍ；然后取前列腺、膀胱、盆腔淋巴结、肝脏和肺脏标本，40g/L甲醛固定、石蜡薄层切片4μm，HE染色后光镜下观察有无转移灶.2结果2.1肿瘤模型的建立裸鼠注射后14d可于下腹前列腺部触及结节，黄豆大小、表面光滑、质硬、活动度差.19d出现恶液质，解剖后发现6只裸鼠前列腺部位有包块形成，直径0.8～1.

8、5ｃｍ.病理证实原位移植瘤模型建立成功.2.2侵袭和转移前列腺部位包块呈结节状、质硬，与周围精囊腺、输精管、膀胱及肠管黏连.肝脏有明显的肉眼病变，体积缩小、颜色泛黄、表面被膜皱缩、遍布黄色斑点状病变.2只裸鼠前列腺原位肿瘤侵及膀胱（Fig1），病理检查未见肝、肺、盆腔淋巴结肿瘤转移灶；X线也未发现骨骼病变.2.3HE染色结果前列腺组织内有成群密集的未分化上皮