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1、甘草酸防治小鼠哮喘的作用及其免疫学机理探讨论文【关键词】甘草酸;,,支气管哮喘;,,免疫调节摘要:目的观察甘草酸对小鼠哮喘的防治作用及对哮喘小鼠的血清IgE和IL4的影响。方法建立小鼠哮喘模型,观察甘草酸对小鼠哮喘模型及哮喘小鼠血清IgE和IL4影响。结果甘草酸治疗后与哮喘组小鼠相比较小鼠肺组织的炎症病理变化明显减轻,血清IgE和IL4的水平均降低。结论甘草酸具有免疫抑制作用,可能通过调节机体的免疫功能,而发挥其抗支气管哮喘免疫炎症反应。关键词:甘草酸;支气管哮喘;免疫调节EffectofGlycyrrhizino
2、nMiceModelofBronchialAsthmaandImmunologyMechanismAbstract:ObjectiveToexploretheeffectofglycyrrhizinonmicemodelofbronchialasthmaandserumIgEandIL4.MethodsThemicemodelofbronchialasthmaicemodelofbronchialasthmaIgEandIL4odelgroup,decreasedinthegroupofglycyrrhizlnin
3、flammatarycellsinfiltrationinpulmonarytissueslicesoftinybronchialIgEandIL4level.ConclusionGlycyrrhizinhaveimmunosuppressiveaction,andcaninhibitbronchialasthmaimmuno-inflammationbyregulatingorganismimmunefunction.Keya;Immunologicalregulation甘草酸来源于中药甘草,是甘草的主要活性成
4、分,已有报道证明甘草酸具有抗炎、抗过敏、抗病毒、抗变态反应、免疫调节等作用,并具有安全无毒的特点[1]。甘草酸可显著抑制抗原提呈细胞对T细胞的过度激活作用,抑制由TNFα介导的细胞免疫作用,调节T细胞释放细胞因子,使Th1/Th2保持平衡.freela),甘草酸:Adrich公司,.freelg氢氧化铝凝胶,用生理盐水稀释到0.5ml。第21天开始用1%卵蛋白雾化激发,通过人工调节雾化量使雾化吸入箱里卵蛋白颗粒浓度维持在10~20mg/m3之间,1次/d,30min,连续7d。对照组小鼠用生理盐水腹腔注射和雾化。每
5、次雾化前泼尼松组小鼠按1.5mg/kg剂量给予泼尼松0.5ml/只灌胃,甘草酸组小鼠给予50mg/kg甘草酸0.5ml/只灌胃,另两组小鼠给予0.5ml/只生理盐水灌胃。1.4标本的收集最后1次雾化吸入后6h,小鼠眼球取血,收集血清,70℃保存备用。取左上肺HE染色,用作常规组织学检查。1.5对小鼠免疫器官的影响取小鼠胸腺和脾脏称重,并计算脾指数和胸腺指数。脾或胸腺指数=脾重或胸腺重(mg)/体重(g)。1.6ELISA检测血清特异性lgE将小鼠血清100μl分别加入待测品孔每孔中,将反应板充分混匀后置37℃60m
6、in,用洗涤液将反应板充分洗涤4~6次,向滤纸上印干。每孔加酶标抗体工作液100μl,将反应板置37℃60min。再次洗板同前。每孔加入底物工作液100μl,置37℃暗处反应15~20min,每孔加入1滴终止液混匀,在492nm处测吸光值。1.7ELISA检测白细胞介素4(IL4)分别将小鼠血清或不同浓度标准品(100μl/孔)加入相应孔中,空白孔除外。用封板胶纸封住反应孔,37℃孵育90min,洗涤4次。除空白孔外,加入生物素化抗体工作液(100μl/孔),37℃孵育60min,洗涤4次,除空白孔外,加入酶结合物
7、工作液(100μl/孔),37℃孵育30min,洗涤4次。加入显色剂100μl/孔避光37℃孵育20min,加入终止液100μl/孔混匀,在450nm处测吸光值。1.8统计分析实验结果以±s表示,采用SPSS10.0统计分析软件计算相应的统计学参数。2结果2.1哮喘小鼠肺组织病理学观察对照组(图1):细、小支气管及肺泡结构正常,支气管粘膜上皮完整,未见炎症细胞浸润;哮喘模型组(图2):支气管内可见黏液栓,气道上皮下有大量嗜酸性粒细胞及淋巴细胞浸润,气道黏膜下组织水肿,纤毛上皮剥离,平滑肌增厚。肺泡隔水肿、增厚。泼尼
8、松组(图3):病理变化基本接近于对照组,支气管及肺组织结构基本正常。病变与哮喘模型组比较,炎症细胞浸润显著减少。甘草酸组(图4):支气管及肺组织结构基本正常,炎症细胞浸润减少。图1对照组(HE×100)(略)图2哮喘模型组(HE×100)(略)图3泼尼松组(HE×100)(略)图4甘草酸组(HE×100)(略)2.2甘草酸组对小鼠免疫器官指数的影响结果见表1