白念珠菌生物膜对卡泊芬净的敏感性研究论文

《白念珠菌生物膜对卡泊芬净的敏感性研究论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、白念珠菌生物膜对卡泊芬净的敏感性研究论文张洁张莉白秦玉陈光仍【摘要】目的探讨新生白念珠菌生物膜对卡泊芬净的敏感性。方法建立白念珠菌生物膜模型，采用标准化念珠菌生物膜抗真菌药物敏感实验法测定白念珠菌生物膜对卡泊芬净和两性霉素B的敏感性。结果30株白念珠菌生物膜中，6株对两性霉素B敏感（SMIC80≤1μg／ml），24株对两性霉素B耐药（SMIC80＞1μg／ml）；28株对卡泊芬净敏感（SMIC80＜16μg／ml），2株对卡泊芬净耐药(SMIC80≥16μg／ml)。经统计学分析，就白念珠菌生物膜的对抗真菌药物的敏感性而言，卡泊芬净和两性霉素B之间有统计学意义（χ2=32.8

2、6,P0.05）。结论白念珠菌生物膜对两性霉素B耐药明显，而对卡泊芬净敏感。张洁（1980～）.freelentofMedicinecollegeinQinghaiUniversity；2.DepartmentofDermatology,theAffiliatedHospitalofQinghaiUniversity)AbstractObjectiveTostudythesensitivityofnestocaspofungin.MethodsCandidaalbicansbiofilmsmodelstoamphotericineBandcaspofunginbyStandar

3、dizedMethod．ResultsAmongofthirtyCandidaalbicansbiofilmsstrains,,sixphotericineB（SMIC80≤1μg／ml）,tphotericineB（SMIC80＞1μg／ml）.tl）;tl).Afterstatisticalanalysis,therephotericineB（χ2=32.86,P0.05）.ConclusionCandidaalbicansbiofilmsareobviouslyresistanttoamphotericineBandrelativelysensitivetocaspofu

4、ngin.KeysCaspofunginAmphotericineB生物膜（biofilm）是指附着于无活力或活组织表面的、由其自身产生的细胞外基质包裹的有结构的菌细胞群体，是相对于单个分散的游离状态菌细胞而言的另一种微生物独特的生存形式［1］，其主要特征是具有高度耐药性［1～3］。卡泊芬净（caspofungin,CAS）是第一个被美国食品与药品管理局批准上市的棘球白菌素类抗真菌药物，是一种β-（l，3）-D-葡聚糖合成酶抑制剂，可特异地抑制真菌细胞壁的组成成分β-（l，3）-D-葡聚糖的合成。主要用于治疗其他抗真菌治疗无效或不能耐受的念珠菌和曲霉感染。其高效安全，患者耐受性

5、好，目前国内外逐渐开始广泛应用，是一种很有前途的系统性抗真菌药物［４］。本研究通过标准化的念珠菌生物膜抗真菌药物敏感实验法检测卡泊芬净对抗白念珠菌生物膜的作用。1材料与方法1.1材料1.1.1药物两性霉素B（amphotericinB,AMB，上海新先锋药业公司提供，批号070103），CAS(默沙东制药有限公司提供，批号J3930）。1.1.2试剂“甲基四氮盐（XTT）-维生素K3（menadione）”溶液：XTT粉末(Sigma公司)用林格液稀释（0．5g／L）后用0．22μm孔径的滤器过滤消毒；维生素K3(Sigma公司)用丙酮稀释（10mmol／L）；将维生素K3加入

6、到XTT溶液中，致其终浓度为1μmol／L，现配现用。1.1.3菌株白念珠菌株30株，均来源于上海长海医院真菌室收集的临床标本。将白念珠菌接种到沙堡琼脂糖培养基（sabouraud'sdextroseagar，SDA）上，在37℃环境下过夜。挑取单克隆菌株，加入到1ml酵母蛋白葡萄糖液基（yeastpeptonedextrose，YEPD）中活化，在摇床（30℃，100rpm）上培养24h；取10μl活化后的菌液，再次活化；取2次活化后的10μl菌液，加入1mlYEPD培养液，在摇床上(30℃，100rpm)培养16h。经血细胞计数器计数，将菌悬液的浓度配制为1.0×106cf

7、u/ml。传菌完毕后用80%甘油冻存白念珠菌。1.1.4培养基SDA及YEPD常规配制；1640培养液：1640粉（Invitrogen公司）10.40g、三氮吗啡啉丙磺酸(Sigma公司)34.53g、碳酸氢钠2.0g加三蒸水900ml溶解,.freell，过滤消毒，40℃保存备用。1.2主要仪器HZQ-F160全温振荡培养箱（太仓市实验设备厂），96孔培养板（美国costar公司），霉标仪（LabsytemsDragon）。1.3方法1.3.1药敏实验［5］将100μl调整好的菌悬液接种