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《细胞因子在慢性病毒性心肌炎心肌纤维作用及清心ⅱ号的干预作用》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、细胞因子在慢性病毒性心肌炎心肌纤维作用及清心Ⅱ号的干预作用作者:刘旺窦丽萍徐百鸿王娟程志清【摘要】[目的]探讨TGFβ1在反复病毒感染致慢性病毒性心肌炎心肌纤维化对纤维连接蛋白及其受体整合素β1表达的影响与清心Ⅱ号干预作用。[方法]建立病毒性心肌炎慢性期心肌纤维化模型后小鼠随机分为模型组、卡托普利治疗组、清心Ⅱ号高、中、低治疗组,正常组和模型组给予生理盐水灌胃,治疗组分别给予卡托普利和清心Ⅱ号高中低剂量灌胃。疗程结束后分别采集心脏,应用RT-PCR技术检测CVB3-RNA;免疫组化技术检测TGFβ1和FN;免疫荧光染色-共激焦扫描分析整合素β1。[结果]造模后TGFβ1、整合素β1
2、、FN明显增高,应用RT-PCR在心肌中可检测出病毒,清心Ⅱ号干预后TGFβ1、整合素β1、FN减低,各治疗组病毒减少。[结论]病毒、TGFβ1、整合素β1及FN在心肌纤维化形成中具有重要作用,清心Ⅱ号具有抗病毒、抗心肌纤维化作用。【关键词】整合素β1;清心Ⅱ号;心肌炎;心肌纤维;TGFβ1;纤维连接蛋白;免疫组化;激光共聚焦 Abstract:[Objective]TostudytheeffectofTGFβ1ontheexpressionoffibronectinandβ1integrinreceptorinchronicviralmyocarditisofmyocardia
3、lfibrosisinducedbyrepeatedvirusinfectionandtheinterventionaleffectofQingXin.[Methods]Establishmicemodelofmyocardialfibrosisinchronicstageofviralmyocarditis,thendividethemicemodelintomodelgroup,captoprilgroup,QingXinⅡhighdose,mediumdoseandloalgroupandmodelgrouparegivensalinethroughstomachperfus
4、ing,asediumandloeent,heartsarecollected,CVB3-RNAaredetectedbyRT-PCR,TGFβ1andFNaredetectedbyimmunohistochemicaltechnique,integrinβ1areanalyzedbyimmunofluorescencestaining-confocallaserscanning.[Results]Afterhavingdonethemodel,TGFβ1,integrinβ1,FNhasincreasedobviously;viruscanbedetectedinthemyoca
5、rdiumbyRT-PCR;aftertheinterventionofQingXinⅡ,TGFβ1,integrinβ1,FNhasdecreased,virushasreducedintreatedgroup.[Conclusion]Virus,TGFβ1,integrinβ1andFNhaveimportanteffectsontheformationofmyocardialfibrosis;QingXinⅡhasthefunctionofantivirusandanti-myocardialfibrosis. Keyyocarditis;myocardialfibrosi
6、s;TGFβ1;fibronectin;immuno-hischemicaltechnique;confocallaserscanning病毒性心肌炎慢性期的主要病理特征为心脏间质纤维化,临床病理表现为心脏顺应性下降,僵硬度增加,进而引起舒张功能障碍,可发展为DCM,同时也是顽固性心律失常、慢性心功能不全难以逆转、猝死的重要原因之一。由于病毒的持续存在,心肌不断损伤,最终导致心肌纤维化,但具体机制欠清,本实验从细胞因子角度阐述纤维化形成机理并进一步阐明清心Ⅱ号抗心肌纤维化的机制。 1材料及方法 1.1实验动物 健康雄性Balb/c小鼠,体重14~16g,购自中科院上海实验动物
7、中心,浙江中医药大学动物实验中心饲养,动物质量合格证号:SCXK(沪)2003-0003,饲养于清洁动物房内,动物饲养设施条件合格证:SYXK(浙)2003-0003。 1.2实验病毒及药物 柯萨奇B3病毒(CVB3)(Nancy株,TCID50=10-7),由复旦大学附属中山医院病毒性心肌病重点实验室提供,本实验室-70℃低温冰箱保存。清心Ⅱ号(人参、丹参、苦参组成),水煎醇提,喷雾干燥,浙江中医药大学药学院制剂室提供。 1.3试剂 免疫组化检测试剂盒EnV