mt1mmp在大肠癌中的表达及统计分析论文

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1、MT1MMP在大肠癌中的表达及统计分析论文【摘要】目的:探讨膜型基质金属蛋白酶1(membranetype1matrixmetalloproteinase,MT1MMP)在大肠癌中的表达及统计分析。方法:收集武汉大学人民医院病理科2004~2009年有完整临床和病理资料的大肠癌存档蜡块40例和5例癌旁组织,采用免疫组织化学SP法检测40例大肠癌和5例癌旁组织中MT1MMP的表达水平。采用HPIAS1000高清晰度彩色病理图文报告管理系统,对MT1MMP的表达进行定量分析,并用SPSS1

2、1.5软件对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率做单因素方差分析和SNK(q)检验。结果:MT1MMP在大肠癌中呈高表达,癌旁组织中呈低表达。大肠癌与癌旁组织相比,差异有显著性(P0.05)。结论:MT1MMP可能通过降解ECM参与肿瘤的侵袭和转移,检测MT1MMP的表达有助于预测肿瘤的转移,为治疗肿瘤提供了新的靶点。【关键词】大肠癌;MT1MMP;免疫组织化学;统计分析近年来,随着人们生活水平的改善和生活习惯的改变,大肠癌的发病率在逐年增加。已由恶性肿瘤的第4位上升到第3位

3、,发达国家如美国估计大肠癌死亡人数56290人,占全年癌症死亡总数的9.9%,仅次于肺而位居第2位1。但其发病机制尚不明确.freel组织切片常规脱蜡至水后,0.01MPBS(pH7.4)漂洗3×3min;抗原修复(柠檬酸缓冲液微波抗原修复法),室温自然冷却后,0.01MPBS(pH7.4)漂洗5×3min;滴加3%过氧化氢,37℃湿盒孵育10min以抑制内源性过氧化物酶活性,0.01MPBS(pH7.4)漂洗3×3min;正常羊血清37℃湿盒孵育10min以减少非特异性背景;甩去多余血清,分别滴加

4、一抗,4℃孵育过夜,0.01MPBS(pH7.4)漂洗3×5min;滴加生物素标记的二抗37℃湿盒孵育10min,0.01MPBS(pH7.4)漂洗3×3min;滴加链霉素抗生物素蛋白过氧化物复合物37℃湿盒孵育10min,0.01MPBS(pH7.4)漂洗3×3min;滴加新鲜配置的DAB显色液显色,光镜下控制反应时间(约3~5min),自来水冲洗终止反应;苏木素复染,流水冲洗,1%盐酸酒精分色数秒,流水冲洗,0.1%氨水返蓝;梯度酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封片并镜检;用PBS代替一抗作为阴

5、性对照组,购买的阳性片作为MT1MMP的阳性对照组。1.2.3免疫组织化学结果判断MT1MMP以细胞浆出现棕黄色颗粒为阳性反应,阴性对照组除细胞核染成蓝色外,应无棕黄色反应物。采用HPIAS1000高清晰度彩色病理图文报告管理系统(同济千屏影像公司)对MT1MMP的表达进行定量分析,每张切片随机选取5个完整而不重叠的高倍镜视野(×400),测定每个视野下阳性反应的平均光密度、阳性反应面积和所有细胞总面积,计算阳性面积率(阳性面积率=单位面积中阳性反应的总面积/单位面积中细胞的总面积×100%

6、)。以每例5个视野的平均光密度、阳性面积率的平均值作为该例的测量值。1.3统计学处理对各组免疫组织化学反应阳性颗粒的平均光密度、阳性面积率作单因素方差分析和q检验,检验水准α为0.05。2结果2.1MT1MMP的表达大肠癌细胞胞浆内可见较多棕黄色颗粒,MT1MMP呈强阳性表达;癌旁组织细胞胞浆内可见少量的棕黄色颗粒,MT1MMP表达弱。图像分析结果显示:大肠癌MT1MMP的平均光密度为1.4728±0.0146;癌旁组织MT1MMP的平均光密度为0.5374±0.0095。大肠癌MT1M

7、MP的阳性面积率为1.6577±0.0159;癌旁组织MT1MMP的阳性面积率为0.6410±0.0087。经q检验,大肠癌与癌旁组织之间,MT1MMP的平均光密度及阳性面积率有显著性差异(P0.05)。见表1。表1大肠癌和癌旁组织MT1MMP表达的平均光密度和阳性面积率注:*大肠癌与癌旁组织比较,P0.05。3讨论大肠癌是最常见的消化系恶性肿瘤之一,虽然临床上对其可采取综合性的治疗措施,但其发病率和死亡率仍居恶性肿瘤的前列,.freelembranetypematrixmetallopro

8、teinase,MTMMP)。基质金属蛋白酶(MMPS)是一组锌离子依赖性内肤酶,在正常组织中广泛表达,涉及组织重建、骨重建和塑型、怀孕和分娩、乳腺组织退化、组织浸润等重要的生理功能,在病理过程如风湿性关节炎、牙周炎、肾小球肾炎、冠心病等也有重要作用,尤其与肿瘤细胞侵袭、转移相关的细胞外基质降解和肿瘤新生血管形成密切相关7~9。MT1MMP作为MMPs家族中的一员,其蛋白质结构具有MMPs家族的基本结构:前肽区、信号肽区、催化区、铰链区和类血红素蛋白结合区五个功能

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