中药白芨建立大鼠脑缺血模型可行性探讨论文

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1、中药白芨建立大鼠脑缺血模型可行性探讨论文王俊涛田铧肖思建尉春晓刘奔李盛梅【关键词】白芨；脑缺血疾病；模型,动物；大鼠【Abstract】AIM:TodevelopanebolicmodelofcerebralischemiainducedbymonbletillatuberinETHODS:Thesuspensionofbletillaparticlesorbletillagumentofneurologicaldefects,redtetrazoline(TTC)stainingandHEstaininged.RESULTS:Fourhour

2、safteroperation,ratsinjectedporaryconsciousdisturbance,andsustainedhemiparesisofcontralaterallimbsiaorinfarctionisphere,iparesisandspontaneouscirclingbehavioronlylastedfor12hafterembolization.CONCLUSION:Bletillaparticlescanbeusedtodevelopasustainedcerebralischemiamodelinrats

3、.【Keyonbletillatuber；cerebralischemiamodel；rats【摘要】目的：以中药白芨作为栓塞剂建立大鼠脑缺血模型，探讨这一新方法的可行性.方法：手术暴露大鼠右侧颈部血管，向右颈内动脉注入一定量的白芨微粒悬液或白芨胶，在术后一定时间内进行神经功能缺失评分、大脑切片红四氮唑（TTC）染色和组织学H.E染色.结果：白芨微粒组大鼠术后4h内呈现意识障碍，持续性对侧肢体轻度偏瘫及环转，TTC染色显示右侧大脑半球额叶、顶叶皮层和基底核附近局灶性缺血或梗塞，光学显微镜下可见缺血区脑组织水肿或坏死，神经元轮廓模糊.freel）

4、微粒，置干净小瓶内封存，高温高压消毒，术前加生理盐水制成5g/L的悬液；白芨胶由济南千佛山医院药剂室协助制备，制备方法参照文献［4］，加生理盐水配成8g/L的溶液.1.2方法术前大鼠禁食12h，禁水3~4h.用100mL/L水合氯醛按3μL/g行腹腔注射麻醉，麻醉前15min股部肌肉注射阿托品（0.05mg/kg）.沿颈正中稍偏右作纵行切口，分离右侧颈总动脉、颈外动脉和颈内动脉及其分支.动脉夹夹闭颈总动脉和颈内动脉的分支翼腭突动脉暂时止血，由颈外动脉缓慢注入白芨栓塞剂：白芨微粒组注入5g/L白芨微粒悬液0.1mL，注射速度控制在0.01mL/s

5、左右；白芨胶组注入8g/L白芨胶0.2mL.注入完毕后结扎颈外动脉、颈总动脉，放开动脉夹.对照组大鼠行模拟手术，分离并结扎颈外动脉和颈总动脉，但不进行栓塞.术后肌肉注射青霉素4万U，2次/d，给药3d.1.3神经功能障碍检查评分术后依照Longa评分法对大鼠神经行为障碍程度进行观察评分［5］.1.4TTC显色和病理学观察于术后1,5d急性处死大鼠并取脑.从距大脑额端5mm处开始冠状切2mm厚的脑片共4片，放入20g/L红四氮唑（TTC）溶液中，置保温箱中避光37℃反应30min，正常组织细胞显红色，梗死组织不显色或呈苍白色.取出后放入含40g/

6、L甲醛的PBS溶液中固定，拍片.然后取双侧大脑外侧沟附近的脑片做石蜡包埋和HE染色，光学显微镜下观察脑组织病理变化.2结果2.1神经行为学障碍评分手术大鼠全部成活.白芨微粒组大鼠术后3~4h存在明显意识障碍（处于半昏迷状态，对刺激有反应），容易向左侧倾倒，4h左右清醒，出现左侧肢体运动障碍、自发向左侧转圈等症状，提尾巴提起可见左前肢向内屈曲，症状恒定持续至5d处死.全部大鼠术后4h~5d评分均大于1分，示栓塞结果有效.白芨胶组大鼠在术后1h内有轻度意识障碍，1h左右清醒，表现为左侧肢体运动障碍，向左侧转圈或倾倒等症状，即评分有效，但术后8~12

7、h症状逐渐消失.对照组大鼠术后20min左右清醒，无异常表现（表1）.表1大鼠神经行为学障碍评分结果（略）评分1示栓塞结果有效.2.2TTC显色结果术后1，5d开颅取脑，发现白芨微粒组大鼠右侧大脑半球额叶、顶叶呈现形状不规则的苍白区.脑冠状切片TTC染色发现右侧大脑半球有苍白色的梗塞区，梗塞部位主要发生于顶叶及额叶皮质层和基底核附近（图1）.白芨胶组术后TTC染色未见明显改变.2.3病理学变化光学显微镜下，白芨微粒组大鼠术后1d可见脑组织局灶性水肿，神经元轮廓模糊，细胞收缩，细胞周围出现间隙等病变；术后5d缺血区脑组织梗塞、出现许多空隙，神经元

8、损伤或坏死，细胞核固缩深染，轴突消失或胞浆崩解（图2）.病变主要见于梗塞部位，主要发生于顶叶及额叶的脑皮质和基底核附近.白芨胶组大鼠术后1d栓塞侧脑皮